純水裂解紅細胞
1. 裂解紅細胞後再加入percoll會怎樣
細胞裂解液一般都用得是含酶的,在血紅細胞表面上有紅細胞專署的表面抗原版,當裂解液中含可以權攻擊特定紅細胞表面抗原的酶的時候就只會造成紅細胞的變形,生物通道擴大,膨脹,裂解,或者引起紅細胞的變性.而不會攻擊其他細胞.另外紅細胞有自己的電負性
2. 求紅細胞裂解液配製方法
現在紅細胞裂解液都是直接買現成的了,可以去北京索萊寶買。
以下是紅細胞裂解液配方:(僅供參考)
1.裂解液:的確是ACK裂解液作用更柔和些
配方:
NH4CL 8.29g
KHCO3 1.00g
Na2EDTA 37.2mg
溶於1000mL蒸餾水, pH 7.2-7.4, 效果一直很好。
注意:
(1) 裂解液如果放在冰箱里,一定要預熱,37度即可。裂解期間試管也可水浴,但如果是夏天室溫比較高則不必;
(2) 裂解5min後立刻離心(從所有管都混勻後計時間);
(3) PBS離心洗滌2次;
(4) 裂解液pH值很重要,最好一次不要配多,時間長效果不好,我一般一次配100mL,
避光保存。
2.離心速度:800-1000rpm,5min
3.研磨輕柔很重要
4.培養淋巴細胞的最佳培養液是RPMI 1640,因為是原代細胞,要用10%胎牛血清。還有非常重要的一點,要想讓細胞增殖得好,必須加二巰基乙醇(beta-2ME)
5.細胞密度1-2X10^6/mL
3. 紅細胞裂解液的配製(在線等!!急!!!)
配製試劑所需材料:
1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate Solution
a) NH4Cl (1.5 M) 80 g
b) KHCO3 (100 nM) 10 g
c) Na4EDTA (10 nM) 3.7 g
d) Distilled H2O 1000 mL
2. 1N HCl or 1N NaOH(調節pH值用)
配製步驟:
1.將以上a、b、c試劑溶於900ml去離子水中;專
2.調節溶液pH值到屬7.2-7.4,加去離子水定容到1000ml;
3.在制備工作液時,將此儲存液稀釋10倍後使用。
保存:
1.10x 儲存液儲存於2-8°C不能超過半年(六個月);
2.在使用前,工作液每天都應該新鮮配製放置於室溫,當日用不完的棄掉。
4. 紅細胞裂解液的作用原理是什麼 拜求答案!
細胞裂解液一般都用得是含酶的,在血紅細胞表面上有紅細胞專署的表面抗版原,當裂解液中含可以攻權擊特定紅細胞表面抗原的酶的時候 就只會造成紅細胞的變形,生物通道擴大,膨脹,裂解,或者引起紅細胞的變性.而不會攻擊其他細胞.另外紅細胞有自己的電負性,滲透脆性(通常是一些非酶細胞裂解液的突破點) ,懸浮穩定性,這都是區別於其他種類細胞的區別點.紅細胞裂解液就是利用這些特性裂解紅細胞的.另外紅細胞裂解液不能達到100% 准確的裂解紅細胞,總會或多或少導致其他種類細胞的裂解.
5. 為什麼紅細胞放入純水中會脹破,而蛙卵不破
因為卵細胞的細復胞膜制在不含有水通道,因而放在水中水分子不會進入.
老的教科書上都認為水是通過自由擴散的方式進入細胞的.2003年Agre因在水通道方面的研究成果而與離子通道的研究者Roderick MacKinnon共享當年的諾貝爾化學獎,水的代謝問題才引起人們的注意,現在可以肯定細胞的水分主要是通過水通道進入細胞的,而卵母細胞不表達水通道蛋白,所以水很難進入.
6. 為什麼紅細胞放入純水中會脹破,而蛙卵不破
蛙卵的表面有一層受精膜,它的張力大。它也吸水後脹大而不破。
7. 紅細胞裂解液,裂解人類紅細胞紅細胞的方法
不知道你用的和我的一樣不,我上次用的華越洋生物的紅細胞裂解液,裂解步回驟如下:首先要把裂解液室溫放置答直到溫度回到室溫,再用去離子水把裂解液(10×)稀釋為1×工作液(1
mL
裂解液加9
mL
去離子水)。
1.每1
mL人類血液加10
mL工作液。
2.室溫放置15分鍾。(注意:放置時間不要超過15分鍾)。
3.加入20
mL自備1×PBS,通過稀釋反應液來終止反應。
4.4℃
300
g
離心10分鍾,吸棄上清液。
5.加入10
mL自備
1×PBS重懸沉澱。
6.300
g離心10分鍾,吸棄上清液。
7.用適當的緩沖液重懸沉澱
8.細胞計數。
8. 為什麼能裂解紅細胞,而幾乎不影響淋巴細胞
你好,從血常規檢查結果顯示,有淋巴細胞數升高和白細胞數值接近回上限,提示有病毒性感染的可答能,請說明有無出現發燒、咽痛、咳嗽、咳痰、肌肉關節酸痛、乏力、腹痛、腹瀉、乏力、淋巴結腫大等症狀,以便於我們判斷清楚病情。急性感染時,尤其是發燒時,會導致紅細胞和紅細胞壓積升高。
9. buffer rcl裂解紅細胞原理
細胞裂解液一般都用的是含酶的,在血紅細胞表面上有紅細胞專屬的表面抗回原,當裂解液中含可以攻答擊特定紅細胞表面抗原的酶的時候 就只會造成紅細胞的變形,生物通道擴大,膨脹,裂解,或者引起紅細胞的變性.而不會攻擊其他細胞.另外紅細胞有自己的電負性,滲透脆性(通常是一些非酶細胞裂解液的突破點) ,懸浮穩定性,這都是區別於其他種類細胞的區別點.紅細胞裂解液就是利用這些特性裂解紅細胞的.另外紅細胞裂解液不能達到100% 准確的裂解紅細胞,總會或多或少導致其他種類細胞的裂解.
10. 紅細胞裂解液配製方法有哪些
具體如下:
1、裂解液:的確是ACK裂解液作用更柔和些
配方:
NH4CL 8.29g
KHCO3 1.00g
Na2EDTA 37.2mg
溶於1000mL蒸餾水,回 pH 7.2-7.4, 效果一直很答好。
注意:
(1) 裂解液如果放在冰箱里,一定要預熱,37度即可。裂解期間試管也可水浴,但如果是夏天室溫比較高則不必;
(2) 裂解5min後立刻離心(從所有管都混勻後計時間);
(3) PBS離心洗滌2次;
(4) 裂解液pH值很重要,最好一次不要配多,時間長效果不好,我一般一次配100mL,
避光保存。
2.離心速度:800-1000rpm,5min
3.研磨輕柔很重要
4.培養淋巴細胞的最佳培養液是RPMI 1640,因為是原代細胞,要用10%胎牛血清。還有非常重要的一點,要想讓細胞增殖得好,必須加二巰基乙醇(beta-2ME)
5.細胞密度1-2X10^6/mL