離心過濾實驗
㈠ 蛋白質提取實驗,加入提取液震盪,過濾,離心後,待測液能否放置一段
植物組織蛋白質提取方法
1、根據樣品重量(1g樣品加入3.5ml提取液,可根據材料不同適專當加入),准備屬提取液放在冰上。
2、把樣品放在研缽中用液氮研磨,研磨後加入提取液中在冰上靜置(3-4小時)。
3、用離心機離心8000rpm40min4℃或11100rpm20min4℃
4、提取上清液,樣品制備完成。
㈡ 要使懸濁液盡快地澄清,除了離心還有哪些辦法
要想讓懸濁液盡快的澄清,除了離心以外,我覺得添加絮凝劑是一個比較好的辦法,另外,如果你對雜質沒有需求的話,可以通過反復過濾的方式將濁液澄清,同時你也可以在其中加入一定的化學物質,例如說強酸和強鹼,將其中的雜質分解掉,再或者通過蒸餾的方法也能得到澄清的液體。
另外,我覺得離心也是一個比較好的辦法,如果你身邊正好有離心的儀器,這樣不僅能夠迅速的分離濁液,而且分離出的液體也比較純凈。
總而言之,能夠分離懸濁液的方法有很多,但是具體情況還是要看你對懸濁液的需求如何?比如說在進行礦泉水的凈化時,對於我們個人來說,還是比較推薦通過蒸餾的方式進行凈化,這樣得到的水分也比較干凈純粹,但是對於企業,他們一般都會對其加入一些絮凝劑進行凈化,另外我覺得對於離心應該更多的用於化工實驗上面,在日常生活中,我們更多見到的一般都是進行過濾,因為過濾相對的比較簡單方便,而且我們對過濾出的液體並沒有太多的要求,只是簡單的希望它更干凈一點。
以上便是我想到的一些辦法,具體的解決方法還是要看你面臨的情況。
㈢ 實驗室常用固液分離的方法及注意事項
最常用的就是過濾,也會用到沉澱後吸取上清夜的方法。
過濾常用的工具有漏版斗,在漏斗中放入權過濾材料,然後把需要分離的固液混合物倒入漏斗即可。
過濾材料有濾紙、棉花、紗布等,濾紙又分為快速、中速、慢速濾紙。
選用哪種材料過濾取決於實驗對濾夜的澄清度、雜質度的要求.必要時,可以多次過濾。
從廢水中除去固體一般採用篩或沉澱方法。污泥處理中採用的分離方法有污泥重力濃縮、污泥的浮選或污泥的機械脫水。水處理中有微濾、澄清和深床過濾等方法。
把固體和液體分開的過程都是固液分離,方法非常多,沉降,過濾,膜過濾,壓濾,真空,離心機......
固液分離機是利用離心力,分離液體中固體顆粒物和絮狀物的機械。
㈣ 離心機的分類介紹
離心機
離心機的品種很多,依據轉速不同,能夠分為
低速離心機
、
高速離心機
和
超速離心機
,轉速少於6000r/min
的為低速離心機,低於25000r/min
的為高速離心機,超越30000r/min的是超速離心機;依據溫度控制不同,能夠分為
冷凍離心機
和
普通離心機
,冷凍離心機帶有
製冷系統
,能夠控制溫度最低至-20℃,普通離心機不帶製冷系統;依據用處不同,還能夠將離心機分為剖析離心機和制備離心機。
實驗室常用
電動離心機
有低速、高速離心機和低速、
高速冷凍離心機
,以及超速剖析、制備兩用冷凍離心機等多種型號。其中以低速(包括大容量)離心機和高速冷凍離心機應用最為普遍,是
生化實驗室
用來分別制備
生物大分子
必不可少的重要工具。
①
普通(非冷凍)離心機
這類離心機構造較簡單,可分小型台式和落地式兩類,配有驅動電機、
調速器
、定時器等安裝,操作便當。低速離心機轉速普通不超越
4000rpm
,
台式高速離心機
最大轉速可達
18000rpm。
②
低速冷凍離心機
轉速普通不超越4000rpm,最大容量為2~4L,在實驗室中最常用於大量初級分別提取生物大分子、
沉澱物
等。其轉頭多用鋁合金制的甩平式和角式兩種
離心管
有硬質玻璃、聚乙烯
硬塑料
和
不銹鋼管
多種型號。離心機裝配有驅動電機、定時器、
調整器
(速度指示)和製冷系統(溫度可調范圍為-20~+40℃),可依據離心物質所需,改換不同容量和不同型號轉速的轉頭。
③
高速冷凍離心機
轉速可達20000rpm
以上,除具有低速冷凍離心機的性能和構造外,高速離心機所用角式轉頭均用鈦合金和鋁合金製成。離心管為具蓋聚乙烯硬塑料製品。這類離心機多用於搜集微生物、細胞碎片、細胞、大的
細胞器
、硫酸沉澱物以及
免疫沉澱物
等。
④
超速離心機
轉速可達30000rpm
以上,能使亞細胞器分級分別,並用於蛋白質、核酸分子量的測定等。其轉頭為高強度鈦合金製成,可依據需求改換不同容量和不同型號的轉速轉頭。超速離心機驅動電機有兩種,一種為調頻電機直接升速,另一種為經過變速
齒輪箱
升速。為了避免驅動電機在高速運轉中產熱,裝有冷卻驅動電機系統(風冷、水冷),
限速器
、記時器、轉速記載器等。此外,超速離心機還裝配有
抽真空系統
。
㈤ 離心機角轉子和水平轉子的區別
一、離心管中心線與旋轉軸角度不一樣:水平轉子靜止時,轉子中的離心管中心線與旋轉軸平行,旋轉加速時,中心線由平行位置逐漸過渡到與旋轉軸接近垂直的位置,降速時,離心管中心線由與旋轉軸接近垂直的位置逐漸趨向平行位置;角轉子中的離心管中心線與旋轉軸成20~40度的固定角度,角度越大,分離效果越好。
二、適用性不一樣:水平轉子可以做到大容量分離和利於從離心管中分層取出,不宜高速分離;角轉子不宜大容量分離,顆粒沉降時,先沿離心力方向撞向離心管,然後沿管壁滑向管底,管的一側會出現顆粒沉積而產生壁效應,影響分離效果,宜高速分離。
三、重心和阻力不一樣:水平轉子分離重心較高,阻力較大,有少量的壁效應;角轉子可以做到重心低,阻力小,運轉穩。
(5)離心過濾實驗擴展閱讀
過濾式離心機的主要原理是通過高速運轉的離心轉鼓產生的離心力(配合適當的濾材),將固液混合液中的液相加速甩出轉鼓,而將固相留在轉鼓內,達到分離固體和液體的效果,或者俗稱脫水的效果。沉降式離心機的主要原理是通過轉子高速旋轉產生的強大的離心力,加快混合液中不同比重成分(固相或液相)的沉降速度,把樣品中不同沉降系數和浮力密度的物質分離開。
當含有細小顆粒的懸浮液靜置不動時,由於重力場的作用使得懸浮的顆粒逐漸下沉。粒子越重,下沉越快,反之密度比液體小的粒子就會上浮。微粒在重力場下移動的速度與微粒的大小、形態和密度有關,並且又與重力場的強度及液體的粘度有關。象紅血球大小的顆粒,直徑為數微米,就可以在通常重力作用下觀察到它們的沉降過程。
角轉子中的離心管能夠保持固定的角度離心,可以使用較高的轉速,離心後沉澱位於管底的斜面。較大容量的轉子通常可以配不同的「適配器」來「固定」小容量的樣品管,例如6 x 85ml的轉子每孔可以放置85ml的離心管,也可以放50ml或者15—20ml的離心管,實現一物多用;但是由於重量的負擔,大容量轉子的最高轉速相對小的要低一些,因而還要考慮最高離心力是否能滿足實驗要求。
水平轉子配有4或6個吊籃,靜止時垂直掛在轉子上,吊籃有不同的適配器以滿足不同容量的離心管的需要。當轉子轉速超過600rpm後離心管達到水平位置,樣品沉降方向是沿離心管軸向移動,最後沉降在管底,便於收集。因為不如固定角轉子穩固,水平吊籃最高轉速相比固定角轉子要低很多,限於低速離心的范圍。
㈥ 實驗室過濾和離心的作用相同不,離心能發揮過濾嗎
過濾和離心作用不相同
,離心的線速度快
,某種程度上可提高過濾的速度
.
過濾是把不合專要求的顆粒分離出來屬
,
離心是做圓周運動的物體,
速度超過一定數值後而離開圓周運動
.
如豆漿機的工作
,一定程度上離心作用
可提高工作效率
.
㈦ 蛋白質純化所用的柱子有幾種,分別有什麼作用
一、沉澱法
1、 鹽析
實驗原理:中和蛋白質表面電荷並破壞水化膜。
蛋白質易溶於水,因為其分子的-COOH -NH2和-OH都是親水基團,這些基團與極性水分子相互作用形成水化層,包圍於蛋白質分子周圍形成1~100 nm大小的親水膠體,從而削弱了蛋白質分子之間的作用力。當大量鹽加到蛋白質溶液中,高濃度的鹽離子(如硫酸銨的 SO42- 和NH4+)有很強的水化力,可奪取蛋白質分子的水化層,使之"失水",於是蛋白質膠粒凝結並沉澱析出。
2、等電點沉澱法:
實驗原理:利用蛋白質在等電點時溶解度最低而各種蛋白質又具有不同等電點的特點進行分離的方法。
在等電點時,蛋白質分子以兩性離子形式存在,其分子凈電荷為零(即正負電荷相等),此時蛋白質分子顆粒在溶液中因沒有相同電荷的相互排斥,分子相互之間的作用力減弱,其顆粒極易碰撞、凝聚而產生沉澱,所以蛋白質在等電點時,其溶解度最小,最易形成沉澱物。
注意點:不同的蛋白質,具有不同的等電點。同一種蛋白質在不同條件下,等電點不同。
3、有機溶劑沉澱法
實驗原理:加入有機溶劑使水溶液的介電常數降低,因而增加了兩個相反電荷基團之間的吸引力,促進了蛋白質分子的聚集和沉澱。
有機溶劑引起蛋白質沉澱的另一種解釋認為與鹽析相似,有機溶劑與蛋白質爭奪水化水,致使蛋白質脫除水化膜,而易於聚集形成沉澱。
影響因素:(一)有機溶劑的選擇 (二)溫度的控制 (三)pH值 (四)離子強度
用此法析出的沉澱一般比鹽析法易過濾或離心沉降,分離後的蛋白質沉澱應立即用水或者緩沖液溶解,以達到降低有機溶劑的濃度的目的。此法在血液製品的制備過程中較多使用。
二、層析
1、離子交換柱層析
實驗原理:以離子交換劑為固定相,依據流動相中的組分離子與交換劑上的平衡離子進行可逆交換時的結合力大小的差別而進行分離的一種層析方法。是發展最早的層析技術之一,目前已成為蛋白質分離純化最常用的手段,是基於蛋白質電荷不同的分離技術。
離子交換層析中,基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。帶有正電荷的稱之陰離子交換樹脂;而帶有負電荷的稱之陽離子樹脂。陰離子交換基質結合帶有負電荷的蛋白質,所以這類蛋白質被留在柱子上,然後通過提高洗脫液中的鹽濃度等措施,將吸附在柱子上的蛋白質洗脫下來。結合較弱的蛋白質首先被洗脫下來。反之陽離子交換基質結合帶有正電荷的蛋白質,結合的蛋白可以通過逐步增加洗脫液中的鹽濃度或是提高洗脫液的pH值洗脫下來。
2、疏水相互作用層析
實驗原理:根據分子表面疏水性差別來分離蛋白質和多肽等生物大分子的一種較為常用的方法。
蛋白質和多肽等生物大分子的表面常常暴露著一些疏水性基團,我們把這些疏水性基團稱為疏水補丁,疏水補丁可以與疏水性層析介質發生疏水性相互作用而結合。不同的分子由於疏水性不同,它們與疏水性層析介質之間的疏水性作用力強弱不同,疏水作用層析就是依據這一原理分離純化蛋白質和多肽等生物大分子的。
3、親和層析
實驗原理:利用蛋白質能和某些專一分子可逆結合的特性,
當蛋白質溶液通過層析柱時,其中可與親和載體配基相互作用的受體被吸附劑結合,不被吸附的無關成分則可隨流出液通過柱體,從而將吸附蛋白與其他蛋白質分開。此法特異性強,收率高。
4、凝膠層析
實驗原理:根據分子大小分離蛋白混合物的最有效的方法之一。混合物隨流動相流經裝有凝膠固定相的層析柱時,其中各物質因分子大小的的不同而被分離的技術。
三、離心
1、速率區帶離心法
實驗原理根據分離的粒子在離心力作用下,因其在梯度液中沉降速度的不同,離心後具有不同沉降速度的粒子處於不同的密度梯度層內,形成幾條分開的樣品區帶,達到彼此分離的目的。
由於此法是一種不完全的沉降,沉降受物質本身大小的影響較大,一般是應用在物質大小相異而密度相同的情況。容量小,只能用於少量的制備。
2、差速離心法
實驗原理:利用樣品中各組分沉降系數的差異,對不同的微粒施以不同的離心力,經過多次離心,離心速度逐步加大,將不同的微粒依次沉降,從而實現離心分離。
四、膜分離
1、超濾法
是利用加壓膜分離技術,在一定的壓力下,使小分子溶質和溶劑穿過一定孔徑的特製薄膜,大分子溶質滯留,從而使大分子物質得到部分的純化。常和離子交換,凝膠過濾聯合使用。
2、透析
是利用小分子經過半透膜擴散到水( 或緩沖液) 的原理,將無機鹽等小分子與生物大分子分開的一種分離純化技術,常和鹽析,鹽溶等方法聯合使用。
㈧ 下列DNA粗提取的實驗操作中,經離心或過濾後取上清液或濾液的有()A.在新鮮雞血中加入適量的檸檬酸
A、在新鮮雞血中加入適量的檸檬酸鈉防止血液凝固,混合均勻後離心,取內血細胞的沉澱物,A錯誤容;
B、在盛有血細胞的塑料燒杯中加蒸餾水,快速攪拌後過濾,取其含有DNA的濾液,B正確;
C、在2mol/L的氯化鈉溶液中放入絲狀物,能溶解DNA,除去不能溶解的雜質,C正確;
D、在溶有DNA的氯化鈉溶液中緩緩加入蒸餾水,使得DNA析出,過濾取其絲狀物,D錯誤.
故選:BC.
㈨ 葉綠體的制備實驗中兩次離心的沉澱物顏色有什麼不同
葉綠體的制備實驗中兩次離心的沉澱物顏色有深淺不同。
在電子顯微鏡下觀察這版種有缺權陷的葉綠體,發現它含有很少或者根本沒 有葉綠體基質,並且葉綠體外被是破損的或者沒有外被,將這種葉綠體稱為型 葉綠體。相比之下,用溫和方法分離的葉綠體具有完整的被膜,將它稱為型葉 綠體,它能夠完成整個光合作用,包括CO2 的固定。 可以用型或型葉綠體作為分離葉綠體各組分的出發材料,常用型葉綠 體分離葉綠體的亞組分。將葉綠體懸浮在低滲溶液中,破裂外被,接著用等密度 離心分離葉綠體基質、外被、類囊體。如果用型葉綠體作為分離葉綠體亞組分 的出發材料,需要弗氏細胞壓碎器(French pressure cell), 分離到組成葉綠體 的亞組分之後,便可對這些組分化學組成和功能進行分析。用溫和勻漿技術分離型葉綠體,這種類型的葉綠體保留完整的被膜。然後 在低滲條件下破壞葉綠體,使葉綠體的膜、葉綠體基質、類囊體相互分開。
㈩ 實驗室過濾和離心的作用相同不,離心能發揮過濾嗎
過濾和離心作用不相同 ,離心的線速度快 ,某種程度上可提高過濾的速度 .
過濾是把不合要求的顆粒分離出來 , 離心是做圓周運動的物體, 速度超過一定數值後而離開圓周運動 .
如豆漿機的工作 ,一定程度上離心作用 可提高工作效率 .