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多糖過濾

發布時間: 2021-01-28 15:46:04

❶ 0.45um濾膜過濾單糖留下多糖嗎

下午好,不能。不光是0.45um,0.22um和0.14um的濾膜都不能截留多糖,比如常見的水溶性殼聚糖、普專魯蘭和屬海藻酸等等。過濾超大分子量的倒是有一定的截留作用,但漏網之魚還是多的很,不信你試試看,過濾白砂糖水(雙糖)、甜菊糖水(多糖)和殼聚糖(高分子量多糖)時都漏得輕而易舉,濾膜孔徑只適合截留不咋溶解的懸浮物或者高濃度溶液有效,對低濃度或者水溶性極好的沒作用,這種情況下請使用RO膜而非常規濾膜重力壓濾或者抽濾,請酌情參考——另外0.45um孔徑太大了,這玩意兒只能粗濾一下江河湖水除去細沙等不溶性礦物質。

❷ 如何讓分離單糖和多糖

方法一:分級沉澱法
糖類多數可溶於水, 三糖以下尚可溶於乙醇.隨著聚合度的增大,在乙醇中的溶解度逐步降低.根據這一性質,在糖的濃水溶液中,分次加入乙醇,使酵的濃度漸增,5%.10%,15%,20%…90%,分取各次析出的沉澱,在產量和醇濃度之間畫出曲線,以此可以粗略地觀察出糖的組分.若遇糖的衍生物,如甲醚、乙酸醑,其極性低於糖,可在有機溶劑中進行分級沉澱嘲1.多糖的分子量范圍廣,且有共沉澱現象.此法只能作粗略的分離用,需反復進行及綜合使用別的方法才能達到糖的組分均一,物理常數恆定。
方法二:凝膠層析法
凝膠層析法(凝膠過濾法或分子篩層析法)主要利用具有三維網狀結構的多孔性凝膠,其孔徑大小決定於合成凝膠時所加交聯劑的程度.當含有混合溶質的溶液流經適當的凝膠柱時,小分子易擴散入孔中,而大的則不易擴散,各溶質洗脫順序隨分子量由大及小,漸次流出.此法對於不同聚合度的糖類分離特別有效。方法快速、簡單,條件溫和.常用的有葡聚糖凝膠(sephadex G)、瓊脂糖凝膠(SepharoseBio—gel A)、聚丙烯醯胺凝膠(Bio—gel P)等。
方法三:纖維素柱層析
纖維素對多糖的分離,是利用混合糖的溶液,流經預先以另一種溶劑(如乙醇)混懸的纖維素柱,多糖在此多孔支持介質上析出沉澱,再以遞減醇濃度的稀醇逐步洗脫,溶出各種多糖.流出柱的先後順序通常是水溶性大的先出柱,水溶性差的最後出柱,與分級沉澱法正好相反.此法較分級沉澱法為優,因為其接觸面大。。
方法四:離子交換纖維素層析
常用的陽離子交換纖維素有CM-cellulose、P—celhlose、SE—cellulose、SM-cellulose;陰離子交換纖維素有DEAE-cellulose、ECTE—cellulose、PAB-cellulose、TEAE-cellulose等.其中陽離子交換纖維素特別適用於分離酸性、中性多糖和粘多糖.交換劑對多糖的吸附力與多糖的結構有關,通常多糖分子中酸性基團增加則吸附力隨之增加:對於線狀分子,分子量大的較分子量小的易吸附;直鏈的較分枝的易吸附.在pH 6時酸性多糖可吸附於交換劑上,中性多糖則不能被吸附.當用硼砂將交換荊預處理後,則中性多糖也可以被吸附。
方法五:季銨鹽沉澱法
陽離子型清潔劑如十六烷基三甲銨鹽(CTA鹽)和十六烷基吡啶鹽(CP鹽)等和酸性多糖陰離子可以形成不溶於水的沉澱,使酸性多糖自水溶液中沉澱出來,中性多糖留存在母液中而分離.若再利用硼酸絡合物.中性多糖亦可沉澱,或在高pH的條件下,增加中性醇羥基的解離度而使之沉澱。
方法六:制各性區域電泳
分子大小、形狀及所負電荷不同的多糖其在電場的作用下遷移速率是不同的,故可用電泳的方法將不同的多糖分開,電泳常用的載體是玻璃粉.具體的操作是用水將玻璃粉拌成膠狀、裝柱,用電泳緩沖液(如0.05mol/L硼砂水溶液,pH9.3)平衡3天,將多糖加於柱上端,接通電源,上端為正極(多糖的電泳方向是向負極的),下端為負極,其單位厘米的電壓為1.2-2V,電流30—35mA,電泳的時間為5 -12小時.電泳完畢後將玻璃粉載體推出柱外,分割後分別洗脫、檢測。該方法分離效果較好,但只適合於實驗室小規模使用,且電泳柱中必須有冷卻夾層。
方法七:金屬離子沉澱法
銅鹽沉澱多糖,可用CuCl2,CuSO4,Cu(OAc):的溶液或是Fehling試劑、乙二胺銅試劑。通常需加過量的試劑用於沉澱,但Fehling試劑不可太多過量,因其有使多糖銅復合物沉澱重新溶解的危險.沉澱分解恢復可用酸的醇溶液或用螯合試劑.常用的銅鹽分級沉澱法是Fehling試劑法和醋酸銅乙醇法。飽和Ba(OH):溶液可使樹膠類多糖沉澱,特別容易使B(1,4)一D一甘露聚糖沉澱而和木聚糖分離。另據報道,國外多採用LKB柱色譜,用比旋光度、示差折射及紫外檢測多糖,各組分的峰位自動記錄,分離效果高且方便。

❸ 常見的多糖有哪些 他們的提取方法比較

多糖的廣義分類分為: 均一性多糖和不均一性多糖。
均一性多糖:
由一種單糖分子縮合而成的多糖,叫做均一性多糖。自然界中最豐富的均一性多糖是澱粉和糖原、纖維素。它們都是由葡萄糖組成。澱粉和糖原分別是植物和動物中葡萄糖的貯存形式,纖維素是植物細胞主要的結構組分。
1、 澱粉 澱粉是植物營養物質的一種貯存形式,也是植物性食物中重要的營養成分,分為直鏈澱粉和支鏈澱粉。① 直鏈澱粉:許多α-葡萄糖以α(1-4)糖苷鍵依次相連成長而不分開的葡萄糖多聚物。典型情況下由數千個葡萄糖線基組成,分子量從150000到600000。結構:長而緊密的螺旋管形。這種緊實的結構是與其貯藏功能相適應的。遇碘顯蘭色。② 支鏈澱粉:在直鏈的基礎上每隔20-25個葡萄糖殘基就形成一個-(1-6)支鏈。不能形成螺旋管,遇碘顯紫色。澱粉酶:內切澱粉酶(α-澱粉酶)水解α-1.4鍵,外切澱粉酶(β-澱粉酶)α-1.4,脫支酶α-1.6。 2、 糖元 與支鏈澱粉類似,只是分支程度更高,每隔4個葡萄糖殘基便有一個分支。結構更緊密,更適應其貯藏功能,這是動物將其作為能量貯藏形式的一個重要原因,另一個原因是它含有大量的非原性端,可以被迅速動員水解。糖元遇碘顯紅褐色。
3、 纖維素結構 許多β-D-葡萄糖分子以β-(1-4)糖苷鍵相連而成直鏈。纖維素是植物細胞壁的主要結構成份,占植物體總重量的1/3左右,也是自然界最豐富的有機物,地球上每年約生產1011噸纖維素。經濟價值:木材、紙張、纖維、棉花、亞麻。完整的細胞壁是以纖維素為主,並粘連有半纖維素、果膠和木質素。約40條纖維素鏈相互間以氫鍵相連成纖維細絲,無數纖維細絲構成細胞壁完整的纖維骨架。降解纖維素的纖維素主要存在於微生物中,一些反芻動物可以利用其消化道內的微生物消化纖維素,產生的葡萄糖供自身和微生物共同利用。雖大多數的動物(包括人)不能消化纖維素,但是含有纖維素的食物對於健康是必需的和有益的。
4、 幾丁質(殼多糖) N-乙醯-D-葡萄糖胺以(1,4)糖苷鏈相連成的直鏈。
5、菊 糖 :多聚果糖,存在於菊科植物根部。
6、 瓊 脂 :多聚半乳糖,是某些海藻所含的多糖,人和微生物不能消化瓊脂。

不均一性多糖
有不同的單糖分子縮合而成的多糖,叫做不均一多糖。常見的有:透明質酸、硫酸軟骨素等。
有一些不均一性多糖由含糖胺的重復雙糖系列組成,稱為糖胺聚糖(glyeosaminoglycans,GAGs),又稱粘多糖。(mucopoly saceharides)、氨基多糖等。糖胺聚糖是蛋白聚糖的主要組分,按重復雙糖單位的不同,糖胺聚糖有五類:
1、透明質酸
2、硫酸軟骨素
3、硫酸皮膚素
4、硫酸用層酸
5、肝素
6、硫酸乙醯肝素

植物活性多糖的提取方法有多種,在水提醇沉的基礎上,常採用酶解、微波、超聲波,膜處理和CO<2>超臨界萃取等方法進行輔助提取或精製.最常用的還是水提醇沉法.
舉例: 蒽酮比色法,具體步驟
一、儀器、試劑和材料

1.儀器:電子天平,超聲波清洗器,電熱恆溫水浴鍋,抽濾設備,分光光度計,容量瓶,刻度吸管等

2.試劑:

(1)葡萄糖標准液:l00 µg/mL

(2)濃硫酸

(3)蒽酮試劑:0.2 g蒽酮溶於100 mL濃 H2SO4中。當日配製使用。

3.材料:甜高粱,甘草

二.操作步驟

1.葡萄糖標准曲線的製作

取7支大試管,按下表數據配製一系列不同濃度的葡萄糖溶液:

管號
1
2
3
4
5
6
7

葡萄糖標准液(mL)
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.6
0.8

蒸餾水(mL)
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.4
0.2

葡萄糖含量(µg)
0
10
20
30
40
60
80

在每支試管中立即加入蒽酮試劑4.0mL,迅速浸於冰水浴中冷卻,各管加完後一起浸於沸水浴中,管口加蓋,以防蒸發。自水浴沸騰起計時,准確煮沸l0 min,取出,用冰浴冷卻至室溫,在620 nm波長下以第一管為空白,迅速測其餘各管吸光值。以標准葡萄糖含量(µg)為橫坐標,以吸光值為縱坐標,繪出標准曲線。

2.植物樣品中可溶性糖的提取:將樣品粉碎,105 ºC烘乾至恆重,精確稱取1~5 g,置於50mL三角瓶中,加沸水25mL,加蓋,超聲提取10 min,冷卻後過濾(抽濾),殘渣用沸蒸餾水反復洗滌並過濾(抽濾),濾液收集在50mL容量瓶中,定容至刻度,得可溶性糖的提取液。

3.稀釋:吸取提取液2mL,置於另一50mL容量瓶中,以蒸餾水定容,搖勻。

4.測定:吸取1 mL已稀釋的提取液於試管中,加入4.0 mL蒽酮試劑,平行三份;空白管以等量蒸餾水替代提取液。以下操作同標准曲線製作。根據A620平均值在標准曲線上查出葡萄糖的含量(µg)。

三、結果處理:

C × V總 × D

樣品含糖量(%)= ————————————— × 100%

W × V測 × 106

其中:C——在標准曲線上查出的糖含量(µg),

V總——提取液總體積(mL),

V測——測定時取用體積(mL),

D——稀釋倍數,

W——樣品重量(g),

106——樣品重量單位由g換算成µg的倍數

溶劑提取法
溶劑提取法是從植物中提取多糖的常用方法,溶劑提取法首先要考慮的因素是選擇溶劑,一般應遵循相似相溶的原則,即極性強的有效成分選擇極性強的溶劑,極性弱的成分選擇極性弱的溶劑。多糖是極性大分子化合物,應選擇水、醇等極性強的溶劑。在所有溶劑中,水是典型的強極性溶劑,對植物組織的穿透力
強,提取效率高,在生產上使用安全。它能用於各種植物多糖,被廣泛應用。用水作溶劑來提取多糖時,可以用熱水浸煮提取,也可以用冷水浸提。水提取的多糖大多是中性多糖。一般植物多糖提取多數採用熱水浸提法,該法所得多糖提液可直接或離心除去不溶物;或者利用多糖不溶於高濃度乙醇的性質,用高濃度乙醇沉澱提純多糖;但由於不同性質或不同相對分子質量的多糖沉澱所需乙醇濃度不同,它也可以用於樣品中不同多糖組分的分級分離;還可按多糖不同性質在粗分階段利用混合溶劑提取法對植物中不同的多糖進行分離;其中,以乙醇沉澱最為普遍。劉青梅等在紫菜粗多糖提取方式研
究中,熱水提取控制條件為:溫度為20~100℃,水與紫
菜的液固質量比為50:1,提取時間30~180min,經多次
試驗最終得率為2.05%。周峙苗得到熱水浸提羊棲菜
多糖的最佳因素:浸提溫度為煮沸(102℃),pH為3.0,
浸提時間為3h,液固質量比為40:1。李戰對三種紫球
藻的提取工藝研究表明,三種紫球藻的最佳提取工藝
各不相同。銅綠紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
5%,乙醇用量為3倍體積,醇沉時間為1.5h。氯仿與正
丁醇的比例4:1,樣液與Sevag試劑的比例1:2,作用時
間為15min。淡色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
75%,乙醇用量為2倍體積,醇沉時間為1h,氯仿與正
丁醇的比例3:1,樣液與Sevag試劑的比例1:2,作用時
間為45min。血色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
50%。乙醇用量為1倍體積,醇沉時間為0.5h,氯仿與
正丁醇的比例4:1,樣液與Sevag試劑的比例2:1,作用
時間為45min。
酸鹼提取法
有些多糖適合用稀酸或鹼溶液提取,才能得到更
高的提取率。但酸鹼提取法有其特殊性,因多糖類的不
同而異。只在一些特定的植物多糖提取中佔有優勢,而
且即使有優勢,在操作上還應嚴格控制酸鹼度。因為
某些多糖在酸性或者鹼性較強時,可能引起多糖中糖
苷鍵的斷裂。另外,稀酸、稀鹼提取液應迅速中和或迅
速透析,濃縮與醇析而獲得多糖沉澱。趙宇等對海篙
子多糖的提取方法研究發現,從硫酸根含量及粗多糖
產率看酸提方法好於水提方法。具體方法為:100g海
篙子乾粉,加入1000ml 0.1mo1/L HCL溶液提取。室溫
攪拌1h後過濾,重復操作三遍,合並濾液;濾液減壓濃
縮至總體積的1/5,再加入95%乙醇至乙醇濃度達
30%,沉澱,離心除去沉澱中的褐藻酸,繼續向上清液
中加入乙醇至乙醇濃度達7%。室溫放置過夜使沉澱
完全,離心,沉澱乾燥得海篙子粗多糖,多次試驗算得
平均產率為3.35%。
孟憲元等在茜草多糖提取研究中發現酸提相對
多於水提,以稀酸提取茜草多糖,產品純度較高。具體
方法如下茜草根粗粉1000g 5%HCL浸泡、離心、取上
清液加入ETOH並調節至濃度為7%,靜置,2500rpm
離心,收集棕色沉澱物,95%ETOH洗滌3次,用45%
HCL溶解。加1%活性炭脫色,真空抽濾,濾液4℃過
夜,棄去容器底部少許沉澱物。溶液置透析袋內,逆水
法透析3d,冷凍乾燥,得白色粉末狀多糖約10g。
Hayashi Katsuhiko發明了一種從綠色藻類中提取酸
性多糖的方法,而這種多糖用常規的熱水法是無法得到的。具體過程為:將乾燥的綠藻粉末製成懸浮液,熱
水浸泡提取或將含水綠藻直接用熱水提取後離心分
離,取粘稠的固狀物,加入鹼水,在pH≥10的條件下
再進行攪拌提取,鹼水提取液在攪拌的同時加入酸水
調節pH值為3.0~4.0,靜置沉降後離心得酸性多糖。
1.3生物酶提取法
酶技術是近年來廣泛應用到有效成份提取中的一
項生物技術,在多糖的提取過程中,使用酶可降低提取
條件,在比較溫和的條件中分解植物組織,加速多糖的
釋放或提取。此外,使用酶還可分解提取液中澱粉、果
膠、蛋白質等的產物,常用的酶有蛋白酶,纖維素酶,果
膠酶等。孟江研究不同酶對大棗渣多搪提取效果的
影響,根據多糖得率、多糖含量及蛋白質含量進行綜合
評分得到最適合的酶為復合酶2(先胰蛋白酶提取,後
木瓜蛋白酶提取),接下來依次是木瓜蛋白酶、復合酶、
(木瓜蛋白酶+胰蛋白酶)、胰蛋白酶、胃蛋白酶
(pH=7.0)、胃蛋白酶(pH=2.0)。復合酶2作用條件溫
和,多糖得率及含量較高,且蛋白含量較低,實為一種
理想的酶提取劑。通過進一步正交實驗考察得出最佳
工藝:先用胰蛋白酶3%,40倍體積在pH=7.0,65℃溫
浸1.5h後,再加木瓜蛋白酶2.5%,在pH=7.0,50℃水
溫浸1h,過濾殘渣加40倍體積水,迅速升溫至80℃,
然後溫浸1.5h。
此外,植物多糖的提取方法還有超濾法,超聲波強
化法,微波法等等。植物多糖的提取方法和技術在不斷
改進和創新,但對於同一種方法和技術又需在不同植
物多糖的提取中研究考察。在選取提取分離方法的同
時,應當根據目標多糖的特點、物理化學性質,綜合比
較,進行實驗,選取最佳方法和提取工藝。

❹ 實驗室多糖的提取方法請問有幾種和具體步驟求各位老師指點一下

多糖的廣義分類分為: 均一性多糖和不均一性多糖。
均一性多糖:
由一種單糖分子縮合而成的多糖,叫做均一性多糖。自然界中最豐富的均一性多糖是澱粉和糖原、纖維素。它們都是由葡萄糖組成。澱粉和糖原分別是植物和動物中葡萄糖的貯存形式,纖維素是植物細胞主要的結構組分。
1、 澱粉 澱粉是植物營養物質的一種貯存形式,也是植物性食物中重要的營養成分,分為直鏈澱粉和支鏈澱粉。① 直鏈澱粉:許多α-葡萄糖以α(1-4)糖苷鍵依次相連成長而不分開的葡萄糖多聚物。典型情況下由數千個葡萄糖線基組成,分子量從150000到600000。結構:長而緊密的螺旋管形。這種緊實的結構是與其貯藏功能相適應的。遇碘顯蘭色。② 支鏈澱粉:在直鏈的基礎上每隔20-25個葡萄糖殘基就形成一個-(1-6)支鏈。不能形成螺旋管,遇碘顯紫色。澱粉酶:內切澱粉酶(α-澱粉酶)水解α-1.4鍵,外切澱粉酶(β-澱粉酶)α-1.4,脫支酶α-1.6。 2、 糖元 與支鏈澱粉類似,只是分支程度更高,每隔4個葡萄糖殘基便有一個分支。結構更緊密,更適應其貯藏功能,這是動物將其作為能量貯藏形式的一個重要原因,另一個原因是它含有大量的非原性端,可以被迅速動員水解。糖元遇碘顯紅褐色。
3、 纖維素結構 許多β-D-葡萄糖分子以β-(1-4)糖苷鍵相連而成直鏈。纖維素是植物細胞壁的主要結構成份,占植物體總重量的1/3左右,也是自然界最豐富的有機物,地球上每年約生產1011噸纖維素。經濟價值:木材、紙張、纖維、棉花、亞麻。完整的細胞壁是以纖維素為主,並粘連有半纖維素、果膠和木質素。約40條纖維素鏈相互間以氫鍵相連成纖維細絲,無數纖維細絲構成細胞壁完整的纖維骨架。降解纖維素的纖維素主要存在於微生物中,一些反芻動物可以利用其消化道內的微生物消化纖維素,產生的葡萄糖供自身和微生物共同利用。雖大多數的動物(包括人)不能消化纖維素,但是含有纖維素的食物對於健康是必需的和有益的。
4、 幾丁質(殼多糖) N-乙醯-D-葡萄糖胺以(1,4)糖苷鏈相連成的直鏈。
5、菊 糖 :多聚果糖,存在於菊科植物根部。
6、 瓊 脂 :多聚半乳糖,是某些海藻所含的多糖,人和微生物不能消化瓊脂。

不均一性多糖
有不同的單糖分子縮合而成的多糖,叫做不均一多糖。常見的有:透明質酸、硫酸軟骨素等。
有一些不均一性多糖由含糖胺的重復雙糖系列組成,稱為糖胺聚糖(glyeosaminoglycans,GAGs),又稱粘多糖。(mucopoly saceharides)、氨基多糖等。糖胺聚糖是蛋白聚糖的主要組分,按重復雙糖單位的不同,糖胺聚糖有五類:
1、透明質酸
2、硫酸軟骨素
3、硫酸皮膚素
4、硫酸用層酸
5、肝素
6、硫酸乙醯肝素

植物活性多糖的提取方法有多種,在水提醇沉的基礎上,常採用酶解、微波、超聲波,膜處理和CO<2>超臨界萃取等方法進行輔助提取或精製.最常用的還是水提醇沉法.
舉例: 蒽酮比色法,具體步驟
一、儀器、試劑和材料

1.儀器:電子天平,超聲波清洗器,電熱恆溫水浴鍋,抽濾設備,分光光度計,容量瓶,刻度吸管等

2.試劑:

(1)葡萄糖標准液:l00 µg/mL

(2)濃硫酸

(3)蒽酮試劑:0.2 g蒽酮溶於100 mL濃 H2SO4中。當日配製使用。

3.材料:甜高粱,甘草

二.操作步驟

1.葡萄糖標准曲線的製作

取7支大試管,按下表數據配製一系列不同濃度的葡萄糖溶液:

管號
1
2
3
4
5
6
7

葡萄糖標准液(mL)
0
0.1
0.2
0.3
0.4
0.6
0.8

蒸餾水(mL)
1
0.9
0.8
0.7
0.6
0.4
0.2

葡萄糖含量(µg)
0
10
20
30
40
60
80

在每支試管中立即加入蒽酮試劑4.0mL,迅速浸於冰水浴中冷卻,各管加完後一起浸於沸水浴中,管口加蓋,以防蒸發。自水浴沸騰起計時,准確煮沸l0 min,取出,用冰浴冷卻至室溫,在620 nm波長下以第一管為空白,迅速測其餘各管吸光值。以標准葡萄糖含量(µg)為橫坐標,以吸光值為縱坐標,繪出標准曲線。

2.植物樣品中可溶性糖的提取:將樣品粉碎,105 ºC烘乾至恆重,精確稱取1~5 g,置於50mL三角瓶中,加沸水25mL,加蓋,超聲提取10 min,冷卻後過濾(抽濾),殘渣用沸蒸餾水反復洗滌並過濾(抽濾),濾液收集在50mL容量瓶中,定容至刻度,得可溶性糖的提取液。

3.稀釋:吸取提取液2mL,置於另一50mL容量瓶中,以蒸餾水定容,搖勻。

4.測定:吸取1 mL已稀釋的提取液於試管中,加入4.0 mL蒽酮試劑,平行三份;空白管以等量蒸餾水替代提取液。以下操作同標准曲線製作。根據A620平均值在標准曲線上查出葡萄糖的含量(µg)。

三、結果處理:

C × V總 × D

樣品含糖量(%)= ————————————— × 100%

W × V測 × 106

其中:C——在標准曲線上查出的糖含量(µg),

V總——提取液總體積(mL),

V測——測定時取用體積(mL),

D——稀釋倍數,

W——樣品重量(g),

106——樣品重量單位由g換算成µg的倍數

溶劑提取法
溶劑提取法是從植物中提取多糖的常用方法,溶劑提取法首先要考慮的因素是選擇溶劑,一般應遵循相似相溶的原則,即極性強的有效成分選擇極性強的溶劑,極性弱的成分選擇極性弱的溶劑。多糖是極性大分子化合物,應選擇水、醇等極性強的溶劑。在所有溶劑中,水是典型的強極性溶劑,對植物組織的穿透力
強,提取效率高,在生產上使用安全。它能用於各種植物多糖,被廣泛應用。用水作溶劑來提取多糖時,可以用熱水浸煮提取,也可以用冷水浸提。水提取的多糖大多是中性多糖。一般植物多糖提取多數採用熱水浸提法,該法所得多糖提液可直接或離心除去不溶物;或者利用多糖不溶於高濃度乙醇的性質,用高濃度乙醇沉澱提純多糖;但由於不同性質或不同相對分子質量的多糖沉澱所需乙醇濃度不同,它也可以用於樣品中不同多糖組分的分級分離;還可按多糖不同性質在粗分階段利用混合溶劑提取法對植物中不同的多糖進行分離;其中,以乙醇沉澱最為普遍。劉青梅等在紫菜粗多糖提取方式研
究中,熱水提取控制條件為:溫度為20~100℃,水與紫
菜的液固質量比為50:1,提取時間30~180min,經多次
試驗最終得率為2.05%。周峙苗得到熱水浸提羊棲菜
多糖的最佳因素:浸提溫度為煮沸(102℃),pH為3.0,
浸提時間為3h,液固質量比為40:1。李戰對三種紫球
藻的提取工藝研究表明,三種紫球藻的最佳提取工藝
各不相同。銅綠紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
5%,乙醇用量為3倍體積,醇沉時間為1.5h。氯仿與正
丁醇的比例4:1,樣液與Sevag試劑的比例1:2,作用時
間為15min。淡色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
75%,乙醇用量為2倍體積,醇沉時間為1h,氯仿與正
丁醇的比例3:1,樣液與Sevag試劑的比例1:2,作用時
間為45min。血色紫球藻的最優提取工藝為乙醇濃度
50%。乙醇用量為1倍體積,醇沉時間為0.5h,氯仿與
正丁醇的比例4:1,樣液與Sevag試劑的比例2:1,作用
時間為45min。
酸鹼提取法
有些多糖適合用稀酸或鹼溶液提取,才能得到更
高的提取率。但酸鹼提取法有其特殊性,因多糖類的不
同而異。只在一些特定的植物多糖提取中佔有優勢,而
且即使有優勢,在操作上還應嚴格控制酸鹼度。因為
某些多糖在酸性或者鹼性較強時,可能引起多糖中糖
苷鍵的斷裂。另外,稀酸、稀鹼提取液應迅速中和或迅
速透析,濃縮與醇析而獲得多糖沉澱。趙宇等對海篙
子多糖的提取方法研究發現,從硫酸根含量及粗多糖
產率看酸提方法好於水提方法。具體方法為:100g海
篙子乾粉,加入1000ml 0.1mo1/L HCL溶液提取。室溫
攪拌1h後過濾,重復操作三遍,合並濾液;濾液減壓濃
縮至總體積的1/5,再加入95%乙醇至乙醇濃度達
30%,沉澱,離心除去沉澱中的褐藻酸,繼續向上清液
中加入乙醇至乙醇濃度達7%。室溫放置過夜使沉澱
完全,離心,沉澱乾燥得海篙子粗多糖,多次試驗算得
平均產率為3.35%。
孟憲元等在茜草多糖提取研究中發現酸提相對
多於水提,以稀酸提取茜草多糖,產品純度較高。具體
方法如下茜草根粗粉1000g 5%HCL浸泡、離心、取上
清液加入ETOH並調節至濃度為7%,靜置,2500rpm
離心,收集棕色沉澱物,95%ETOH洗滌3次,用45%
HCL溶解。加1%活性炭脫色,真空抽濾,濾液4℃過
夜,棄去容器底部少許沉澱物。溶液置透析袋內,逆水
法透析3d,冷凍乾燥,得白色粉末狀多糖約10g。
Hayashi Katsuhiko發明了一種從綠色藻類中提取酸
性多糖的方法,而這種多糖用常規的熱水法是無法得到的。具體過程為:將乾燥的綠藻粉末製成懸浮液,熱
水浸泡提取或將含水綠藻直接用熱水提取後離心分
離,取粘稠的固狀物,加入鹼水,在pH≥10的條件下
再進行攪拌提取,鹼水提取液在攪拌的同時加入酸水
調節pH值為3.0~4.0,靜置沉降後離心得酸性多糖。
1.3生物酶提取法
酶技術是近年來廣泛應用到有效成份提取中的一
項生物技術,在多糖的提取過程中,使用酶可降低提取
條件,在比較溫和的條件中分解植物組織,加速多糖的
釋放或提取。此外,使用酶還可分解提取液中澱粉、果
膠、蛋白質等的產物,常用的酶有蛋白酶,纖維素酶,果
膠酶等。孟江研究不同酶對大棗渣多搪提取效果的
影響,根據多糖得率、多糖含量及蛋白質含量進行綜合
評分得到最適合的酶為復合酶2(先胰蛋白酶提取,後
木瓜蛋白酶提取),接下來依次是木瓜蛋白酶、復合酶、
(木瓜蛋白酶+胰蛋白酶)、胰蛋白酶、胃蛋白酶
(pH=7.0)、胃蛋白酶(pH=2.0)。復合酶2作用條件溫
和,多糖得率及含量較高,且蛋白含量較低,實為一種
理想的酶提取劑。通過進一步正交實驗考察得出最佳
工藝:先用胰蛋白酶3%,40倍體積在pH=7.0,65℃溫
浸1.5h後,再加木瓜蛋白酶2.5%,在pH=7.0,50℃水
溫浸1h,過濾殘渣加40倍體積水,迅速升溫至80℃,
然後溫浸1.5h。
此外,植物多糖的提取方法還有超濾法,超聲波強
化法,微波法等等。植物多糖的提取方法和技術在不斷
改進和創新,但對於同一種方法和技術又需在不同植
物多糖的提取中研究考察。在選取提取分離方法的同
時,應當根據目標多糖的特點、物理化學性質,綜合比
較,進行實驗,選取最佳方法和提取工藝。

❺ 凝膠過濾分離多糖 多糖樣品的濃度范圍

多糖樣品的濃度在20mg/ml左右

❻ 多糖會堵超濾膜嗎

是否堵膜考慮兩個方面,1、過濾孔徑大小 2、過濾物質是否會粘附架橋, 多糖分子回量一般不會超過10000 現有超答濾膜截流分子量一般范圍6000-50萬之間(有廠家聲稱可做到2000、3000),如果是單純的多糖溶於水,只要選擇大於多糖分子量的過濾孔徑,一般是不會堵的 其次就是考慮溶液粘度 每個廠家都會根據自己產品特性提粘度要求,一般要求不超過20

❼ 提取物多糖的常用脫色工藝以及條件

正常脫色都來是用活性炭的。自把糖熔融然後把活性炭(先加120,過濾後再加180的)加進去攪拌,然後過濾就可以了。過濾兩次,一次用120的 一次用180的。
要是小試就沒有必要那麼麻煩,直接用180的就可以。

❽ 多糖含量會因為過濾而降低嗎

多糖種類有很多,水溶性一般.一些多糖溶液黏度高,因此會沾附於過濾裝置.

❾ 多糖脫色什麼方法最好

正常脫色都是用活性炭的。把糖熔融然後把活性炭(先加120,過濾後再加180的)內加進去攪拌,然容後過濾就可以了。過濾兩次,一次用120的 一次用180的。
要是小試就沒有必要那麼麻煩,直接用180的就可以。

❿ 多糖提取中加入95%乙醇沉澱後用什麼過濾 多大孔徑的

是為了除去沉澱物之中的水分。由於水提醇沉法沉澱物多為多糖、蛋白質等大分內子復合物,具有容較強的吸水性。沉澱物單憑烘乾無法除去其中的水分,會使沉澱產物含有較多的水分,影響產物性狀(是產物呈膠狀,而非粉末狀固體)以及純度是產物無法進行精確的定量分析。醇沉後用無水乙醇洗滌,除去一部分水分;再用可溶於水的丙酮洗滌,確保水分除凈;最後用無水乙醚洗滌沉澱物,除去殘存的乙醇、丙酮和溶於其中的水分。這樣就可以得到較純的多糖或蛋白質了。

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