胎牛血清可以過濾嗎
㈠ 胎牛血清(FBS)的主要作用有哪些,生命科學方面的文章哪裡有
1、提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以回及主要的低分子答營養物。 2、提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。 3、有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。 4、是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。 5、起酸鹼度緩沖液作用。 6、提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩餘胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。更多這方面的知識可以登錄生物幫了解一下! http://www.bio1000.com/news/1/ 生物幫快訊,生物新聞快訊,生物科技,生命科學,科研進展。
㈡ 碳吸附胎牛血清可以用普通的血清代替嗎
活性炭能夠結合脂溶性分子,因此能夠用來除去激素類物質,例如,胎牛血清中專的雌二醇、孕酮屬、皮質醇、睾酮及T3和T4分子。活性炭吸附胎牛血清就是用於培養體外培養驗證激素作用。你用普通的血清它們成分不一樣了,會對細胞有影響。厚百提供。
㈢ 如何檢測培養基里有無胎牛血清
培養基的選擇:
細胞培養是實驗室里最常見和最基本的實驗了,但卻不是最簡單的。別小看細胞培養,這里可蘊含著大學問。有時候細胞狀態不好,轉染、葯篩這些實驗根本就沒辦法做。影響細胞培養的因素很多,讓我們先從培養基和血清說起。
◆ MEM是由Eagle』s基礎培養基(BME)發展而來的,其中增加了組分的范圍及濃度。
◆ 改良的BEM(DMEM)培養基是為小鼠成纖維細胞設計的,現在常用於貼壁細胞的培養。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,採用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。最初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,後來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。
◆ aMEM含有附加的氨基酸、維生素以及核苷和脂肪酸,它可廣泛應用於各種細胞類型,包括對營養成分要求苛刻的細胞。
◆ Ham』s F12是為在低血清濃度下克隆CHO細胞而設計的,現在也廣泛應用於克隆形成率的分析及原代培養。F12還可以與DMEM等體積混合使用,得到一種高濃度與成分多樣化相結合的產物,這種培養基已應用於許多原代培養及更難養的細胞系的培養。
◆ RPMI 1640培養基是專為淋巴細胞培養而設計的,現在已廣泛應用於懸浮細胞的培養。
准備幾種培養基,然後花大約兩周的時間做一個簡單的細胞生長實驗,來選擇其中最適合的。
以前大部分實驗室都是用乾粉培養基,但配製過程就較為繁瑣,要溶解、調pH值,過濾,過程中可能會產生一些濃度誤差,而且有些實驗室的水質並不理想,所以培養的效果會有差異。
血清的選擇:
血清含有生長因子可促進細胞的繁殖,含有附著因子可促進細胞的貼壁,同時還具有抗胰酶活性。血清同時也是礦物質、脂類及激素的來源。最常用的血清有小牛血清、新生牛血清、胎牛血清和馬血清等。牛血清是按照采血時間的早晚來分類的。采血時間越早,營養物質越豐富,所含抗體也越少,因而胎牛血清適合要求高的細胞系和克隆化培養。
而血清批次間的差別就是不可避免的,這種差異來源於不同的制備方法和除菌方法、動物的年齡差別及血清的儲存條件等,而且與取血動物的來源關系密切。不同的牧場、不同的氣候天氣及其他環境因素都可能影響血清的質量。因此選好了一種血清就要盡可能長期使用它。在需要更換時,也要盡量保持與原有的一批血清相似。現在很多公司都提供血清預留,你一旦選定了某個批次的血清,最好備足一年的量,這樣可以避免很多麻煩。
血清固然是細胞培養中不可或缺的成分,但血清的批間差異大,更換血清時需要做大量的測試以取保替換的血清與原來的相似。而血清的供應也是必須要考慮的因素。
無血清培養基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顧名思義,就是在細胞培養中不需要添加血清,但是在某些應用中可能要添加生長因子或細胞因子。無血清培養基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生長因子、必需的營養物質和激素等,能減少上述血清帶來的不利因素,使細胞培養的條件更穩定。但它也不是完美的,從有血清培養過渡到無血清培養的條件並不像想像中那麼直截了當。處於發育的不同分化階段的細胞(例如幹細胞與定向前體細胞相比)需要不同的配方,對生長因子和細胞因子的選擇尤為重要。而且在去除血清的同時,也去除了一些血清蛋白具有的保護、解毒作用,因此對試劑、水的純度和儀器清潔度的要求更高。另外,它的價格也比普通的培養基貴很多。
這么多種,要選擇起來也是個頭疼的事情。除了部分培養基是公開配方的,如用於培養內皮細胞的MCDB 131(Sigma),大部分液體培養基都是專利配方的,也就是說其中的成分是保密的。那麼你只能是檢索文獻、讓供應商推薦,然後用自己的細胞做幾次傳代培養來選出最合適的培養基。畢竟實踐出真知嘛。
㈣ 胎牛血清進口怎樣操作最安全
、外觀 拿到血清,最先接觸的是血清外觀,對於缺少細胞培養經驗的人來版說,外觀的判斷尤為重要權 1、顏色 根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,我國的細胞培養用血清標準是不高於20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清並無...
㈤ 什麼行業需要胎牛血清
高校、科研院所、只要是和生物有關系的行業一般都會用到這個的
胎牛血清的主要作用是培養細胞用的。。。
希望可以幫到你下面介紹一下啊血清的成分和功能
一、胎牛血清
各項質量指標符合2005版《中華人民共和國葯典》第三部附錄的要求。
1、性狀、外觀 淺黃色澄清、無溶血、無異物稍粘稠液體。
2、蛋白質含量 3.5%~5.0%( w/v)
3、血紅蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)
4、無菌檢驗陰性
5、支原體檢驗陰性
6、細菌內毒素 ≤5(EU/ml)
7、牛腹瀉病毒 陰性
8、大腸桿菌噬菌體 陰性
9、支持細胞增殖(Sp2/0-Ag14)生長曲線(接種濃度)最大增殖濃度≥2.5×106 個/ml
細胞倍增時間 ≤15h
克隆率 ≥85%
血清的主要成分
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物,其組成成份雖大部分已知,但還有一部分尚不清楚,且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機物等,這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。
胎牛血清應取自剖腹產的胎牛;新牛血清取自出生24小時之內的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
顯然,胎牛血清是品質最高的,因為胎牛還未接觸外界,血清中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分最少。
功能
牛血清是細胞培養中用量最大的天然培養基,含有豐富的細胞生長必須的營養成份,常用於動物細胞的體外培養,具有極為重要的功能。1.提供對維持細胞指數生長的激素,基礎培養基中沒有或量很少的營養物,以及主要的低分子營養物。2. 提供結合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力。3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用。4.是細胞貼壁、鋪展在塑料培養基質上所需因子來源。5.起酸鹼度緩沖液作用。6.提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時使剩餘胰蛋白酶失活,保護細胞不受傷害。
主要品牌:hyclone Gibco PAA等....以上品牌北京博艾爾都有銷售的...
㈥ 胎牛血清是什麼玩意呀有什麼用
1、胎牛血清是用健康母牛懷孕的八月齡胎牛血液為原料,經無菌採集、分離、微孔過濾後而成。
2、這個東西主要是實驗室里做細胞培養用的。
㈦ 胎牛血清溶解後有沉澱是否影響使用
血清中抄沉澱物的出現有許襲多原因,但普遍的原因是血清中脂蛋白的變性所造成的,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍後,也會存在於血清中,也是造成沉澱物的原因之一。但這些絮狀沉澱物,並不影響血清本身的質量。
若欲去除這些絮狀沉澱物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可加入培養基內一起過濾。最好不使用過濾的方法去除這些絮狀沉澱物,因為它可能阻塞過過濾膜。
㈧ 如何區別真假胎牛血清及擇取胎牛血清質量
一、外觀
拿到血清,最先接觸的是血清外觀,對於缺少細胞培養經驗的人來說,外觀的判斷尤為重要
1、顏色
根據血紅蛋白含量的不同,胎牛血清可表現出黃色或紅色,我國的細胞培養用血清標準是不高於20mg/dl,實際上,血紅蛋白含量的高低對血清並無直接影響,這個指標的意義在於能體現出采血過程的嚴謹規范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
國產血清的采血點很分散,大多是由屠戶采血後馬上離心收集,所以很少會有溶血,表現出明亮的蠟黃色,當然,國產血清也很少有標准意義上的胎牛血清。
進口胎牛血清或多或少總有點溶血,因為真正的胎牛血清凝血功能差,紅細胞容易破裂。
總的來說,國產的血清呈現出蠟黃。進口的血清,質量最好的呈現出談黃、微紅色,差點的呈現出橘紅色或鮮紅色。當然,熱滅活血清或保存不當的血清,由於血紅蛋白的破壞氧化,會呈現出暗紅,甚至咖啡色。
2、沉澱
很多血清客戶,會發現進口血清有沉澱,從而懷疑血清的質量問題,這是沒有根據的。
血清中的沉澱是由纖維蛋白的凝聚產生,對血清質量沒有任何影響,沉澱的產生原因很多,和廠家的加工生產方式密切相關。
國產的血清,大多來自北方,由於價格低廉,保存環境都不好,從采血、冷凍、運輸到生產會經過多次凍融,每次凍融過程,就會析出部分纖維蛋白沉澱,這樣,血清成品過濾後看起來反而更加的「干凈」,很少有沉澱產生。
進口的胎牛血清,過濾分裝前很少會反復凍融,生產後的成品也是清澈的,但隨著時間的推移,血清中的大量纖維蛋白會析出形成沉澱。當然,進口的新生牛血清,一般牛齡都在2周左右,血清中的各種蛋白含量明顯偏高,生產後血清可能會渾濁,甚至有大量沉澱。
當然,購買回來的血清都是冰凍狀態,使用時需要融化,融化過程最好在溫度較低的狀態下慢慢進行,否則沉澱相對較多,雖然沉澱並不直接影響血清的質量,但對細胞的顯微觀察有一定的阻礙。
3、澄清度
進口胎牛血清由於蛋白和脂類等物質含量低,表現為稀薄、清淡,而國產血清,因為絕大多數是新生牛血清,相對而言更加粘稠,顏色略深,這對於初步接觸血清的人很難判斷,但把兩者進行對比,可容易分辨。
二、主要技術指標
目前國內血清的質量標準是2005版的《中華人民共和國葯典》,主要指標有以下幾點:
1、內毒素
標准為不高於5EU/ml。內毒素是細菌破碎後細胞壁的成分,因此內毒素含量的高低可表現出采血到生產一系列過程中的無菌操作情況。目前,國產血清基本都能達到這一要求,很多進口胎牛血清內毒素含量反而更高,只要求不高於50EU/ml,高出我國標准10倍。可見,內毒素含量偏高不影響質量,除非含量極高,預示著已經污染。
2、總蛋白含量
胎牛血清一般范圍是30-40mg/ml,數值偏高,說明采血的牛齡偏大,不是胎牛,數值偏低,表明血清可能摻水了。
3、血紅蛋白
標准為不高於20mg/dl,顏色越紅,數值越高,反之,數值越低。
4、pH
國產血清,大多高於7.5,進口胎牛血清,大多低於7.5,具體原因未知,可能和牛齡有關,這也能用來初步鑒別血清的來源。
5、微生物
包括細菌、黴菌、支原體、噬菌體、各類病原性病毒等。隨著國內血清廠家生產條件的改善提高,細菌、黴菌等「大型」微生物幾乎能100%控制,支原體經過0.1um過濾,大多也能清除。大腸桿菌噬菌體的污染還是比較嚴重的,主要是生產環境過程中帶入,又無法過濾,很難徹底清除,但對血清質量影響不大。病原性病毒,特別是BVDV,在國產血清中幾乎90%以上都存在,這類微生物是影響國產血清質量的重要因素之一,而進口胎牛血清中基本都控制的很好。
6、免疫球蛋白
國產血清的只是定性檢測,結果也很不準確,進口胎牛血清大多定量檢測。免疫球蛋白的數值能完全體現出采血的時的牛齡情況,國產血清,基本都是新生牛的,血清中容易產生IgM,IgG的含量也偏高,進口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也較低。
7、其它
不管是國產還是進口血清,都是不測抗生素的(無四環素胎牛血清除外)。國外,抗生素的使用很嚴格,用量也很少,每頭奶牛的產品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量極低;國內,抗生素的濫用已成了普遍現象,血清中殘留很高,對細胞培養極為不利,這是國產血清質量差的根本原因。
㈨ 請問細胞培養中胎牛血清過濾的詳細步驟,
胎牛血清買回來先化開,然後56度半小時滅活,在正常過濾就行。如果你用一次性濾器,版那就先准備權20或50ml的注射器,用注射器抽取,拔掉針頭,再把一次性濾器插入注射器出口,把濾出的血清放滅過菌的容器就行,我一般放50ml離心管中,用時也方便,否則血清反復凍融不好,也容易染菌。