蛋白樣品中有糖無法超濾濃縮
『壹』 常用的濃縮蛋白樣品的方法有哪些
1、沉澱法(蛋白質的沉澱性質)
2、吸附法(吸水劑)
3、凍干法(真空低溫脫水)
4、超濾法(分子量)
『貳』 蛋白質電泳所加樣品在濃縮膠中跑的不成一條直線,為什麼怎麼解決
濃縮膠的意思就是讓蛋白濃縮嘛!由於濃縮膠的孔徑比較大,分離膠的孔徑較小所以蛋白質在濃縮膠中快速運動,到分離膠時速度變慢,就被壓到一塊了。加溴酚
『叄』 蛋白用超濾管濃縮容易沉澱怎麼辦
可能是這個蛋白的水溶性較差,也就是只能保持在一定濃度不能太高
另外就內和這個蛋白容的穩定性有關了,超濾時保持低溫,體積縮小一點後就把濾液混勻避免局部濃度過高,選擇更合適的緩沖液,添加一點甘油等小分子物質等都可以增加蛋白的穩定性。
『肆』 Western的蛋白樣品加過loading buffer煮沸以後,還能用Amicon Ultra-0.5 mL 超濾離心管進行超濾濃縮富集么
應該可以吧。你試完後也告我一聲。
『伍』 蛋白在超濾管濃縮過程中出現沉澱怎麼辦
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。
通常應截留分子量不應專大於目的蛋屬白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。
若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。
注意,一定要等離心機達到目的轉速之後,方可離開
離心機,否則離心機出問題時,無法第一時間處理,後果不可預測!膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
『陸』 western中的蛋白質樣品沒濃縮成一條直線有影響嗎
首先得確認你配置膠的濃度以及配膠的試劑沒問題,如果濃度沒問題的話,應該是膠板下面(原先圈著的膠條位置)存有氣泡沒有趕跑,把氣泡用吸管趕走後就OK了
『柒』 蛋白質溶液中混有少量葡萄糖,提純為什麼用滲析,而不用鹽析
(1)可以用鹽析,你的想法不錯,鹽析後,蛋白質不會變性!
(2)鹽析後,蛋白質就會沉澱!
『捌』 「蔗糖可以用來濃縮蛋白樣品」為什麼是錯的
蛋白樣品,看見樣品二字了嗎,它不是活性的蛋白
『玖』 怎麼去除多糖中的蛋白
去除蛋白質習慣上用Sevag法即:氯仿:戊醇或丁醇 4:1 與要去蛋白質溶液的量為5:1,振搖,去專沉澱即是。去多糖採用屬乙醇沉澱法,即視多糖分子量大小於溶液中加無水乙醇達到乙醇含量70-90%(v/v),去沉澱即是。
『拾』 蛋白濃縮過程中,培養基的糖類物質如何去除
可以採用脫鹽或者透析的方法去除培養基內的糖類物質
如果蛋白可以鹽析,也能去除糖類物質