離子交換柱保留時間
離子交換樹脂防脫水:
離子交換樹脂裡面含有一定的水分,離子交換樹脂中的水分非常的重要,如果離子交換樹脂脫水,離子交換樹脂在重新濕潤時可能會爆裂或破碎,那我們應該如何防止樹脂脫水,防止樹脂脫水的措施有以下幾點:
1. 如果離子交換樹脂暫時不使用,最好不要將打開樹脂的包裝,讓樹脂保持在密封的狀態。
2. 不能將離子交換樹脂儲存在能夠被太陽直射的區域,防止樹脂被曬干。
3. 離子交換樹脂的儲存溫度不能高於40攝氏度。
4. 如果需要儲存很長的時間,就需要定期的檢查樹脂的包裝是否完好,有沒有被打開過,如果有包裝破損了,要及時的封口並貼上標簽,防止樹脂脫水。
5. 離子交換樹脂使用了一段時間後,如果需要停止使用,在樹脂停止使用的期間,要用濃度為10%食鹽水浸泡樹脂,防止樹脂脫水。
離子交換樹脂防凍:
離子交換樹脂內含有水分,在溫度低於0攝氏度之後,可能會發生凍結,導致離子交換樹脂損壞,防止離子交換樹脂凍結的措施有以下幾點:
1. 當溫度在0攝氏度以下時,應該做好離子交換樹脂的保溫措施,可以將離子交換樹脂儲存在不同濃度的食鹽水中,防止凍結。
2. 如果溫度在-17攝氏度以下,可以用水和乙二醇適當比例的混合液,完全浸泡離子交換樹脂。
3. 如果離子交換樹脂已經凍結,只能把離子交換樹脂移動到溫度稍微高一點的地方,讓其緩慢自然解凍,不能使用其他方法,以免離子交換樹脂受到熱損傷,凍結的離子交換樹脂袋要輕拿輕放,以免離子交換樹脂受到機械損傷。
離子交換樹脂防微生物:
離子交換樹脂使用時間長了,可能會生長一定的微生物,會造成流量、水質和處理能力方面的問題,防止微生物生長的措施有以下幾點:
1. 對樹脂進行反洗,去除碎片以及懸浮的污染物。
2. 如果離子交換樹脂被有機物污染了,可以使用鹼性鹽清潔樹脂,對有機物進行清除。
3. 在重新啟動設備之前,可以通過對樹脂床進行消毒的方式,防止微生物的生長。
Ⅱ 色譜儀,沒插純化器,做色柱活化有什麼後果
一般的正相反相柱應該都能反沖,只有兩端篩板孔徑不對稱的柱子不能反沖,不過目前這樣的柱子已經比較少見了。反沖是為了把柱頭的污染物沖洗掉,反沖後還是正著用比較好,以免柱子的兩頭都被污染。我們一直提倡的是:正向使用,反向沖洗。
2、我在做方法開發的時候,用乙腈和水作為流動相,在調整梯度的時候發現,剛開始用60%乙腈, RT為2.5分鍾,調到40%乙腈,RT沒有變化,30%也沒有變化,一直調到20%的時候,RT突然變到了約13分鍾,請問這是什麼原因?我用的是離子交柱。
答:離子交換柱的保留時間主要由洗脫液的離子強度和pH決定,你現在講的比較簡單,需要把你的方法說的詳細一點才能做具體的分析。譬如分析物是什麼情況,其含有極性電離基團和非極性基團是什麼性質?離子交換柱是聚合物基質還是硅膠基質?水相是什麼緩沖鹽?
3、對於一根常用的c18柱,拿到一根新柱的時候應該怎樣進行活化及維護?為什麼要這樣做?
答:新柱活化,實際上是一個平衡的過程,除了用流動相平衡外,有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡,特別是測定分子量比較高的多肽,尤其重要。因為分子量高的物質分子,擴散速度慢,平衡所需時間也相應較長。具體平衡方式也很簡單,多進幾次樣品,直到峰面積和保留時間穩定,再進行正式進樣測定。
如果要加快平衡時間,把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大,或者不等洗脫完成,連續進樣多針。用待測物對新柱平衡,目的是將硅膠基質填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。
4、測定多肽,一般採用什麼柱子?流動相是乙腈和水,還有微量的TFA。特別是像類似三肽的短肽,應該怎麼選擇柱子?
答:分子量不高的多肽一般選用常規C18柱就能測定,也有用離子交換柱、水性C18柱和Hilic親水作用柱的。
5、氨基柱在進酸性樣品時,很傷柱子,如使用一段時間後,柱效降低,峰形改變,如何恢復?
答:氨基柱測酸性樣品,應該是用氨基柱的HILIC模式。酸的存在可能會使略帶負電荷的氨基官能團質子化,導致使用一段時間後對於某些類的分析物保留性質有所改變或表現在柱效下降。建議:用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱(沖洗後當然要再用不含鹼的流動相洗去多餘氨),之後再進行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1%。
Ⅲ 為什麼可以利用色譜峰的保留時間進行色譜定性分析
色譜過程抄的本質是待分離物質分子襲在固定相和流動相之間分配平衡的過程,不同的物質在兩相之間的分配會不同,這使其隨流動相運動速度各不相同,隨著流動相的運動,混合物中的不同組分在固定相上相互分離。
所以可以用色譜峰的保留時間進行色譜定性分析。
Ⅳ 離子交換樹脂的保存
樹脂防脫水:
樹脂裡面含有一定的水分,樹脂中的水分非常的重要,如果樹脂脫水,樹脂在重新濕潤時可能會爆裂或破碎,那我們應該如何防止樹脂脫水,防止樹脂脫水的措施有以下幾點:
1.如果樹脂暫時不使用,最好不要將打開樹脂的包裝,讓樹脂保持在密封的狀態。
2.不能將樹脂儲存在能夠被太陽直射的區域,防止樹脂被曬干。
3.樹脂的儲存溫度不能高於40攝氏度。
4.如果需要儲存很長的時間,就需要定期的檢查樹脂的包裝是否完好,有沒有被打開過,如果有包裝破損了,要及時的封口並貼上標簽,防止樹脂脫水。
5.樹脂使用了一段時間後,如果需要停止使用,在樹脂停止使用的期間,要用濃度為10%食鹽水浸泡樹脂,防止樹脂脫水。
樹脂防凍:
樹脂內含有水分,在溫度低於0攝氏度之後,可能會發生凍結,導致樹脂損壞,防止樹脂凍結的措施有以下幾點:
1.當溫度在0攝氏度以下時,應該做好樹脂的保溫措施,可以將樹脂儲存在不同濃度的食鹽水中,防止凍結。
2.如果溫度在-17攝氏度以下,可以用水和乙二醇適當比例的混合液,完全浸泡樹脂。
3.如果樹脂已經凍結,只能把樹脂移動到溫度稍微高一點的地方,讓其緩慢自然解凍,不能使用其他方法,以免樹脂受到熱損傷,凍結的樹脂袋要輕拿輕放,以免樹脂受到機械損傷。
樹脂防微生物:
樹脂使用時間長了,可能會生長一定的微生物,會造成流量、水質和處理能力方面的問題,防止微生物生長的措施有以下幾點:
1.對樹脂進行反洗,去除碎片以及懸浮的污染物。
2.如果樹脂被有機物污染了,可以使用鹼性鹽清潔樹脂,對有機物進行清除。
3.在重新啟動設備之前,可以通過對樹脂床進行消毒的方式,防止微生物的生長。
樹脂儲存的注意事項:
1.每過一段時間就需要檢查原包裝袋是否破損,如果有破損需要及時更換包裝袋。
2.如果樹脂暫時不使用,最好不要將打開樹脂的包裝,讓樹脂保持在密封的狀態。
3.不能將樹脂儲存在能夠被太陽直射的區域,防止樹脂被曬干。
4. 樹脂在儲存過程中,要防止有異味、有害物品及強氧化劑混雜堆放。
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Ⅳ 求教大神,離子交換樹脂能保存多久啊,我最近整理的時候發現了一袋5年前的離子交換樹脂,請問還能用么
離子交換樹脂的包裝上一般都會有保質期的,一般能夠保存兩年左右,不過5年的應該是不內能使用了。而且容應該是沒有很好的保存,所以應該是不能使用的,可以選擇拿去檢測看看。
離子交換樹脂如何保存?
樹脂在未使用的情況下,可直接將原包裝放在適合的溫度下儲存,即使超過保存期限,一般也不會出現物理性能的下降,軟化樹脂和超純水樹脂儲存超過兩年,可能會出現一些微小的變化,建議檢測樹脂的標准特性。
儲存樹脂的最佳溫度在0攝氏度-30攝氏度之間,當儲存溫度超過30攝氏度之後,可能會造成陰樹脂的性能下降,陽樹脂的儲存溫度最高不能超過50攝氏度,防止出現性能下降的問題。
Ⅵ 離子色譜保留時間發生很嚴重的漂移,如何解決這個問題
對以前是沒有什麼影響的,離子色譜是高效液相色譜的一種,故又稱高效離子色譜(HPIC)或現專代離子色譜屬,其有別於傳統離子交換色譜柱色譜的主要是樹脂具有很高的交聯度和較低的交換容量,進樣體積很小,用柱塞泵輸送淋洗液通常對淋出液進行在線自動連續電導檢測。分離的原理是基於離子交換樹脂上可離解的離子與流動相中具有相同電荷的溶質離子之間進行的可逆交換和分析物溶質對交換劑親和力的差別而被分離。適用於親水性陰、陽離子的分離。例如幾個陰離子的分離,樣品溶液進樣之後,首先與分析柱的離子交換位置之間直接進行離子交換(即被保留在柱上),如用NaOH作淋洗液分析樣品中的F-、Cl-和SO42-,保留在柱上的陰離子即被淋洗液中的OH-基置換並從柱上被洗脫。對樹脂親和力弱的分析物離子先於對樹脂親和力強的分析物離子依次被洗脫,這就是離子色譜分離過程,淋出液經過化學抑制器,將來自淋洗液的背景電導抑制到最小,這樣當被分析物離開進入電導池時就有較大的可准確測量的電導信號。
Ⅶ 四大色譜原理是什麼
色譜法分類
按兩相的物理狀態可分為:氣相色譜法(GC)和液相色譜法(LC)。氣相色譜法適用於分離揮發性化合物。GC根據固定相不同又可分為氣固色譜法(GSC)和氣液色譜法(GLC),其中以GLC應用最廣。液相色譜法適用於分離低揮發性或非揮發性、熱穩定性差的物質。LC同樣可分為液固色譜法(LSC)和液液色譜法(LLC)。此外還有超臨界流體色譜法(SFC),它以超臨界流體(界於氣體和液體之間的一種物相)為流動相(常用CO2),因其擴散系數大,能很快達到平衡,故分析時間短,特別適用於手性化合物的拆分。
按原理分為吸附色譜法(AC)、分配色譜法(DC)、離子交換色譜法(IEC)、排阻色譜法(EC,又稱分子篩、凝膠過濾(GFC)、凝膠滲透色譜法(GPC)和親和色譜法,此外還有電泳。按操作形式可分為紙色譜法(PC)、薄層色譜法(TLC)、柱色譜法。四、色譜分離原理
高效液相色譜法按分離機制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法(正相與反相)、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法。
1.液固色譜法
使用固體吸附劑,被分離組分在色譜柱上分離原理是根據固定相對組分吸附力大小不同而分離。分離過程是一個吸附-解吸附的平衡過程。常用的吸附劑為硅膠或氧化鋁,粒度5~10μm。適用於分離分子量200~1000的組分,大多數用於非離子型化合物,離子型化合物易產生拖尾。常用於分離同分異構體。
2.液液色譜法
使用將特定的液態物質塗於擔體表面,或化學鍵合於擔體表面而形成的固定相,分離原理是根據被分離的組分在流動相和固定相中溶解度不同而分離。分離過程是一個分配平衡過程。
塗布式固定相應具有良好的惰性;流動相必須預先用固定相飽和,以減少固定相從擔體表面流失;溫度的變化和不同批號流動相的區別常引起柱子的變化;另外在流動相中存在的固定相也使樣品的分離和收集復雜化。由於塗布式固定相很難避免固定液流失,現在已很少採用。現在多採用的是化學鍵合固定相,如C18、C8、氨基柱、氰基柱和苯基柱。
液液色譜法按固定相和流動相的極性不同可分為正相色譜法(NPC)和反相色譜法(RPC)。
正相色譜法
採用極性固定相(如聚乙二醇、氨基與腈基鍵合相);流動相為相對非極性的疏水性溶劑(烷烴類如正已烷、環已烷),常加入乙醇、異丙醇、四氫呋喃、三氯甲烷等以調節組分的保留時間。常用於分離中等極性和極性較強的化合物(如酚類、胺類、羰基類及氨基酸類等)。
反相色譜法
一般用非極性固定相(如C18、C8);流動相為水或緩沖液,常加入甲醇、乙腈、異丙醇、丙酮、四氫呋喃等與水互溶的有機溶劑以調節保留時間。適用於分離非極性和極性較弱的化合物。RPC在現代液相色譜中應用最為廣泛,據統計,它占整個HPLC應用的80%左右。
隨著柱填料的快速發展,反相色譜法的應用范圍逐漸擴大,現已應用於某些無機樣品或易解離樣品的分析。為控制樣品在分析過程的解離,常用緩沖液控制流動相的pH值。但需要注意的是,C18和C8使用的pH值通常為2.5~7.5(2~8),太高的pH值會使硅膠溶解,太低的pH值會使鍵合的烷基脫落。有報告新商品柱可在pH1.5~10范圍操作。
正相色譜法與反相色譜法比較表
正相色譜法 反相色譜法
固定相極性 高~中 中~低
流動相極性 低~中 中~高
組分洗脫次序 極性小先洗出 極性大先洗出
從上表可看出,當極性為中等時正相色譜法與反相色譜法沒有明顯的界線(如氨基鍵合固定相)。
3.離子交換色譜法
固定相是離子交換樹脂,常用苯乙烯與二乙烯交聯形成的聚合物骨架,在表面未端芳環上接上羧基、磺酸基(稱陽離子交換樹脂)或季氨基(陰離子交換樹脂)。被分離組分在色譜柱上分離原理是樹脂上可電離離子與流動相中具有相同電荷的離子及被測組分的離子進行可逆交換,根據各離子與離子交換基團具有不同的電荷吸引力而分離。
緩沖液常用作離子交換色譜的流動相。被分離組分在離子交換柱中的保留時間除跟組分離子與樹脂上的離子交換基團作用強弱有關外,它還受流動相的pH值和離子強度影響。pH值可改變化合物的解離程度,進而影響其與固定相的作用。流動相的鹽濃度大,則離子強度高,不利於樣品的解離,導致樣品較快流出。
離子交換色譜法主要用於分析有機酸、氨基酸、多肽及核酸。
4.離子對色譜法
又稱偶離子色譜法,是液液色譜法的分支。它是根據被測組分離子與離子對試劑離子形成中性的離子對化合物後,在非極性固定相中溶解度增大,從而使其分離效果改善。主要用於分析離子強度大的酸鹼物質。
分析鹼性物質常用的離子對試劑為烷基磺酸鹽,如戊烷磺酸鈉、辛烷磺酸鈉等。另外高氯酸、三氟乙酸也可與多種鹼性樣品形成很強的離子對。
分析酸性物質常用四丁基季銨鹽,如四丁基溴化銨、四丁基銨磷酸鹽。
離子對色譜法常用ODS柱(即C18),流動相為甲醇-水或乙腈-水,水中加入3~10
mmol/L的離子對試劑,在一定的pH值范圍內進行分離。被測組分保時間與離子對性質、濃度、流動相組成及其pH值、離子強度有關。
5.排阻色譜法
固定相是有一定孔徑的多孔性填料,流動相是可以溶解樣品的溶劑。小分子量的化合物可以進入孔中,滯留時間長;大分子量的化合物不能進入孔中,直接隨流動相流出。它利用分子篩對分子量大小不同的各組分排阻能力的差異而完成分離。常用於分離高分子化合物,如組織提取物、多肽、蛋白質、核酸等。
Ⅷ 離子色譜中各種常見陰離子的色譜出峰時間是多少
一般的規律是,離子的價數越高,保留時間越長;離子半徑越大,保留時間回越長;離答子極化度越大,保留時間越長。所以一般出峰順序是:氟<氯<亞硝酸<溴<硝酸<磷酸<硫酸當然這出峰順序規律也不是一定的,有的柱子會有些變化出峰時間與淋洗液濃度,柱子溫度,柱子特性等都有關系,所以出峰時間不固定,隨條件變化而變
Ⅸ 液相色譜中,保留時間隨進樣量增大而增大,用的是離子交換柱
進樣量大本來就會影響保留時間,比如你要進10ml樣品,那保留時間至少要10ml以後,跟離子交換沒關系
Ⅹ 陰離子色譜柱的使用和保存方法
注銷過低的原因來最可能的是源
一、離子交換柱的配基脫落
二、使用後沒有清洗干凈,細菌生長,導致層析柱被污染
三、層析柱堵塞或者柱床變形
這幾個問題可單獨發生或者合並發生。不同廠家生產的層析柱使用和保持方式都有不同,建議詳細閱讀說明書,認真執行清洗,樣品也盡量干凈。