超濾法測回收率的具體操作
A. HPLC中的加樣回收率試驗怎麼做呢有幾種方法
回收率包括絕對回收率和相對回收率。絕對回收率考察的是經過樣品處理後能用於分析的葯物的比例。因為不論是生物基質還是制劑輔料中的葯物,經過樣品處理都有一定的損失。做為一個分析方法,絕對回收率一般要求大於50%才行。它是在空白基質中定量加入葯物,經處理後與標准品的比值。標准品為流動相直接稀釋而來,而不是同樣品一樣處理。若一樣,只是不加基質來處理,可能會有很多影響因素被此屏蔽掉。如全部轉移有機相時只轉移了98%等。也就因此失去了絕對回收率的考察初衷。 相對回收率嚴格來說有兩種。一種是回收試驗法,一種是加樣回收試驗法。前者是在空白基質中加入葯品,標准曲線也是同此,這種測定用得較多,但有標准曲線重復測定的嫌疑。第二種是在已知濃度樣品中加入葯物,來和標准曲線比,標准曲線也是在基質中加葯物。相對回收率主要考察准確度。 准確度系指用該方法測定的結果與真實值或認可的參考值之間接近的程度。有時也稱真實度。 一定的准確度為定量測定的必要條件,因此涉及到定量測定的檢測項目均需要驗證准確度,如含量測定、雜質定量試驗等。 准確度應在規定的范圍內建立,對於制劑一般以回收率試驗來進行驗證。試驗設計需考慮在規定范圍內,制備3個不同濃度的試樣,各測定3次,即測定9次,報告已知加入量的回收率(%)或測定結果平均值與真實值之差及其可信限。 1.含量測定 原料葯可用已知純度的對照品或符合要求的原料葯進行測定,或用本法所得結果與已建立准確度的另一方法測定的結果進行比較。 制劑可用含已知量被測物的各組分混合物進行測定。如不能得到制劑的全部組分,可向制劑中加入已知量的被測物進行測定,必要時,與另一個已建立准確度的方法比較結果。一般制劑的含量測定的回收率是向輔料中加入處方量80%、100%、120%已知含量的主葯,按含量測定的方法測定。溶出度測定方法的回收率按處方量50%、80%、100%加入主葯進行測定。 2.雜質定量試驗 雜質的定量試驗可向原料葯或制劑中加入已知量雜質進行測定。如果不能得到雜質,可用本法測定結果與另一成熟的方法進行比較,如葯典方法或經過驗證的方法。 如不能測得雜質的相對響應因子,可在線測定雜質的相關數據,如採用二極體陣列檢測器測定紫外光譜,當雜質的光譜與主成分的光譜相似,則可採用原料葯的響應因子近似計算雜質含量(自身對照法)。並應明確單個雜質和雜質總量相當於主成分的重量比(%)或面積比(%)。
B. 回收率的測定
回收率一般用的加標回收率:
根據你的曲線測定樣品的濃度=A
在樣品中加入一定量的標准物質(濃度=C)測定吸光度,計算濃度=B
回收率=(B-A)/C*100%
C. 回收率實驗怎麼做重復性試驗,精密度實驗
主要研究方法(實驗設計)及主要技術路線:
研究方法
鹽酸苯海拉明片殘渣的定性:顯色反應鑒別。
鹽酸苯海拉明片溶出度檢驗:溶出度儀器檢測。
鹽酸苯海拉明片的含量測定:紫外分光光度法。
統計分析:正態性檢驗和顯著性分析。
主要研究方法(實驗設計)及主要技術路線:
研究方法
鹽酸苯海拉明片殘渣的定性:顯色反應鑒別。
鹽酸苯海拉明片溶出度檢驗:溶出度儀器檢測。
鹽酸苯海拉明片的含量測定:紫外分光光度法。
統計分析:正態性檢驗和顯著性分析。
主要技術路線
定性鑒別:取本品(約相當於鹽酸苯海拉明0.1g),除去糖衣,研細,用氯仿10ml振搖提取,濾過;濾液置水浴上蒸干,殘渣在80℃乾燥後做一下定性檢測。
①取殘渣約5mg,加硫酸1滴,初顯黃色,隨即變成橙紅色;滴加水,即成
白色乳濁液(呈陽性反應)。
②取殘渣約30mg,加水1ml溶解後,加鹽酸1ml,即發生白色乳濁;加熱煮沸數分鍾,析出油狀液體,放冷,凝固成白色蠟狀固體(呈陽性反應)。
③取殘渣30mg,加水5ml使溶解,滴加硝酸銀試液,即生成白色凝乳狀沉澱(呈陽性反應)。
溶出度檢測: 取本品,照溶出度測定法(詳細點),以水500ml為溶劑,
轉速為每分鍾100轉,依法操作,經45分鍾後,取溶液5ml濾過,取續濾液作為供試品溶液,照含量測定項下的方法測定,計算每片的溶出量(μg•mL-1)。
鹽酸苯海拉明含量測定
對照品溶液的制備 精密稱取鹽酸苯海拉明對照品12.5 mg,置25ml量瓶中,加水使溶解並稀釋至刻度,搖勻,精密量取10 ml,置100 ml量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,即得。
樣品溶液的制備 取本品10片,除去糖衣後精密稱定,研細,精密稱取適量(約相當於鹽酸苯海拉明50mg),置100ml量瓶中,加水使鹽酸苯海拉明溶解並稀釋至刻度,搖勻,濾過,精密量取續濾液10ml,置另一100ml量瓶中,加水稀釋至刻度,搖勻,即得。
數據分析:根據實驗數據,採用統計分析軟體,給出統計分析數據。
結果:
1、 根據葯典,定性實驗,鑒別效果應該良好。供試品溶液,顯雜質斑點,
其顏色與對照溶液主斑點比較,深淺度差異不應太大。
2、 抽查的鹽酸苯海拉明片劑中鹽酸苯海拉明(C17H21NO•HCI)含量估計為標
示量的93.0%-107.0%左右。
D. 你好,考馬斯亮藍法測定蛋白的方法學驗證,在做准確度驗證時,關於回收率應該怎麼驗證求教下具體方法。
首先,考馬斯亮藍法測定蛋白質含量時,准確度是由一定范圍的,濃度超出范圍肯定不準。另外,你在8ug/ml時的收率74%是否稀釋測定?最後,高濃度和低濃度回收效率也是有一定范圍的,低了高了都不好,最佳回收效率也是在適當濃度下,如果你有興趣可以做一下梯度實驗來證實我的判定
回收率可以通過不同蛋白濃度下檢測回收率,比如你做的1.25ug/ml時回收率有95%左右,8ug/ml時為74%,由此你可以在1.25ug/ml左右濃度設計,比方0.1-8ug/ml都可以,安排幾個濃度梯度,主要分析0.1-1.25ug/ml和1.25-8ug/ml這兩個范圍回收率是什麼樣的變化情況。之後,確定在哪個濃度下回收率最佳,重復幾次後統計學分析,最後通過圖表反應,加上誤差棒,這就是一個可以寫進論文的完整的實驗內容了。
E. 紫外可見分光光度法測維生素b12含量 的回收率實驗 要具體步驟~~
回收率試驗需要向空白輔料中加入定量的維生素B12原料葯,對比測定值與實際加入量計算回收率。具體操作為:向空白輔料加入小於、等於和大於片劑標示量的維生素B12原料葯各三組,共9個樣品。混勻後以含量測定法測定每組中B12的量,其對照品要使用加入的B12原料葯。若不以加入的原料葯為對照品,那就必須使用已知含量的B12原料葯進行加入,總之你需要知道到底向輔料中加入了多少量。求三組的標定量與加入量的比值,就是回收率。
F. 怎麼測礦石回收率
正規的話,要用到磁選管,根據礦石性質和設計流程,選定好場強,將礦石樣品磨細後,從磁選管上方緩緩倒入,管尾排出尾礦,保持磁選管中的液面,樣品在管中不斷清洗,直到管尾排出不含礦物的清水,管中留存的就是磁性物,烘乾,稱重。回收率=磁選管所得磁性物重量*其品位/樣品重量*樣品品位*100%。這里得出的是礦石的磁選回收率,可以考查磁性礦的優劣。
如果沒有該實驗設備,還有一種手工方法:將樣品磨細,稱重,倒入盆中,加水,強磁塊外麵包層東西,伸入水中,吸附上磁性礦物,將吸附的磁性礦物倒入另一個水盆里,如此反復,直到最後幾乎吸附的不上一點東西就可以了,兩個盆里的物料都要留著,一個算精礦,一個算尾礦。然後對精礦再進行如上操作,直到最後尾礦比較清澈,就算完工了。將幾盆尾礦混合,因為手工操作,會有損失,烘乾後稱稱尾礦重量,看誤差大不,如果不大就將最後的磁性物分析鐵含量,再採用上述公式計算。
G. 怎樣測回收率
回收率指選礦產品(一般為精礦)中某一有用成分的質量與入選原礦中同一有用成分質量的百分比: ε=γ×β / α×100% 式中:ε為產品中某一成分的回收率(%);α為原礦中此種成分的品位(%);β為產品中此種成分的品位(%);γ為產品的產率(%)。
在選礦過程中測量產率(實際較困難),常用理論回收率代替實際回收率。理論回收率:ε理= β(α-θ) / α(β-θ)×100% 式中:α、β同上式;θ為尾礦中此種成分的品位(%);前者考慮了選礦過程中有用成分的損失;後者未考慮損失,故實際回收率低於理論回收率。
H. 分析實驗中的加標回收率怎麼做請舉幾個例子詳細說明其步驟並給出具體的公式
我做的是農葯殘留分析 用的是液質做檢測 步驟大概是這樣子的:
用原葯配製濃度為0.1ppm的標准溶液
取樣,添加10ppm的葯劑0.1ml,按你找到的前處理方法進行操作。樣品做三次重復。
按照2中的方法做一個對照,對照就是不加葯劑,但是其他操作和樣品都一樣。
因為質譜可能存在基質效應,所以可以酌情做個空白加標,做不做你問你導師。
上機檢測,最後的回收率=(標准品的濃度×樣品的峰面積)÷(樣品的濃度×標准品的峰面積)
樣品的濃度根據你添加葯劑之後的各種操作步驟進行計算,因為操作中可能有提取再稀釋,所以這個濃度是指你最後拿去上機時候的濃度,不是你一開始添加進去的葯劑濃度。
I. 高效液相色譜回收率怎麼做
相同的樣品取兩份,其中一份加入定量的待測成分標准物質;兩份同時按相同的分析步驟分析,加標的一份所得的結果減去未加標一份所得的結果,其差值同加入標准物質的理論值之比即為樣品加標回收率。
加標回收率的測定, 是實驗室內經常用以自控的一種質量控制技術.對於它的計算方法, 給定了一個理論公式:
加標回收率= (加標A測定值-A測定值)÷加標量×100%.
以液體為流動相,採用高壓輸液系統,將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱,在柱內各成分被分離後,進入檢測器進行檢測,從而實現對試樣的分析。
(9)超濾法測回收率的具體操作擴展閱讀:
流動相與固定相之間應互不相溶(極性不同,避免固定液流失),有一個明顯的分界面。當試樣進入色譜柱,溶質在兩相間進行分配。達到平衡時,服從於高效液相色譜計算公式:
式中,cs—溶質在固定相中濃度;cm—溶質在流動相中的濃度; Vs—固定相的體積;Vm—流動相的體積。LLPC與GPC有相似之處,即分離的順序取決於K,K大的組分保留值大;但也有不同之處,GPC中,流動相對K影響不大,LLPC流動相對K影響較大。
離子對色譜法(特別是反相)解決了以往難以分離的混合物的分離問題,諸如酸、鹼和離子、非離子混合物,特別是一些生化試樣如核酸、核苷、生物鹼以及葯物等分離。
J. HPLC操作中方法檢測限、回收率、精密度、重復性和再現性的操作步驟各是怎樣的
這個很多的哇,自己去查閱相關的資料就知道啦,資料上會說的很詳細的啊