多肽離子交換
Ⅰ 多肽是如何純化的
「對多肽純化常用的方法包括:鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點沉澱法、離子交換層析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對特定的物質進行分離純化,同時上述這些方法也是多肽類物質分析中常用的手段。」
Ⅱ 離子交換的原理是什麼,簡述其在食品工業中的利用
離子交換,可以把水中呈離子態的陽、陰離子去除,以氯化鈉(NaCl)代表水中無機鹽類專,水質除鹽的基本反屬應可以用下列方程式表達:
1、陽離子交換樹脂:R—H+Na+ R—Na+H+
2、陰離子交換樹脂:R—OH+Cl- R—Cl+OH-
陽、陰離子交換樹脂總的反應式即可寫成:
RH+ROH+NaCl——RNa+RCL+H2O
可看出,水中的NaCl已分別被樹脂上的H+和OH-所取代,而反應生成物只有H2O,故達到了去除水中鹽的作用.
食品工業的運用主要包含製糖脫色,掩苦劑,水體除氨氮,硝酸鹽,飲用水除鐵,玉米糖漿催化,酶,多肽,和蛋白質分離,有機酸純化,飲料除砷等等。
Ⅲ 如何選擇離子交換層析的離子交換劑和緩沖液
離子交換層析是根據蛋白質所帶電荷的差異進行分離純化的一種方法。
蛋白質的帶電性是由蛋白質多肽中帶電氨基酸決定的。
由於蛋白質中氨基酸的電性又取決於介質中的pH,所以蛋白質的帶電性也就依賴於介質的pH。
Ⅳ 請教關於離子交換樹脂的使用
一、離子交換抄樹脂襲的預處理:
離子交換樹脂在使用之前,為了防止樹脂內含有雜質,對水質造成污染,需要對樹脂進行預處理,以下是預處理的步驟:
1.首先使用熱水對樹脂進行清洗,陽樹脂可以使用70-80℃的熱水清洗,陰樹脂的耐熱性較差,一般使用50-60℃的熱水,每隔15分鍾左右需要更換熱水,4-5次之後可以每隔30分鍾左右更換熱水,總共需要7-8次左右,直至出水清澈為止。
2.使用濃度為5%的氯化氫浸泡樹脂,大概浸泡4-8小時左右,然後將水排放,對樹脂進行清洗,直至出水為中性為止。
3.再使用濃度為2-4%的氫氧化鈉浸泡樹脂,浸泡時間與上一步相同,然後將水排放,對樹脂進行清洗,直至出水為中性為止。如此重復2~3次,每次用量為樹脂體積的2倍。
4.陽樹脂最後一次浸泡需要使用濃度為5%的氯化氫,用量加倍效果更好。放盡酸液,用清水淋洗至中性即可。
5.陰樹脂最後一次浸泡需要使用4~5%的NaOH溶液,用量加倍效果更好。放盡鹼液,用清水淋洗至中性即可。
Ⅳ 多肽純化的方法有哪些
對多肽純化常用的方法包括:鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點專沉澱法、離子交換層屬析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對特定的物質進行分離純化,同時上述這些方法也是多肽類物質分析中常用的手段。
Ⅵ 離子交換層析的原理是什麼 已解決
離子交換層析法是從復雜的混合物中,分離性質相似大分子的方法之一,依據版的原理是物質的酸鹼性,極權性,所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質,對管柱上的離子交換劑有不同的親和力,改變沖洗液的離子強度和pH值,物質就能依次從層析柱中分離出來。
層析開始前,功能基團與反離子穩定結合,就與反離子發生可逆交換,與層析劑結合被固定下來。因為鹽離子可以與底物競爭功能基團,鹽濃度越高樣品與層析劑結合越不緊密,易被洗脫下來。不同物質與層析劑結合程度不同,洗脫下來的時間不同,因此得以分開。
(6)多肽離子交換擴展閱讀
離子交換劑的選擇首重保持欲分離物質的生物活性,以及在不同pH值環境中,此物質所帶的電荷和電性強弱,陰陽離子交換劑的選擇若被分離物質帶正電荷,這些鹼性蛋白質,它們在酸性溶液中較穩定,親和力強,故採用陽離子交換劑。
在鹼性溶液中較穩定,則使用陰離子交換劑,如果欲分離的物質是兩性離子,一般考慮在它穩定的pH范圍帶有何種電荷,作為交換劑的選擇。離子交換劑的再生與保存離子交換劑可在柱上再生,若有脂溶性物質則可用非離子型去污劑洗柱後再生,也可用乙醇洗滌。
Ⅶ 您好,請問一下可以用離子交換樹脂來對蛋白水解液脫鹽嗎,蛋白水解液主要含鈉離子,氯離子,多肽。
離子交換樹脂可以很輕松去除掉水解液中的鹽,Na離子也是非常好脫除,使回用H型交換;Cl離子可使用陰離子樹脂答OH型交換。
使用離交樹脂對於多肽確實有一定的去除,尤其是強酸和強鹼樹脂;
多肽的脫除一般是在一定PH值范圍內,這取決於氨基酸的等電點,大部分氨基酸在強酸環境下是很容易被幹掉的。
Ⅷ 多肽固相合成法的分析
分析HPLC使用柱子和泵系統,可以經受傳遞高壓,這樣可以用極細的微粒(3-10μ m)做填料。由此多肽要在幾分鍾內高度被分析。
HPLC分兩類:離子交換和反相。離子交換HPLC依靠多肽和固相間的直接電荷相互作用。柱子在一定PH范圍帶有特定電荷衍變成一種離子體,而多肽或多肽混合物,由其氨基酸組成表現出相反電荷。 分離是一種電荷相互作用,通過可變PH, 離子強度, 或兩者洗脫出多肽,通常,先用低離子強度的溶液,以後逐漸加強或一步一步加強,直到多肽從柱中洗脫出。離子交換分離的一個例子使用強陽離子交換柱。如sulfoethylaspartimide通過酸性PH中帶正電來分離。
反相HPLC條件與正常層析正相反。多肽通過疏水作用連到柱上,用降低離子強度洗脫,如增加洗脫劑的疏水性。通常柱子由共價吸附到硅上的碳氫烷鏈構成,這種鏈長度為G4-G8碳原子。由於洗脫是一種疏水作用。大的疏水肽用短鏈柱洗脫好。 然而,總體實踐中, 這兩類柱互變無多少顯著差別,別類載體由碳水化合物構成, 比如苯基。
典型的操作常由兩綬沖劑組成,0.1%TFA-H2o和80% acetonitrile0.1%TFA--H2o稀acetonitrile。用線型梯變以每分鍾0.5%到1.0%改變的速度混合。常見分析和純化用柱為4.6×250mm(3-10μ m)和22×250mm(10μ m). 如果用徑向填柱,那麼大小是8×100(3-10μm)和25×250mm(10μ m)。
大量各種緩沖劑含許多不同試劑,比如heptafluorobutyric酸,0.1%磷酸,稀He formic酸(5-6%, pH2-4), 10-100mM NH4HCO3,醋酸鈉/氨,TFA/TEA,磷酸鈉或鉀,異戊酚。這樣許多不同組合可形成緩沖劑,但要注意一點:硅反相柱料不能長時間暴露於高pH,甚至微鹼pH,因為這樣會破壞柱子。
Fmoc―氨基酸的制備和側鏈保護
Fmoc基團是在有NaHCO3或Na2CO3存在的二氧六環溶液中,理想的Fmoc-氨基酸的側鏈保護基應在鹼性條件下穩定,在酸性條件下脫除..
Ⅸ 怎麼除掉多肽中TFA鹽或將其轉換成醋酸鹽
多肽轉鹽或者除鹽一般建議選擇離子交換填料進行,對於填料選擇需要有針對性,一般填料會對多肽進行吸附,經常在轉鹽的過程中遇到多肽洗不下來的情況。因此一般會選取經過改性離子色譜進行轉鹽。針對不同多肽,轉鹽有兩種情況,一種是過柱直接交換離子達到轉鹽目的,一種是多肽掛柱,經過相關鹽溶液過柱轉鹽後再使用相應溶媒將多肽洗滌下來已達到轉鹽的目的。
Ⅹ 多肽和寡肽的區別
1、營養價值不同
多肽:牛乳中的酪蛋白具有較強的抗變異能力,能減少癌變。。
其次,乳中必需氨基酸的量與人類所需的最適氨基酸量關系十分密切。因此,乳蛋白質最好的應用可作為植物性蛋白質的補充,從而發揮其富含必需氨基酸的優點,強化混合食品的營養價值。
寡肽:乳清中富含半胱氨酸和蛋氨酸,它們能維持人體內抗氧化劑的水平。
其次,乳清蛋白中脂肪、乳糖含量低,但它含有β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、免疫球蛋白,還有其他多種活性成分。正是這些活性成分使乳清蛋白具備了有益於人體的諸多保健功能。
2、形成途徑不同
多肽:乳中蛋白質的形成主要是經兩個途經,一個途徑是由血清蛋白轉移而來。另一途徑是由乳腺上皮細胞從血清中吸收的氨基酸和葡萄糖轉化的氨基酸合成而來。
寡肽:美國早在1990年採用離子交換法從乳清中分離乳清蛋白。
生物選擇吸附、親和色譜提純法及反相膠束萃取法等都是開發的新的分離乳清蛋白成分的方法。
3、生理功能不同
多肽:調節機體免疫功能、抗氧化作用、調節鐵離子的吸收。
寡肽:延緩或者構築肌肉、延緩疲勞的產生、保護免疫細胞功能。
參考資料來源:網路-寡肽
網路-多肽