離子交換纖維介紹
⑴ 離子交換纖維素有何特點.為什麼人們常用它來分離純化酶
離子交換纖維素有何特點.為什麼人們常用它來分離純化酶
⑴具有開放性支持骨回架,大分子可以自由答進入和迅速擴散,故吸附容量大.⑵具有親水性,對大分子的吸附不大牢固,用溫和條件使可以洗脫,不致引起蛋白質變性或酶的失活.⑶多孔性,表面積大、交換容量大,回收率高,可用於分離和制備.
⑵ 純化多糖時,纖維素和纖維素陰離子交換柱的區別
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⑶ DEAE纖維素陰離子交換柱,看到很多地方講到流穿模式,什麼叫做流穿模式呢
流穿模式指的是樣品沒掛柱,都留下來了。
⑷ 弱酸性和弱鹼性的纖維素離子交換劑分別適宜在哪些ph范圍內應用,為什麼
弱酸的適用pH值為0~14
弱鹼的適用pH值為0~9,因為高pH值下,弱鹼基團多以非離子形態存在,不顯鹼性
⑸ 7.下列關於用離子交換纖維素色譜法分離蛋白質原理的敘述哪一個是正確的
答案D
分配層析利用樣品各組分在固定相和流動相間溶解度的不同專(分配系數不同)來進行分離;吸附屬層析法利用吸附劑表面對樣品組分吸附能力強弱不同來進行分離;親和層析由於配體與待分離物質進行特異性結合;DEAE-纖維素離子交換層析法利用樣品組分對離子交換劑靜電力的差異來進行分離。
⑹ 離子交換纖維交換容量大概是多少mg/l
單位mmol/g ,離子交換纖維分為強酸、強鹼、弱酸、弱鹼,每個品種交換容量各有不同。強酸、強鹼纖維交換容量3-4mmol/g,弱酸弱鹼交換容量6-9mmol/g.
⑺ 強鹼性陰離子交換纖維能吸附硝酸鹽嗎
首先聲明我對纖維交換材料不太了解,但是從官能團上分析,理論上強回鹼性陰離子交換纖維答肯定可以吸附交換硝酸鹽,但是能否解析或用什麼辦法解析就不得知了。
一般陰離子交換樹脂都能有效吸附交換硝酸鹽,亞硝酸鹽,但是由於普通陰樹脂同時也交換SO42-和Cl-等其餘陰離子,不能達到有效的選擇性吸附,所以一般在選擇離子交換樹脂使用工況中,我們建議採用D890強鹼陰樹脂,該產品能選擇性吸附硝酸鹽和亞硝酸鹽,而且用NaCl就能有效解析重復再生使用。
⑻ deae-陰離子纖維素的使用方法
DEAE-纖維素的處理及裝柱
(1)處理
本實驗採用的是DEAE-纖維素DE 52 是弱酸型陰離子交換劑,具體處理方法為:先將DE52陰離子交換劑乾粉浸泡於蒸餾水中,去除雜質;再在0.5N的HCL溶液中浸泡1-2h,再用無離子水或蒸餾水洗至pH值中性或PH4以上,並將其在抽濾漏斗中抽干;將抽乾的離子交換劑浸泡在0.5N的NaOH溶液中1-2h,再用無離子水或蒸餾水將其洗至中性。
(2)裝柱
將層析柱清洗干凈垂直固定到層析架上,加1/3體積的無離子水,打開下出液口,水流暢通,即刻將小燒杯中裝有適宜濃度的柱材,輕輕倒入層析柱中,凝膠自然慢慢沉降再層析柱底部,凝膠沉積直到離層析柱上端1.5-2cm處,停止裝柱。層析柱上端進液口連接恆流泵,下出口連接蛋白質監測儀,待層析柱的平衡。
(3)平衡
在柱層析上樣前必須對層析柱進行平衡,所謂平衡就是將層析柱中的溶液用層析過程的緩沖液(洗脫液)置換出來,使層析柱中的緩沖系統與柱層析過程中的系統一致。其方法是:利用層析柱上端的恆流泵將平衡緩沖液泵入到層析柱內,打開層析柱下端的出口,平衡液流速在0.5-1ml/min,當下出口流出液的PH值與平衡緩沖液的PH值一致時,層析柱達到了平衡。在本實驗中,用0.002M Tris-HCL緩沖液PH7.4(內含0.0001M EDTA),預先將DE-52柱進行平衡。
⑼ 離子交換層析中流出物質順序是什麼
若用離子交換層析分離物質,以蛋白質為例,離子交換層析中,基質是由帶有電荷的樹脂或纖維素組成。帶有正電荷的稱之陰離子交換樹脂;而帶有負電荷的稱之陽離子樹脂。離子交換層析同樣可以用於蛋白質的分離純化。
由於蛋白質也有等電點,當蛋白質處於不同的pH條件下,其帶電狀況也不同。陰離子交換基質結合帶有負電荷的蛋白質,所以這類蛋白質被留在柱子上,然後通過提高洗脫液中的鹽濃度等措施,將吸附在柱子上的蛋白質洗脫下來。結合較弱的蛋白質首先被洗脫下來。
反之陽離子交換基質結合帶有正電荷的蛋白質,結合的蛋白可以通過逐步增加洗脫液中的鹽濃度或是提高洗脫液的pH值洗脫下來。
(9)離子交換纖維介紹擴展閱讀:
對於離子交換纖維素要用流水洗去少量碎的不易沉澱的顆粒,以保證有較好的均勻度,對於已溶脹好的產品則不必經這一步驟。
溶脹的交換劑使用前要用稀酸或稀鹼處理,使之成為帶H+或OH-的交換劑型。陰離子交換劑常用「鹼-酸-鹼」處理,使最終轉為-OH-型或鹽型交換劑;對於陽離子交換劑則用「酸-鹼-酸」處理,使最終轉為-H-型交換劑。
梯度不要上升太快,要恰好使移動的區帶在快到柱末端時達到解吸狀態。目的物的過早解吸,會引起區帶擴散;而目的物的過晚解吸會使峰形過寬。
⑽ 簡述離子交換纖維素的特點有哪些
簡述離子交換纖維素的特點有哪些
具有開放性支持骨架,大分子可以自由進入內和迅速擴散容,故吸附容量大.⑵具有親水性,對大分子的吸附不大牢固,用溫和條件使可以洗脫,不致引起蛋白質變性或酶的失活.⑶多孔性,表面積大、交換容量大,回收率高,可用於分離和制備.