離子交換色譜正相還是反相
⑴ 反相色譜與正相色譜的差異
在液-固吸附色譜,，液-液分配色譜這兩種液相色譜中才涉及到正相色譜及反相色譜。液-固吸附色譜（固定相是固體吸附劑，它是根據物質在固定相是吸附作用差異來分離的。吸附作用越強，K值越大，保留時間越長）液-液分配色譜（是將固定液塗在擔體上作為固定相的，它的分離原理與液液萃取的原理相同，從而服從分配定律。在固定液中溶解度大，K值大，保留時間長）。
正相色譜是指流動相的極性小於固定相的極性；反正色譜是指流動相的極性大於固定相的極性。
對於反相色譜，極性越小的物質，流動相的極性越大，保留時間越長。極性越小的物質，流動相的極性越小，保留時間越短。對於極性大的物質來說，流動相的極性對其保留時間影響較小。而正相色譜正好相反。
因此在應用上正相色譜用於分離極性較大的物質，如蛋白質、生物鹼等。反相色譜多用於分離極性較小的物質，在流動相的選擇上，反相色譜的優勢更大，在實際工作中反相色譜的應用更為廣泛
⑵ 何謂正相色譜和反相色譜在應用上有什麼特點
1、正相色譜基本上可以被看做是液固吸附色譜，其柱填料是吸附劑，其表面上分布有活性吸附位點，溶劑和溶質分子均能被吸附於活性位點上。由於相互作用力有大有小，溶劑分子與溶質分子、溶質分子相互之間又存在競爭吸附，從而造成了在柱內保留時間的差異，使不同物質得到分離。
應用特點：正相色譜一般用來分離中性化合物和離子(或可電離的)化合物，而且以中性樣品為主。適於分離樣品如下：
①對於反相色譜法很難分離的異構體，可以採用以硅膠為固定相的正相色譜分離分析；
②根據被分離樣品極性差別進行族類分離；
③易於水解樣品的分離分析；
④分離分析高脂溶性樣品，其在極性有機溶劑中溶解度很小；
⑤正相色譜也可以用於異構體分離(包括幾何異構體和光學異構體)。
2、流動相極性大於固定相極性的情況，稱為反相色譜。非極性鍵合相色譜可作反相色譜。在現代液相色譜中應用最廣泛，現代液相色譜分析工作的70%以上是在非極性鍵合固定相上進行的。反相介質性能穩定。分離效率高，可分離蛋白質、肽、氨基酸、核酸等含有非極性基團的各種物質。
應用特點：反相介質性能穩定。分離效率高，可分離蛋白質、肽、氨基酸、核酸、甾類、脂類、脂肪酸、糖類、植物鹼等含有非極性基團的各種物質。
(2)離子交換色譜正相還是反相擴展閱讀
原理：
反相色譜(RPC)是指利用非極性的反相介質為固定相，極性有機溶劑的水溶液為流動相，根據溶質極性(疏水性)的差別進行溶質分離與純化的洗脫色譜法。
與HIC一樣，RPC中溶質也通過疏水性相互作用分配於固定相表面，但是，RPC固定相表面完全被非極性基團所覆蓋，表現出強烈的疏水性。因此，必須用極性有機溶劑(如甲醇、乙腈等)或其水溶液進行溶質的洗脫分離。
溶質在反相介質上的分配系數取決於溶質的疏水性，一般疏水性越大，分配系數越大。當固定相一定時，可以通過調節流動相的組成調整溶質的分配系數。
RPC主要應用於相對分子質量低於5000，特別是1000以下的非極性小分子物質的分析和純化，也可以用於蛋白質等生物大分子的分析和純化。
由於反相介質表面為強烈疏水性，並且流動相為低極性的有機溶劑，生物活性大分子在RPC分離過程中容易變性失活，所以，以回收生物活性蛋白質為目的時，應注意選用適宜的反相介質。
⑶ 什麼是正相色譜和反相色譜
反相與正相的區別在於，固定相與流動相的極性大小。
反相：固定相的極性小於流動相的極性
正相：固定相的極性大於流動相的極性
⑷ 反相與正相色譜法有什麼區別
反相還是正相，是根據流動相相對於固定相的極性而言的。 流動相極性強於固定相的，稱作反相色譜；流動相極性弱於固定相的，稱作正相色譜。
反相色譜流動相的極性強，容易帶著極性分子走，而留下非極性分子。這主要用於非極性樣品的分離。常用的高壓液相色譜都是這種，也有人喜歡說反相液相色譜，其實是一個意思，就是顯得博學一點。
正相色譜固定相極性強，容易把極性分子留下，故主要用於極性樣品的分離。如離子色譜。
實際應用好像沒有太注意正相還是反相，倒是都很注意柱子能承受什麼樣極性的物質。反相液相色譜柱不可以用強極性的純水，都是要加入至少5%的有機溶劑來弱化水的極性。 正相的離子色譜柱則堅決不可以進入有機物質。但是氣相色譜實際也是一種正相色譜，卻往往要求不可以有水進入。
⑸ 何為正相色譜及反相色譜在應用上有何特點
正相色譜基本上可以看作液固吸附色譜。其柱填料為吸附劑，表面有活性吸附點。溶劑和溶質分子可以吸附在活性中心。反相色譜是流動相極性大於固定相極性的色譜。
反相色譜的應用特點：反相介質性能穩定。分離效率高，它能分離蛋白質、肽、氨基酸、核酸、甾體、脂類、脂肪酸、碳水化合物、生物鹼等含有非極性基團的物質。
正相色譜法的應用特點：全多孔型的微球型或無定型硅膠，然而，球形硅膠更適合於有效分離。用球形硅膠填充的正相柱具有較好的滲透性、較低的操作壓力和較好的穩定性。
(5)離子交換色譜正相還是反相擴展閱讀：
反相色譜中最常用的有機溶劑有甲醇和乙腈。此外，乙醇、四氫呋喃、異丙醇和二氧六環等常用作改性劑。有機溶劑的梯度也會影響解析度。梯度越小，解析度越大。
正相色譜的保留機理類似於吸附過程。極性樣品分子和溶劑分子吸附在柱填料表面的極性基團（吸附劑）上。對於常用於正相的氰基、氨基或二醇基固定相柱，吸附中心通常為鍵合配體或硅烷。在使用硅膠時，吸附位點為硅烷醇(一SiOH)。
⑹ 請問 高效液相色譜的正相與反相怎麼區分
高效液相色譜的正相與反相區分方式如下：
正相色譜：固定相極性大於流動相極性；反相色譜：固定相極性小於流動相極性。
高效液相色譜法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又稱「高壓液相色譜」、「高速液相色譜」、「高分離度液相色譜」、「近代柱色譜」等。高效液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，採用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離後，進入檢測器進行檢測，從而實現對試樣的分析。該方法已成為化學、醫學、工業、農學、商檢和法檢等學科領域中重要的分離分析技術。
⑺ 正相鍵合相色譜與反相鍵合相色譜的區別
正相鍵合色譜法
在正相色譜中，一般採用極性鍵合固定相，硅膠表面鍵合的是極性的有機基團，鍵合相的名稱由鍵合上去的基團而定。最常用的有氰基（-CN）、氨基（-NH2）、二醇基（DIOL）鍵合相。流動相一般用比鍵合相極性小的非極性或弱極性有機溶劑，如烴類溶劑，或其中加入一定量的極性溶劑（如氯仿、醇、乙腈等），以調節流動相的洗脫強度。通常用於分離極性化合物。一般認為正相色譜的分離機制屬於分配色譜。組分的分配比K值，隨其極性的增加而增大，但隨流動相中極性調節劑的極性增大（或濃度增大）而降低。同時，極性鍵合相的極性越大，組分的保留值越大。
該法主要用於分離異構體，極性不同的化合物，特別是用來分離不同類型的化合物。
反相鍵合相色譜法
在反相色譜中，一般採用非極性鍵合固定相，如硅膠-C18H37（簡稱ODS或C18）硅膠-苯基等，用強極性的溶劑為流動相，如甲醇/水，乙腈/水，水和無機鹽的緩沖液等。
目前，對於反相色譜的保留機制還沒有一致的看法，大致有兩種觀點：一種認為屬於分配色譜，另一種認為屬於吸附色譜。
分配色譜的作用機制是假設混合溶劑（水+有機溶劑）中極性弱的有機溶劑吸附於非極性烷基配合基表面，組分分子在流動相中與被非極性烷基配合基所吸附的液相中進行分配。吸附色譜的作用機制是把非極性的烷基鍵合相，看作是在硅膠表面上覆蓋了一層鍵合的十八烷基的「分子毛」，這種「分子毛」有強的疏水特性。當用水與有機溶劑所組成的極性溶劑為流動相來分離有機化合物時，一方面，非極性組分分子或組分分子的非極性部分，由於疏溶劑的作用，將會從水中被「擠」出來，與固定相上的疏水烷基之間產生締合作用。另一方面，被分離物的極性部分受到極性流動相的作用，使它離開固定相，減少保留值，此即解締過程。顯然，這兩種作用力之差，決定了分子在色譜中的保留行為。.
一般地，固定相的烷基配合基或分離分子中非極性部分的表面積越大，或者流動相表面張力及介電常數越大，則締合作用越強，分配比也越大，保留值越大。在反相鍵合相色譜中，極性大的組分先流出，極性小的組分後流出。
⑻ 反相與正相色譜法有何區別
反相還是正相，是根據流動相相對於固定相的極性而言的。 流動相極性強於固定相的，稱作反相色譜；流動相極性弱於固定相的，稱作正相色譜。
反相色譜流動相的極性強，容易帶著極性分子走，而留下非極性分子。這主要用於非極性樣品的分離。常用的高壓液相色譜都是這種，也有人喜歡說反相液相色譜，其實是一個意思，就是顯得博學一點。
正相色譜固定相極性強，容易把極性分子留下，故主要用於極性樣品的分離。如離子色譜。
實際應用好像沒有太注意正相還是反相，倒是都很注意柱子能承受什麼樣極性的物質。反相液相色譜柱不可以用強極性的純水，都是要加入至少5%的有機溶劑來弱化水的極性。 正相的離子色譜柱則堅決不可以進入有機物質。但是氣相色譜實際也是一種正相色譜，卻往往要求不可以有水進入。
⑼ 制備型高效液相色譜有哪幾種模式，比如說正相反相，離子交換什麼的
高效液相色譜儀分為分析型和制備型兩種，按流量大小分類。
您說的10A，15A，是回指的日本島津答SHIMADZU品牌的LC10ATvp型和LC-15A型，前者已經停產，15A是10A的升級換代產品。
常用的實驗室液相色譜儀HPLC
進口品牌有日本島津SHIMADZU，美國沃特斯WATERS，美國戴安，美國安捷倫Agilent，美國熱電，美國珀金埃爾默PE，德國諾爾等
國產品牌有北京普元精儀、北京普析、北京東西電子、北京創新通恆、北京瑞利、上海天美、上海通微、浙江福立、江蘇天瑞等
⑽ 正相鍵合色譜和反相鍵合色譜區別
正相鍵合相色譜法
1. 氰基與氨基化學鍵合相
是正相鍵合色譜法較常用的固定相。流動相與以硅膠為固定相的吸附色譜法的流動相相似，也是烷烴（常用正已烷等）加適量極性調整劑而構成。氰基鍵合相的分離選擇性與硅膠相似，但極性小於硅膠，即用相同的流動相及其它條件相同時，同一組分的保留時間將小於硅膠。許多需用硅膠柱分離的課題，可用氰基鍵合相柱完成。氨基鍵合相與硅膠的性質有較大差異，前者為鹼性；後者為酸性。在作正相洗脫時，表現出不同的選擇性。氨基鍵合相色譜柱是分析糖類最重要的色譜柱，也稱為碳水化合物柱。
2. 分離機制
主要靠范德華作用力的定向作用力、誘導作用力或氫鍵作用力。例如，用氨基鍵合相分離極性化合物時，主要靠被分離組分的分子與鍵合相的氫鍵作用力的強弱差別而分離，如對糖類的分離等。若分離含有芳環等可誘導極化的非極性樣品，則鍵合相與組分分子間的作用力，主要是誘導作用力。
3. 流動性的極性與容量因子的關系
在作正相洗脫時，流動相的極性增大，洗脫能力增加，K減小，t減小；反之k與t增大。分離結構相近的組分時，極性大的組分後出柱。
反相鍵合相色譜法
典型的反相鍵合色譜法是用非極性固定相和極性流動相組成的色譜體系。固定相，常用十八烷基（ODS或C）鍵合相；流動相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相色譜系統，用弱極性或中等極性的鍵合相和極性大於固定相的流動相組成。
(1) 分離機制 反相鍵合相表面具有非極性烷基官能團，及未被取代的硅醇基。硅醇基具有吸附性能，剩餘硅醇基的多寡，視覆蓋率而定。簡要介紹疏溶劑理論。
疏溶劑理論：當一個非極性溶質或溶質分子中的非極性部分與極性溶劑相接觸時，相互產生斥力，自由能（G）增加，熵減小，不穩定性增加。根據熱力學第二定律，系統由不穩定到穩定是自發的，即熵增加是自發的。因此，為了彌補熵的損失，溶質分子中非極性部分結構的取向，將導致在極性溶劑中形成一個「容腔」，這種效應稱為疏溶劑或疏水效應。該理論認為，在鍵合相反相色譜法中溶質的保留主要不是由於溶質分子與鍵合相間的色散力，而是溶質分子與極性溶劑分子間的排斥力，促使溶質分子與鍵合相的烴基發生疏水締合，且締合反應是可逆的。容量因子k與自由能變化△G的關系如下式：
lnk＝lnV/V－△G/RT (8·5)
上式中的R為理想氣體常數、T為熱力學溫度、V是色譜柱中鍵合相表面所鍵合的官能團的體積，V是色譜柱中流動相的體積。該式說明△G越大，被分離組分的k越小，保留時間越短。
(2)★★流動相的極性與容量因子的關系 流動相的極性增大，洗脫能力降低，溶質的k增大，t增大；反之,k與t減小。分離結構相近的組分時，極性大的組分先出柱。
(3) 特點 反相色譜法是應用最廣的色譜法，主要用於分離非極性至中等極性的各類分子型化合物，因為鍵合相表面的官能團不流失，溶劑的極性可以在很大范圍內調整，因此應用范圍很寬。由它派生的反相離子對色譜法與離子抑制色譜法，可以分離有機酸、鹼、鹽等離子型化合物。用反相液相色譜法，可以解決80%左右的液相色譜課題。因此，必須給予反相色譜法足夠的重視。對於結構異構體等難分離物質的分離，則應選用吸附色譜法。
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