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deae離子交換柱

發布時間: 2020-12-16 06:05:32

『壹』 如果蛋白質等電點是6.2,用deae柱子,應選用多大ph值上柱子

如果蛋白質等電點是6.2,用DEAE柱子,應選用8.0左右的pH值上柱子
DEAE是陰離子交換柱,當環境pH高於蛋白質等版電點的時候權,蛋白質可以結合上陰離子柱。考慮到要穩定的結合一般選擇的環境pH要高於等電點值1.5左右。同時考慮維持蛋白質的穩定,環境pH一般選擇偏中性的值。

『貳』 DEAE陰離子交換色譜一般上樣量是多少

原子失去或獲得電子後所形成的帶電粒子叫離子,例如鈉離子Na+。帶電的原子團亦稱"離子",如硫內酸根離容子。某些分子在特殊情況下,亦可形成離子。
帶一個或多個負電荷的離子稱為"負離子",亦稱"陰離子"。
很多陰離子是原子由於自身的吸引作用從外界吸引到一個或幾個電子使其最外層電子數達到8個或2個電子的穩定結構。 半徑越小的原子其吸收電子的能力也就越強,就越容易形成陰離子,非金屬性就越強。 非金屬性最強元素是氟。原子最外層電子數大於4的電子,形成陰離子(非金屬物質顯負價,陰離子用符號"-"表示。)
常見陰離子:氯離子Cl- 硫離子S2- 氫氧根OH-

『叄』 DEAE-纖維素離子交換層析法可用於分離純化蛋白質,主要是由於:

答案D
分配層析利用樣品各組分在固定相和流動相間溶解度的不同內(分配系數不同)來進行分離;容吸附層析法利用吸附劑表面對樣品組分吸附能力強弱不同來進行分離;親和層析由於配體與待分離物質進行特異性結合;DEAE-纖維素離子交換層析法利用樣品組分對離子交換劑靜電力的差異來進行分離。

『肆』 Deae52陰離子交換柱上樣量怎麼確定,想盡可能上很多樣品,但是不會影響分離效果

陰離子交換器抄 又叫陰床,襲作用是用陰樹脂中的氫氧根交換掉水中的其他陰離子。離子交換器分為:鈉離子交換器、陰陽床、混合床等種類,。離子交換柱(器)外殼一般採用硬聚氯乙烯(PVC)、硬聚氯乙烯復合玻璃鋼(PVC-FRP)、有機玻璃(PMMA)、有機玻璃復合透明玻璃鋼(PMMA-FRP)、鋼襯膠(JR)、不銹鋼襯膠等材質。主要用於鍋爐、熱電站、化工、輕工、紡織、醫葯、生物、電子、原子能及純水處理的前道處理,工業生產所需進行硬水軟化去離子水制備的場合,還可用於食品葯物的脫色提純,貴重金屬、化工原料的回收,電鍍廢水的處理等。 有機玻璃離子交換裝置耐腐蝕、無色透明、適用於食品、醫葯、製糖及電子工業小規模純水制備。碳鋼襯膠離子交換裝置具有制水量大、強度高、成本低等特點,適用於大型鍋爐軟化水及大規模純水制備。

『伍』 DEAE纖維素離子交換柱後面的數字意義

DEAE-纖維素 DEAE cellulose DEAE-纖維素 DEAE cellulose 二乙氨乙基纖維素陰離交換纖維素 DEAE—纖維素化:稱取IgDEAE32或52放入5ml量筒加蒸回餾水浸泡夜答觀察溶脹DEAE體積根據所需層析柱柱床體積計算所需DEAE

『陸』 DEAE纖維素柱的原理

DEAE纖維素柱原理,基於離子交換層析:離子交換層析中,基質是由帶有電荷的樹脂或纖版維素組成。

陰離子交權換基質結合,帶有負電荷的蛋白質,然後這類蛋白質被留在柱子上,然後通過提高洗脫液中的鹽濃度等措施,將吸附在柱子上的蛋白質從而洗脫下來。

(6)deae離子交換柱擴展閱讀:

基本信息:

性狀:乾燥纖維狀。

用途:用於柱色譜分析,用以分離提純多糖、肽、核苷酸、酶、血清組分和病毒等,陰離子交換填料。

保存:常溫乾燥封袋保存。

DEAE—纖維素的使用方法:

稱取IgDEAE32或52,放入5ml量筒中,加蒸餾水浸泡過夜,觀察溶脹後DEAE的體積。根據所需層析柱的柱床體積計算所需DEAE的用量,稱取所需DEAE用蒸餾水浸泡過夜,其間換幾次水,每次除去細小顆粒。

抽干,改用0.5mol/LNaOH溶液浸泡1h以上,抽干(可用布氏漏斗),用無離子水漂洗,使pH至8左右(用pH試紙檢查)。再改用0.5mol/LHCl溶液浸泡1h以上,去酸溶液,用無離子水洗至pH6左右。本實驗中在用前應以0.0175mol/L,pH6.7磷酸鹽緩沖液,浸泡平衡後使用。

『柒』 deae陰離子交換柱去除內毒素需要在一定的緩沖體系中嗎

DEAE是陰離子交換柱,一般適合於等電點比較低的酸性蛋白。
另外DEAE在結合內毒素上有很好的效果,所以在很多蛋白去除內毒素時可以用到DEAE。

『捌』 用過的sephadex G-25層析柱和DEAE纖維素離子交換柱再生的方法為什麼不一樣

飛秒檢測發現sephadex G-25層析柱填料是葡聚糖交聯的凝膠柱,G-X, X:(1)交聯度。X越小,交聯度越大,網孔越小,適用於分離低分子量產品,反之亦然。(2)吸水量。為凝膠得水值的10倍.例如,G-25為每克凝膠膨脹時吸水2.5克.凝膠柱使用一次後,必須反沖疏鬆一次,平衡後再使用。若使用數次,就需要再生處理。用0.1mol/L NaOH-0.5mol/L NaCl溶液浸泡,然後用蒸餾水洗至中性備用。若實驗完畢,將再生後的凝膠在布氏漏鬥上用蒸餾水洗滌抽干,再用95%乙醇洗兩次,在60℃烘箱中烘乾,回收保存。
DEAE-纖維素為二乙氨乙基纖維素,是陰離子交換劑。基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。離子交換層析中,基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。帶有正電荷的稱之陰離子交換樹脂;而帶有負電荷的稱之陽離子樹脂。離子交換層析同樣可以用於蛋白質的分離純化。由於蛋白質也有等電點,當蛋白質處於不同的pH條件下,其帶電狀況也不同。陰離子交換基質結合帶有負電荷的蛋白質,所以這類蛋白質被留在柱子上,然後通過提高洗脫液中的鹽濃度等措施,將吸附在柱子上的蛋白質洗脫下來。結合較弱的蛋白質首先被洗脫下來。反之陽離子交換基質結合帶有正電荷的蛋白質,結合的蛋白可以通過逐步增加洗脫液中的鹽濃度或是提高洗脫液的pH值洗脫下來。離子交換劑的再生與保存離子交換劑可在柱上再生。如離子交換纖維素可用2mol/:NaCl淋洗柱,若有強吸附物則可用0.1mol/LNaOH洗柱;若有脂溶性物質則可用非離子型去污劑洗柱後再生,也可用乙醇洗滌,其順序為:0.5mol/LNaOH-水-乙醇-水-20%NaOH-水。保存離子交換劑時要加防腐劑。對陰離子交換劑宜用0.002%氯已定(洗必泰),陽離子交換劑可用乙基硫柳汞(0.005%)。有些產品建議用0.02%疊氮鈉。
兩種填料的抗酸鹼性和抗腐蝕性能不同。

『玖』 DEAE-52離子交換色譜柱精製多糖 在加洗脫劑前會不會有多糖出來

這個理論上來說是不會有多糖出來的,但是實際上會有很少的部分會流出,這取決於吸附劑的多少,和能力的強弱

『拾』 deae-陰離子纖維素的使用方法

DEAE-纖維素的處理及裝柱
(1)處理
本實驗採用的是DEAE-纖維素DE 52 是弱酸型陰離子交換劑,具體處理方法為:先將DE52陰離子交換劑乾粉浸泡於蒸餾水中,去除雜質;再在0.5N的HCL溶液中浸泡1-2h,再用無離子水或蒸餾水洗至pH值中性或PH4以上,並將其在抽濾漏斗中抽干;將抽乾的離子交換劑浸泡在0.5N的NaOH溶液中1-2h,再用無離子水或蒸餾水將其洗至中性。
(2)裝柱
將層析柱清洗干凈垂直固定到層析架上,加1/3體積的無離子水,打開下出液口,水流暢通,即刻將小燒杯中裝有適宜濃度的柱材,輕輕倒入層析柱中,凝膠自然慢慢沉降再層析柱底部,凝膠沉積直到離層析柱上端1.5-2cm處,停止裝柱。層析柱上端進液口連接恆流泵,下出口連接蛋白質監測儀,待層析柱的平衡。
(3)平衡
在柱層析上樣前必須對層析柱進行平衡,所謂平衡就是將層析柱中的溶液用層析過程的緩沖液(洗脫液)置換出來,使層析柱中的緩沖系統與柱層析過程中的系統一致。其方法是:利用層析柱上端的恆流泵將平衡緩沖液泵入到層析柱內,打開層析柱下端的出口,平衡液流速在0.5-1ml/min,當下出口流出液的PH值與平衡緩沖液的PH值一致時,層析柱達到了平衡。在本實驗中,用0.002M Tris-HCL緩沖液PH7.4(內含0.0001M EDTA),預先將DE-52柱進行平衡。

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