純水中為什麼要求dna酶含量
Ⅰ DNA在純水中為何易變性
DNA的骨架磷酸根帶負電,在純水中沒有陽離子來中和它的電性,所以無法維持雙螺旋結構,易變性。
Ⅱ 核酸的保存,小為什麼RNA可以放在純水裡DNA卻不能
你問反了吧,做質粒DNA純化,用試劑盒最後一步洗脫就可以用熱的純水,然後冷凍就專OK了
而對於大多數RNA,由於是單鏈屬,而且環境中有菌,存在大量的 RNA酶 ,一般不容易保存,有些RNA酶熱滅菌都不能失活
Ⅲ DNA酶應激法的原理
原理:限制性內切酶能特異地結合於一段被稱為限制性酶識別序列的DNA序列之內或其附專近的特異位點上屬,並切割雙鏈DNA。
酶切可以是單酶切也可以是雙酶切。單酶切操作比較簡單,但雙酶切如果兩種酶所用緩沖液成分不同(主要是鹽離子濃度不同)或反應溫度不同,這時可以採用如下措施解決:1)先用一種酶切,然後乙醇沉澱回收DNA分子後再用另外一種酶切;2)先進行低鹽要求的酶酶切,然後添加鹽離子濃度到高鹽的酶反應要求,加入第二種酶進行酶切;3)使用通用緩沖液進行雙酶切。具體要根據酶的反應要求進行,盡量避免活力損失。
Ⅳ 細菌提質粒最後一步為什麼要加入無rna酶得水.
只要是純水就可以了,在無金屬離子輔助下,DNA酶一般不起作用。
要沒RNA酶,可能是為了之後的實驗考慮吧。。。
Ⅳ 為什麼DNA復制過程中需要DNA連接酶求大神解惑、
DNA復制過程中需要DNA連接酶的原因:DNA連接酶可以連接DNA鏈3『-OH末端和,另一DNA鏈的回5』-P末端,使二者生成磷酸二酯鍵答,從而把兩段相鄰的DNA鏈連成完整的鏈。
DNA連接酶(DNA Ligase)也稱DNA黏合酶,在分子生物學中扮演一個既特殊又關鍵的角色,那就是連接DNA鏈3『-OH末端和,另一DNA鏈的5』-P末端,使二者生成磷酸二酯鍵,從而把兩段相鄰的DNA鏈連成完整的鏈。連接酶的催化作用需要消耗ATP。
DNA連接酶也稱DNA黏合酶,在分子生物學中扮演一個既特殊又關鍵的角色,那就是把兩條DNA黏合成一條。無論是雙股或是單股DNA的黏合,DNA黏合酶都可以藉由形成磷酸酯鍵將DNA在3'端的尾端與5'端的前端連在一起。雖然在細胞內也有其他的蛋白質,例如像是DNA聚合酶在其中一股DNA為模版的情況下,將另一邊的DNA單股斷裂端,通過聚合反應的過程形成磷酸雙脂鍵(phosphodiester bond)來黏合DNA(DNA連接酶將DNA片段縫合起來,恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸雙脂鍵)。
Ⅵ 為什麼DNA在純水中易變性
DNA在純水中易變性原因:每一個核苷酸的磷酸基上都帶有一個負電荷。版如果這些負電荷權沒有被中和,雙鏈之間的這種強有力的靜電排斥作用將驅使兩條鏈分開(在同一條鏈內雖然也存在著這種靜電斥力,但由於鏈內的共價鍵,這種靜電斥力並不重要)。但是當有鹽類加入時,這些帶負電荷的磷酸基團可以被正離子(如Na+)所中和,也就是正離子圍繞在磷酸基周圍形成了"離子雲",有效地屏蔽了磷酸基之間的靜電斥力。這就是Debye-Hvckel 離子屏蔽理論。
Ⅶ 為什麼空氣中到處都有RNA酶而無DNA酶
首先從酶的角度講:DNA酶比較「嬌氣」,離體之後很容易失活。RNA酶就很強大,熱穩定性高,煮都不能保證它失活版,需要DEPC來滅活,然後再高溫高壓降解DEPC(劇毒)。酶權的穩定性、是否容易失活,是由結構決定的(氨基酸組成、高級結構都有關)。至於這兩種酶的具體結構,可以在NCBI等處查到,可以用生物信息學的手段對他們進行分析。
其次,DNA比RNA穩定,雙鏈內部的鹼基形成疏水的環境、鹼基堆積(疏水作用)排斥周圍的水,外側又有核糖磷酸骨架的保護,使它具有相當穩定的結構,這也是它能夠作為所有細胞生物的遺傳物質的原因之一,就算排除酶切的影響,DNA也比RNA穩定。
Ⅷ 關於DNA和DNA酶的一個疑問
酶也是一種蛋白質,而核苷酸是在外面的,可以直接的反應,對於雞胚細胞來說,是一個完整的細胞結構,要進行反應還得進入細胞。再進入細胞核才行,這個過程是主動運輸的,那樣的蛋白質也是不完整的,沒有效應。
Ⅸ 為什麼限制酶不剪切細菌本身的DNA
因為限制性核酸內切酶是可以識別並附著特定的脫氧核苷酸序列,並對在每條鏈中特定部位的兩個脫氧核糖核苷酸之間的磷酸二酯鍵進行切割的一類酶,簡稱限制酶。
根據限制酶的結構,輔因子的需求切位與作用方式,可將限制酶分為三種類型,分別是第一型(Type I)、第二型(Type II)及第三型(Type III)。
Ⅰ型限制性內切酶既能催化宿主DNA的甲基化,又催化非甲基化的DNA的水解;而Ⅱ型限制性內切酶只催化非甲基化的DNA的水解。III型限制性內切酶同時具有修飾及認知切割的作用。
(9)純水中為什麼要求dna酶含量擴展閱讀:
限制性核酸內切酶用途:
1、用於DNA基因組物理圖譜的組建;基因的定位和基因分離;DNA分子鹼基序列分析;比較相關的DNA分子和遺傳工程。
2、限制性核酸內切酶是由細菌產生的,其生理意義是提高自身的防禦能力.
3、限制酶一般不切割自身的DNA分子,只切割外源DNA。
影響條件:
DNA純度、緩沖液、溫度條件及限制性內切酶本身都會影響限制性內切酶的活性。大部分限制性內切酶不受RNA或單鏈DNA的影響。
分布區域:
限制性核酸內切酶分布極廣,幾乎在所有細菌的屬、種中都發現至少一種限制性內切酶,多者在一屬中就有幾十種,例如在嗜血桿菌屬中(Haemophilus)現已發現的就有22種。
有的菌株含酶量極低,很難分離定性;然而在有的菌株中,酶含量極高.如E. coli的pMB4(EcoRI酶)和H. aegyptius(Hal Ⅲ酶)就是高產酶菌株。
據報道從10g的H. aegyptius的細胞中,能分離提純出可消化l0gλ噬茵體DNA的酶量。到目前為止,細菌是限制性內切酶,尤其是特異性非常強的I類限制性內切酶的主要來源。
Ⅹ 細胞中為什麼含有大量用於修復dna損傷的酶
在機體內,細胞里的DNA分子會因為物理、化學等多種因素的作用,導致鹼基組成版或排列發生變化,出現DNA的損傷權,若這些變化都表現為基因突變,或者影響基因的動能及蛋白的表達,一直這樣的話機體則難以生存,內環境會受到很的的破壞,很多生物學過程也無法正常的進行,因此,細胞里就必須有一套相應的修復機制來應對這一情況,所以會有大量的DNA損傷修復的酶。