離子交換緩沖液ph
① 將四種核苷酸吸附於陰離子交換柱上時,應將溶液調到什麼 ph
① 電泳分離4種核苷酸時應取pH3.5 的緩沖液,在該pH時,這4種單核苷酸之間所帶負電荷差異較大,回它們都向正極答移動,但移動的速度不同,依次為:UMP>GMP>AMP>CMP;
② 應取pH8.0,這樣可使核苷酸帶較多負電荷,利於吸附於陰離子交換樹脂柱。雖然pH 11.4時核苷酸帶有更多的負電荷,但pH過高對分離不利。
③ 當不考慮樹脂的非極性吸附時,根據核苷酸負電荷的多少來決定洗脫速度,則洗脫順序為CMP>AMP> GMP > UMP,但實際上核苷酸和聚苯乙烯陰離子交換樹脂之間存在著非極性吸附,嘌呤鹼基的非極性吸附是嘧啶鹼基的3倍。靜電吸附與非極性吸附共同作用的結果使洗脫順序為:CMP> AMP > UMP >GMP。
② 電泳分離四種核苷酸時,通常將緩沖液調到什麼ph
① 電泳分離4種核苷酸時應取pH3.5 的緩沖液,在該pH時,這4種單核苷酸之間所帶版負電荷差異較大,它權們都向正極移動,但移動的速度不同,依次為:UMP>GMP>AMP>CMP;
② 應取pH8.0,這樣可使核苷酸帶較多負電荷,利於吸附於陰離子交換樹脂柱。雖然pH 11.4時核苷酸帶有更多的負電荷,但pH過高對分離不利。
③ 當不考慮樹脂的非極性吸附時,根據核苷酸負電荷的多少來決定洗脫速度,則洗脫順序為CMP>AMP> GMP > UMP,但實際上核苷酸和聚苯乙烯陰離子交換樹脂之間存在著非極性吸附,嘌呤鹼基的非極性吸附是嘧啶鹼基的3倍。靜電吸附與非極性吸附共同作用的結果使洗脫順序為:CMP> AMP > UMP >GMP。
③ 過離子交換柱時,pH梯度洗脫緩沖液一般用什麼緩沖液
如果不限定純化方法,可以考慮親和層析或離子交換,但根據你問題的意思版,是選定離子權交換。
此時就要考慮你蛋白的等電點了,如果等電點在你穩定pH之上,就用陽離子交換柱:
設計陽離子交換層析:將你的樣品置換到你所指的穩定pH的running
buffer。同時裝柱,平衡,然後上樣,平衡,洗脫(因為你的pH不穩定,建議鹽洗脫),收峰。得你的蛋白;
如果你的等電點在穩定pH之下,就用陰離子交換柱,其步驟如上,只是改變柱子類型。
④ PH標准液與PH緩沖液有區別嗎,知道的請詳細說明下,謝謝
有區別的,緩沖液一般是弱酸(鹼),標准液一般是正酸(鹼)!
當往某些溶液中加入回一定答量的酸和鹼時,有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用,這樣的溶液叫做緩沖溶液。弱酸及其鹽的混合溶液(如HAc與NaAc),弱鹼及其鹽的混合溶液(如NH3·H2O與NH4Cl)等都是緩沖溶液。
由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用,是由於溶液中存在足夠量的鹼A-的緣故。當向這種溶液中加入一定量的強酸時,H 離子基本上被A-離子消耗:
所以溶液的pH值幾乎不變;當加入一定量強鹼時,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。
⑤ 用陽離子交換柱子分離蛋白,怎麼調緩沖液ph
不知你將什麼"緩沖液"調節到一定PH濃度?把問題講明了一點…
⑥ 蛋白純化陰離子交換,緩沖液帶什麼電荷
既然是陰離子交換,就要讓目標蛋白帶負電,那麼緩沖液PH就要大於等電點。緩沖體系的選擇也很重要,一般用TRIS-HCl,特別是弱陰離子柱不可選用帶負電強的磷酸鹽緩沖液,否則上樣液中被交換的將是磷酸根而不是目標蛋白。一般用NaCl平衡後上樣進行離子交換,然後再用較強的陰離子洗脫。
⑦ 緩沖溶液用什麼調PH值
在化學中,有一類能夠減緩因外加強酸或強鹼以及稀釋等而引起的pH急劇變化的作用的溶液,此種溶液被稱為pH緩沖溶液。pH緩沖溶液一般都是由濃度較大的弱酸及其共軛鹼所組成,如HAc-Ac-,NH4+-NH3等,此種緩沖溶液具有抗外加強酸強鹼的作用,同時還有抗稀釋的作用。在高濃度的強酸或強鹼溶液中,由於H+或OH-濃度本來就很高,外加少量酸或鹼基本不會對溶液的酸度產生太大的影響。在這種情況下,強酸(pH<2)、強鹼(pH>12)也是緩沖溶液,但此類緩沖溶液不具有抗稀釋的作用。
在分析化學中用到的緩沖溶液,大多數是用於控制溶液的pH,也有一部分是專門用於測量溶液的pH值時的參照標准,被稱為標准緩沖溶液
當往某些溶液中加入一定量的酸和鹼時,有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用,這樣的溶液叫做緩沖溶液。弱酸及其鹽的混合溶液(如HAc與NaAc),弱鹼及其鹽的混合溶液(如NH3·H2O與NH4Cl)等都是緩沖溶液。
由弱酸HA及其鹽NaA所組成的緩沖溶液對酸的緩沖作用,是由於溶液中存在足夠量的鹼A-的緣故。當向這種溶液中加入一定量的強酸時,H 離子基本上被A-離子消耗:
所以溶液的pH值幾乎不變;當加入一定量強鹼時,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-離子而阻礙pH的變化。
http://www.hudong.com/wiki/%E7%BC%93%E5%86%B2%E6%B6%B2
⑧ 誰能幫我解釋一下,為什麼分離酸性蛋白質要選擇pH較大的緩沖液,而分離鹼性蛋白質選擇pH較小的緩沖液
若使用緩沖液的pH值高於蛋白質的等電點時,蛋白質在該緩沖液中攜帶凈負電荷,可以使用陰離子交換劑進行分離。反之,用陽離子交換劑進行分離。陰離子交換劑應選用陽離子緩沖液,如Tris、乙二胺、烷基胺等。