流動相過濾器
『壹』 我想知道有關實驗室使用的過濾器的一些事情,能幫個忙嗎,用於液相色譜使用的
流動相過濾:採用砂抄芯漏斗+濾膜+真空泵的組合模式。有的是有機相和水相分開過濾,然後混合,超聲波脫氣。這樣就需要兩套砂芯漏斗和濾膜(有機膜、水膜);有的是有機相和水相混合後,一起過濾,此種方式只需一套砂芯漏斗和有機膜。
溶劑過濾:你可以直接使用過濾流動相的砂芯漏斗。
樣品過濾:相信經過上面兩道程序的過濾,配置樣品的溶劑應該很乾凈了,也就不需要針式過濾器了,那是一次性的,實際操作起來太繁瑣;除非,你要檢測的樣品實在太臟,含有肉眼可見的不溶物,那就只能用針式過濾器進行處理了。
按道理,正常是不會出現什麼大問題的。因為,除去以上三種過濾,HPLC自身也存在三層過濾機制:1、流動相的入口 2、泵中砂芯 3、預柱
所以 正常是不會出現堵塞的。
同時,儀器使用完,注意清洗保養也是必要的。水相,鹽分,都是細菌生長的優良環境,是導致堵塞的主要原因。
『貳』 請問HPLC是做什麼的原理操作方法
HPLC是高效液相色譜,英文全稱是High Performance Liquid Chromatography。該方法在化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中被用來做重要的分離分析技術。
用途:高效液相色譜更適宜於分離、分析高沸點、熱穩定性差、有生理活性及相對分子量比較大的物質,因而廣泛應用於核酸、肽類、內酯、稠環芳烴、高聚物、葯物、人體代謝產物、表面活性劑,抗氧化劑、殺蟲劑、除莠劑的分析等物質的分析。
原理:高效液相色譜以液體為流動相,採用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離後,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析和分離。
操作方法:如下圖所示,溶劑貯器中的流動相被泵吸入,經梯度控制器按一定的梯度進行混合然後輸出,經測其壓力和流量,導入進樣閥(器)經保護柱、分離柱後到檢測器檢測,由數據處理設備處理數據或記錄儀記錄色譜圖,餾分收集器收集餾分,廢液瓶收集廢液。
(2)流動相過濾器擴展閱讀:
液相色譜法開始階段是用大直徑的玻璃管柱在室溫和常壓下用液位差輸送流動相,稱為經典液相色譜法,此方法柱效低、時間長(常有幾個小時)。高效液相色譜法(High performance Liquid Chromatography,HPLC)是在經典液相色譜法的基礎上,於60年代後期引入了氣相色譜理論而迅速發展起來的。
HPLC根據固定相和流動相的成分分為正相色譜和反向色譜。
正相色譜法
採用極性固定相(如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相);流動相為相對非極性的疏水性溶劑(烷烴類如正已烷、環已烷),常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調節組分的保留時間。常用於分離中等極性和極性較強的化合物(如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等)。
反相色譜法
一般用非極性固定相(如C18、C8);流動相為水或緩沖液,常加入甲醇、乙腈、異丙醇、丙酮、四氫呋喃等與水互溶的有機溶劑以調節保留時間。適用於分離非極性和極性較弱的化合物。RPC在現代液相色譜中應用最為廣泛,據統計,它占整個HPLC應用的80%左右。
參考資料:網路-高效液相色譜
『叄』 高效液相色譜的流動相要經過過濾,那標准品和待測樣品需不需要過濾呢我是用大鼠腦里的紋狀體測的。
過濾是對系統以及柱子的保護。盡量都用0.45μm(或0.22μm)濾膜過濾。
用Φ13mm的濾頭,2ml的注射器,很少的樣品量也可以過濾的。