mollipore超濾管有假的嗎
A. 我的超濾管裡面有很多小管子怎麼試漏
這個相當的簡單,你可以買一瓶碳素黙水倒在超濾管內,再把超濾管的進水口接到自來水籠頭上,打開水籠頭,如果出來的水有顏色,說明這支超濾管漏的,如果出來的水與自來水一樣清,說明這支超濾管是好的。
B. 流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白.B
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。 通常應截留分子回量不應答大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。 若目的蛋白分子量為10kD左右
C. 有1000分子量的超濾離心管嗎
超濾離心管可以用來分離蛋白和聚乙二醇的
聚乙二醇(PEG)是一種分子量很小的試回劑,而超濾管答的截留分子量一般是在3000道爾頓~10000道爾頓之間。絕大多數蛋白可以被截留在超濾管上層,而聚乙二醇可以穿透濾膜到達超濾管下層
所以超濾離心管可以用來分離蛋白和聚乙二醇的離心管就是一個簡單的可以承受高轉速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉澱。 離心超濾管會有一個類似於內管和外管的兩個部分,內管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了
D. 超濾離心管能耐受甲醇等有機溶劑嗎
超濾機的超濾膜,很多都是用酒精(乙醇)試劑來殺菌的
E. 超濾管3kd是3kd的都下去嗎
3KD指的是截留分子來量
截留分子量(自MWCO:molecular weight cutoff)是使用分子量大小表示的超濾膜的截留性能,又稱作切割分子量。
由於直接測定超濾膜的孔徑相當困難,所以使用已知分子量的球狀物質進行測定。如膜對被截留物質的截留率大於90%時,就用被截留物質的分子量表示膜的截留性能,稱為膜的截留分子量。實際上,所使用的物質並非絕對的球形,由於試驗條件的限制,所測定的截留率也有一定的誤差,所以截留分子量不能絕對表示膜的分離性能。也就是說3KD分子量的產品有可能透過膜也有可能被膜攔截,一般來說希望3KD的產品全部透過,需要選擇截留分子量更大的膜,比如5KD
F. 離心管和離心超濾管分別是做什麼用的,這個兩個有什麼區別!
離心管就是一個簡單的可以承受高轉速壓力的管子,比如離一些樣品,分離回出上清沉澱.離心超濾管答會有一個類似於內管和外管的兩個部分,內管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內管中),就是超濾的原理.常用於濃縮樣品.
G. 超濾管能用於強鹼或強酸溶液的超濾嗎
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。
通常應截留分子量不專應大於目的蛋白屬分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。
若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。
認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。
然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。
操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。
質量和重心二者都要達到平衡。
注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。
注意,一定要等離心機達到目的轉速之後,方可離開
離心機,否則離心機出問題時,無法第一時間處理,後果不可預測。
膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。
在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
H. 取50ul國產Bradford溶液 ,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白.
先回答你的問題:
Bradford溶液現在自己配也行(其實就是考馬斯亮藍溶液),不過買商品化的也很多,可以買Bradford蛋白定量試劑盒之類的東西。可以用這個試劑檢測溶液中蛋白的濃度。如果要自己配,可以參考:http://..com/link?url=7UwTia_b3FPpAaia
在用超濾管的時候,保留在上方的是所需蛋白樣品,超濾膜下方收集到的溶液就是流穿液。
這個意思應該是說,如果超濾完全保留蛋白,流穿液中理論是沒有蛋白的,所以加入bradford溶液(棕紅色)是不應該引起溶液變色的。但是如果有蛋白,會與Bradford溶液反應,變成藍色。但是也有問題,超濾膜只能保留一定分子量以上的蛋白,如果截留分子量比較大,例如30K或者更大,有一些小的蛋白還是會進到流穿液的,會產生變色反應,而且肉眼觀察變色,也沒有辦法給出具體蛋白的量,可能還是用儀器檢測一下比較好。