混合型陽離子交換固相萃取柱

Ⅰ 王教授你好，我想問一下關於三聚氰胺的檢測方法，都有哪些謝謝你的幫助。

三聚氰胺(melamine)簡稱三胺, 學名三氨三嗪, 別名蜜胺、氰尿醯胺、三聚醯胺，分子式：、 C3N3(NH2)3 。分子量：126.12，是一種重要的氮雜環有機化工原料〔2〕。三聚氰胺顯弱鹼性，能夠與各種酸反應生成三聚氰胺鹽。在強酸或強鹼液中，三聚氰胺發生水解，胺基逐步被羥基取代，生成三聚氰酸二醯胺、三聚氰酸一醯胺和三聚氰酸。三聚氰胺與醛類反應生成加成化合物。三聚氰胺與醛反應製成樹脂，三聚氰胺樹脂是一種多種用途的材料，防火耐熱且有很高的穩定性，用於生產塑料、廚房用具、防火纖維、商業濾膜、膠水和阻燃劑，部分亞洲國家，也被用來製造化肥。
2 材料與試劑
2.1 儀器與條件
Agilent 1100高效液相色譜儀（美國，Agilent公司）；二極體陣列檢測器（DAD），檢測波長240nm，柱溫：40℃。
（1）Agela VenusilTM ASB C18（ 4.6×250mm）；緩沖液：10mM檸檬酸, 10mM庚烷磺酸鈉； 流動相：緩沖溶液:乙腈=85:15；流速：1.0mL/min。
（2）Agela VenusilTM ASB C8（ 4.6×250mm）；流動相：緩沖液：乙腈=85：15；緩沖液：10mM檸檬酸，10mM辛烷磺酸鈉，調pH為3.0；流速：1.0mL/min；
離子交換固相萃取柱Agela ClearnertTM PCX(北京艾傑爾科技有限公司)
2.2 試劑與樣品
寵物飼料樣品（農業部飼料供應中心提供）；甲醇、乙腈為北京艾傑爾科技有限公司提供；氨水、乙酸鉛、三氯乙酸、均購於北京化學試劑公司；三聚氰胺標准品、檸檬酸、辛烷磺酸鈉（Sigma公司）；甲醇為色譜純，其他均為化學純。
3 實驗方法
3.1樣品前處理方法
(1) 標准樣品配製：
取50mg三聚氰胺標准品，以20%甲醇溶解定容至50mL得到1000ppm的標准溶液，使用時，以提取液(0.1%三氯乙酸)稀釋至所要的濃度。

(2) 提取：
稱取飼料樣品5g，加入50ml 0.1%三氯乙酸提取液，充分混勻，加入2mL 2%乙酸鉛溶液，超聲20min。然後取部分溶液轉移至10mL離心管中，8000rpm/min離心10min，取上清液3mL過混合型陽離子交換小柱(PCX)。

(3) 凈化(PCX小柱，60mg/3mL) ：
a) 活化及平衡：3mL甲醇，3mL水
b) 上樣：加入提取液3mL
c) 淋洗：3mL水；3mL 甲醇；棄去淋洗液並將小柱抽干。
d) 洗脫：5mL 5%氨化甲醇(v/v)洗脫。(5%氨化甲醇的配製：5mL氨水+95mL甲醇)。
e) 濃縮：50℃，氮氣吹乾，20%甲醇/水定容至2mL，HPLC分析或衍生後GC/MS分析。

3.2 HPLC檢測方法

3.2.1 三聚氰胺HPLC-UV檢測方法

三聚氰胺是強極性化合物，在傳統的反相C18柱上保留很差，需要用離子對試劑色譜方法才能有良好的保留與分離，按照美國食品葯品監督管理局（FDA）的三聚氰胺檢測方法和中國農業部公布的三聚氰胺檢測方法，採用艾傑爾(Agela) ASB系列親水色譜柱，可以得到良好的分離效果，分析色譜圖如下：

圖2 Venusil ASB 色譜柱分離三聚氰胺的譜圖

(a) 色譜柱：Venusil ASB C8 4.6×250mm；標准：FDA方法；流動相：緩沖液：乙腈=85：15；緩沖液：10mM檸檬酸，10mM辛烷磺酸鈉，調pH為3.0；流速：1.0mL/min；柱溫：40 oC；波長：240nm
(b) 色譜柱：Venusil ASB-C18 4.6×250mm；標准：中國農業部頒標准方法；緩沖液：10mM檸檬酸, 10mM庚烷磺酸鈉； 流動相：緩沖溶液:乙腈=85:15；流速：1.0mL/min;柱溫：40℃；波長：240nm
空白加水平（mg/L） 回收率
0.01 116%
0.1 108%
0.5 92%
2 96%

由上表1可以看出：用PCX柱凈化樣品，可以得到滿意的回收率，此方法處理樣品，比FDA公布的前處理方法更加准確、可靠。

3.2.2 三聚氰胺LC-MS檢測方法

由於FDA公布的HPLC-UV方法中，流動相添加了離子對試劑，因此限制了液質聯用方法的使用；但不用離子對試劑色譜方法，三聚氰胺在傳統的C18柱上保留很差，不能得到較好的分離定量〔3〕。
基於此問題，艾傑爾科技公司自主開發了新的方法，採用艾傑爾(Agela) ASB系列親水色譜柱，不用離子對試劑也能得到有效的保留與分離。因此方法中流動相不含離子對試劑，可以用於質譜檢測。
與FDA 2007年4月公布的《Updated FCC Developmental Melamine Quantitation (HPLC-UV)》相比較，該方法大大降低了最低檢測限（MSD：0.5ppm；UV：2ppm），提高了檢測靈敏度。
以該方法分別在ASB-C8 4.6×250mm ASB-C18 4.6×250mm 得到的譜圖如下：

圖3 LC-MS方法檢測三聚氰胺的譜圖

緩沖液：10mM的NH4AC；流動相：Buffer:：ACN=95：5；流速：1.0mL/min；進樣量：樣品先用70%ACN溶解成約1mg/mL，用ACN稀釋成0.1mg/mL，進10uL；柱溫：40℃；波長：240nm
4 結果與討論

4.1陽離子交換柱(PCX)

三聚氰胺呈弱鹼性(弱陽離子化合物)，凈化過程一般應選擇陽離子交換柱。混合型的陽離子交換柱(PCX)通過將磺酸基團(-SO3H)鍵合在極性高聚物聚苯乙烯/二乙烯苯（PEP）吸附劑上，具有陽離子交換和反相吸附兩種機理，並具有以下優點：
a) 可通過兩種不同溶液的洗滌(水/一定pH值的緩沖溶液和有機溶劑)，使樣品更干凈，提高檢測的靈敏度。
b) 批次重復性好。
c) 回收率高，重現性好，即使小柱跑干也可以得到較高回收率。

4.2 LC-MS方法優點：

（1）檢測過程簡便：無須添加離子對試劑，三聚氰胺就可得到良好的保留與分離，避免了配製離子對流動相的復雜過程。
（2）提高了檢測的靈敏度：無離子對試劑，可以用於質譜檢測器，大大降低了最低檢測限（MSD：0.5ppm；UV：2ppm）。
（3）降低了檢測成本：不用離子對試劑，就不再需要買價格較貴的離子對試劑了，從而降低了檢測成本。
（4）延長了色譜柱的使用壽命：避免了使用離子對試劑減少色譜柱壽命的影響。
（5）該方法所使用的色譜柱具有通用性：無論是用FDA方法、中國農業部部頒標准方法和本公司開發的LC-MS方法，使用艾傑爾(Agela) ASB系列親水色譜柱均能得到一個很好的檢測結果，從而給客戶提供了多種選擇空間。

Ⅱ 混合型陽離子交換固相萃取柱用英文怎麼說

Mixed mode cation exchange solid phase extraction column

Ⅲ 固相萃取柱的固相萃取柱規格

常見的固相萃取柱大都以聚乙烯為材料的注射針筒型裝置，該裝置內裝有兩片以聚丙烯或玻璃纖維為材料的塞片，兩個塞片中間裝填有一定量的色譜吸附劑（填料）。固相萃取柱上端敞開，下端為出液口，液體經過吸附劑後從出口排出。根據經典固相萃取柱填料上方的空間體積，固相萃取柱的規格可分為1 mL、3 mL、6 mL、10 mL、15 mL、20 mL、30 mL、60 mL等等。也有根據具體應用要求而生產的特殊規格的固相萃取柱。從固相萃取柱的外觀看，經典的固相萃取柱與注射針筒相近，是直筒型的。另外一種固相萃取柱上端是漏斗形，便於在手動操作時一次性載入較多的樣品。
無篩板SPE柱是一種一體型的新型SPE柱。 該產品採用奧秘科技獨家工藝對C18和C8等鍵合硅膠填料進行特殊處理，使之具有較高的機械強度和韌性，無需在柱中加入聚乙烯多孔擋板作為支撐。該奧秘專有技術產品「一體型SPE固相萃取柱 」是國內外市場上最早出現的一體型SPE柱。產品優勢：1、無篩板，完美避免了由篩板引起的「非特異性吸附」。2、填料穩固定能良好，不會出現常見的填料鬆散等問題。3、整體填料一體化設計，有效避免了「溝渠效應」。4、可選用粒徑低至8-10μ的填料，極大地提高了分離效能和載樣量。

Ⅳ 固相萃取小柱的優點是什麼

優點就是可以分離融沸點相近的物質！！！
嘿嘿，小胥！

Ⅳ 固相萃取柱裡面的代號是什麼意思比如C 18 ,C 20.SCX代表什麼意思。謝謝！

都是柱子的型號，一般都用C18柱。
scx代表陽離子交換柱

Ⅵ HPLC用反相C8柱，做飼料中的三聚氰胺含量，但回收率低於60%，且目標峰與雜質峰分離不好，請問如何解決啊，

用國標檢測，回收率一般在75~85%之間，你的那麼低考慮換個廠家的SPE小柱試試，目標峰和雜質峰分離不好，可能是基體干擾，可以考慮改變流動相的比例，最後定容樣品也用流動相試試。

Ⅶ 使用陽離子固相萃取柱前為什麼要用甲醇和水活化

要是使用的是高聚物基質的陽離子柱，可直接上樣，不用活化，要是使用的是硅膠基質的陽離子柱，活化是為了打開鍵合在硅膠上的碳基團鏈，使之充分發生作用，甲醇是為了與碳鏈互溶，用水過度是為了能和樣品溶液相溶。

Ⅷ 如何正確使用固相萃取柱

用異丙醇浸泡填料，在柱下端放微孔濾膜，開動真空泵抽，這樣填料均勻分布，上面再加一層內篩板壓實。外面買容的成品柱兩頭都有篩板，將填料夾在中間，這樣不會散。如果沒有條件可以試試棉花，但是這只用於大體積的制備柱。小柱還是不適合。