安捷倫離子交換色譜柱

Ⅰ 離子交換色譜柱和離子排阻色譜柱分離物質原理的區別

色譜過程的本質是待分離物質分子在固定相和流動相之間分配平衡的過程，不同的物質在兩相之間的分配會不同，這使其隨流動相運動速度各不相同，隨著流動相的運動，混合物中的不同組分在固定相上相互分離。根據物質的分離機制，又可以分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜等類別。 吸附色譜利用固定相吸附中心對物質分子吸附能力的差異實現對混合物的分離，吸附色譜的色譜過程是流動相分子與物質分子競爭固定相吸附中心的過程

Ⅱ 安捷倫高效液相色譜c18柱的洗柱方法是什麼

第一、安捷倫的色譜柱有很多種，所以要分清類型去沖洗。
第二、作為普通C18柱，尤其是硅膠基質的普通C18柱，對酸鹼鹽以及水，都是造成柱子的損壞的流動相構成。水不能過多（除了帶AQ的純水柱，一般各家品牌都有這款防水柱）我個人認為只要超過80%的水的流動相，都會造成C18的壽命縮短。所以做高水相的流動相分析時請注意選合適的柱子。酸對柱子的損傷是不可逆的，一定要控制PH，我個人認為PH在2以下的都要做好費柱子的准備。鹼性條件是對於硅膠基質的C18的弱項，一般的硅膠基質的C18鹼性條件都不太耐用，但現在也有鹼性PH11的柱子，但比較貴。鹽對色譜柱的影響主要是鹽析造成的，而且是致命。
第三沖洗方法的問題。沖洗方法根據使用的流動相和樣品的不同沖洗方法要加以區分。一般不加酸鹼鹽，水相也不高的情況（如甲醇水60:40），無需太過沖洗，沖洗的目的就是為了把樣品的雜質沖出即可。保存流動相保存即可。酸和鹼的條件下，原則上是將酸鹼沖出色譜柱，保存在甲醇水即可（如60:40比例可根據要使用的流動相，只要水相不高即可）。鹽的條件比較麻煩，處理不好，不僅僅色譜柱出問題而且儀器也比較麻煩。常用的就是高水相流動相甲醇-水（10：90）將鹽沖出（注意壓力），然後用純甲醇沖洗（這一步是恢復高水相對色譜柱的損傷），最後保存在一般的甲醇水體系即可。
第四點，沖洗的時候注意是壓力，最好是從小流速開始慢慢提升流速到壓力許可的范圍。沖洗的時間，准確的是流量一般色譜柱的沖洗都要達到10-20倍的柱體積。

Ⅲ 分配色譜，吸附色譜和離子交換色譜各是什麼它們的區別

吸附色譜

吸附色譜利用固定相吸附中對物質分子吸附能力的差異實現對混合物的分離，吸附色譜的色譜過程是流動相分子與物質分子競爭固定相吸附中心的過程

吸附色譜的分配系數表達式如下：

Ⅳ 從分析原理簡述hplc中，離子交換色譜，離子對色譜及離子色譜有何異同

離子抄色譜原理與離子交換襲色譜原理類似，離子色譜後一般使用電化學檢測器進行檢測，適用於分析無機與有機陰陽離子和氨基酸，以及糖類和DNA、RNA的水解產物等；離子對色譜主要是補充離子抑制色譜的不足，離子抑制色譜是指在流動相中加入弱酸或弱鹼來抑制待測組分的離解，提高k值以利於組分的分離，一般針對酸性待測組分，可在流動相中加入弱酸，使待測組分減少在流動相中的離解，加強與固定相的分配，適用於有機弱酸鹼或兩性化合物的檢測，但由於色譜柱一般是硅膠基質化學鍵合相色譜，其酸度耐受范圍是2-8，因此在加入酸鹼調節劑時還要兼顧流動相pH，導致無法通過此方法分析強酸強鹼，因此引入離子對色譜，在流動相中加入可與強酸強鹼抑制的離子對，通常分析鹼加入烷基磺酸鈉，分析酸加入季胺鹽，適用於較強有機酸鹼的分析。

Ⅳ 安捷倫高效液相色譜柱的洗柱方法

1、色譜柱清洗要看你的色譜柱是孔徑是多少微米，適合的流速是多少。專
2、以4.6微米的為例，先屬用純水清洗2小時，再用甲醇清洗1小時。用的時候直接換上流動相。

3、高效液相色譜柱的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統,樣品溶液經進樣器進入流動相,被流動相載入色譜柱(固定相) 內, 由於樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數, 在兩相中作相對運動時, 經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程, 各組分在移動速度上產生較大的差別, 被分離成單個組分依次從柱內流出, 通過檢測器時, 樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀,數據以圖譜形式列印出來。

Ⅵ 安捷倫高效液相色譜c18柱的洗柱方法

第一、安捷倫的色譜柱有很多種，所以要分清類型去沖洗。
第二、作為普通柱，尤其是硅膠基質的普通C18柱，對酸鹼鹽以及水，都是造成柱子的損壞的流動相構成。水不能過多（除了帶AQ的純水柱，一般各家品牌都有這款防水柱）我個人認為只要超過80%的水的流動相，都會造成C18的壽命縮短。所以做高水相的流動相分析時請注意選合適的柱子。酸對柱子的損傷是不可逆的，一定要控制PH，我個人認為PH在2以下的都要做好費柱子的准備。鹼性條件是對於硅膠基質的C18的弱項，一般的硅膠基質的C18鹼性條件都不太耐用，但現在也有鹼性PH11的柱子，但比較貴。鹽對色譜柱的影響主要是鹽析造成的，而且是致命。
第三沖洗方法的問題。沖洗方法根據使用的流動相和樣品的不同沖洗方法要加以區分。一般不加酸鹼鹽，水相也不高的情況（如甲醇水60:40），無需太過沖洗，沖洗的目的就是為了把樣品的雜質沖出即可。保存流動相保存即可。酸和鹼的條件下，原則上是將酸鹼沖出色譜柱，保存在甲醇水即可（如60:40比例可根據要使用的流動相，只要水相不高即可）。鹽的條件比較麻煩，處理不好，不僅僅色譜柱出問題而且儀器也比較麻煩。常用的就是高水相流動相甲醇-水（10：90）將鹽沖出（注意壓力），然後用純甲醇沖洗（這一步是恢復高水相對色譜柱的損傷），最後保存在一般的甲醇水體系即可。
第四點，沖洗的時候注意是壓力，最好是從小流速開始慢慢提升流速到壓力許可的范圍。沖洗的時間，准確的是流量一般色譜柱的沖洗都要達到10-20倍的柱體積。

Ⅶ 離子交換色譜法,離子色譜法,離子對色譜法三者的區別

離子色譜是高效來液相源色譜的一種，故又稱高效離子色譜（HPIC）或現代離子色譜，其有別於傳統離子交換色譜柱色譜的主要是樹脂具有很高的交聯度和較低的交換容量，進樣體積很小，用柱塞泵輸送淋洗液通常對淋出液進行在線自動連續電導檢測。
離子對色譜法：不懂

Ⅷ 以離子交換色譜法為例，簡述濕法裝柱的操作過程和注意事項

1.樣品處理：對被分離樣品有時要經過水解等化學處理，樣品溶液一般要兼顧到濃度與粘度兩方面。
+ B4 ^: J i3 _) \- T: R/ |" v2.離子交換柱的安裝：層析柱內徑必須粗細均勻，柱管大小可據實際需要選擇。柱下端膠塞中插入一放液管，膠塞上蓋以園形尼龍綢或發泡塑料片以防止交換樹脂流出。
+ H/ ?0 X, d' E2 P8 h& S- U3.裝柱：⑴裝柱質量是確保柱層析分離效果的技術關鍵之一，越是高技術層析(如使用毛細管層析柱的高級層析設備)裝柱的技術要求和難度越高，以至手工操作很難達到。⑵裝柱的質量要求，無論是手工、機械、自動化裝柱都是一樣的，要求裝入柱中的分離載體材料松緊適度，分布均勻，無氣泡、無斷層、無結節，能保持正常的溶脹形態和結構；⑶裝入柱中樹脂的高度與直徑之比因分離對象和分離目的不同而相差很大，本教材推薦的肝素鈉洗脫柱裝柱高度是柱徑的4～6倍。⑷操作次序，以手工裝入溶脹的D254樹脂（濕法裝柱）為例，其操作程序可概括為：①查連接(柱與塞之間、上下塞與進出液管之間、梯度混合器與進液管之間、出液管與收集器之間等等的連接是否正確、緊密)，②試止漏（塞子、接頭、活塞開關處在長時間滿負荷下不泄漏），③加隔離緩沖墊（緊貼於柱子下端塞子的內平面），④加少許平衡液於空柱內，⑤趕氣泡（緩沖墊內和出水管中的氣泡），⑥開通放水開關，⑦與放水量保持相當的流速，向柱內勻速加完載體材料漿，⑧關閉放水開關，令樹脂自然下沉，⑨用洗滌液和清水洗滌樹脂，⑩最後用緩沖液過柱和平衡柱，使樹脂結構平衡穩定，⑾在樹脂表面蓋上一片尼龍或泡膜塑料，並與柱子內壁保持嚴密接觸，以防加樣時樹脂泛起。
( ?6 Y, g6 D5 S2 e- z% v b* m4.加樣：緩緩打開柱子下端的放液開關,使柱內液面剛好降至樹脂面時便立即將樣品溶液小心地加到尼龍或泡膜塑料片上，待樣品液面剛好進入樹脂層內便立即加入少許平衡緩沖液,以清洗粘附在覆蓋層中的樣品，並隨之進入樹脂層。當柱內液位接近樹脂表面時便立即添加洗滌液進行洗滌操作。$ o+ c9 M: n3 `% Q
5.洗滌：選用合適的洗滌液、恰當的總用量及洗滌流速，小心洗滌柱內樹脂，以除去不被離交樹脂吸附的雜質。: K0 s* j/ p; W4 d) o7 W6 _
6.洗脫：由洗脫曲線找出洗脫液的最佳濃度和適當的總量、操作壓及流速進行洗脫。
5 m- U F# X! m' M. O# g! |7.監測：用敏感快速的方法（參見下文「測定」）監測分離成分是否洗脫出來以及洗脫峰的軸向分布
9 v2 C$ h- _- \: S8.收集：一旦發現待分離成分洗脫出來便可進行一步或分步收集，並可根據各成分洗脫峰的軸向分布和濃度監測，決定產品收集濃度區段，棄去的洗脫液可循環用於相同成分的洗脫。
1 v7 I2 v8 H, m8 y3 ] M; J8 m9.沉澱/離心：用沉澱劑可將分離組分沉澱或離心下來脫水乾燥，沉澱劑回收再用。
" a3 @7 z0 a' t10.脫水乾燥：加入適當脫水劑為如無水乙醇、丙酮或乙醚脫水後進一步乾燥。5 _" H" J" X0 e% v" V
11.測定：對層析所得產品可稱重或測定活性計算其得量和收率。. ^7 ]4 x, e- `1 p# y- z. d7 g9 m5 `
【注意事項】4 G; U! }* `$ X7 C" b: b0 f
1.應根據被分離物質的理化性質、分子大小、分子形狀和分離的目的要求，選擇分離效果好、交換容量大而機械強度較高的分離載體材料。市售的分離載體有明確的規格型號、理化性質、功能作用、活化再生和保養存放等技術參數資料可供用戶選擇。
* K7 Q, U. T% x8 y5 R2.應根據分離純化的對象、規模選擇層析柱的長短、粗細、柱高與內徑之比，使達到最佳分離效果；此外，柱子材料的化學性質要穩定、透明，內徑要均一、光滑，死腔要愈小愈好，要有利於緊固、連接、裝柱與維護。
4 E& F! k7 Q. W3 [& s/ k( ?- P3.柱子安放要垂直、穩固，與之相連的各種線路、管道、設備、設施的布局和連接要緊奏，要方便操作、觀察與維護。4 F5 w( v8 w+ c4 C
4.要求裝入柱中的分離載體材料松緊適度，分布均勻，無氣泡、無斷層、無結節，能保持正常的溶脹形態和結構。5 F n1 O% }8 d z+ T0 L# t2 |3 C
5.保持柱內樹脂層面平整、層序結構始終如一是確保柱層析分離效果的又一技術關鍵。為此，從裝柱到洗脫結束的過程中，尤其是加樣、洗滌、洗脫過程中要始終保持柱內液位不低於柱內樹脂的頂部平面，尤其要始終保持柱內樹脂的層序結構始終如一，不被打亂，特別要防止更換濃度不同的洗滌洗脫液時發生「翻缸」而攪亂樹脂層結構，「壓缸」而造成柱層斷裂和梗塞斷流。
7 z/ W" C+ E8 q: i& t g6.注意保持一定的操作壓，這對確保層析柱流速和分離效果十分重要。因為流速不僅與洗脫液加在柱上的壓力（因液面差造成）有關，也與裝柱材料的粒度、交聯度、機械強度有關。應針對具體情況建立一個操作壓、流速和分離效果的最佳平衡點。
; N( j K7 n0 T" {9 [$ S6.顯著標明各種洗滌、洗脫液的技術參數，嚴禁亂用和混用。) M) k" o* {2 g( F
7.製作洗脫曲線，確定洗脫液收集方案，設置洗脫監控點。2 N; I* F% \6 e9 I5 J% X1 V
8.注意剔除破損樹脂，及時補足流失、破損的循環樹脂量。
# S5 F F8 K3 V2 ]9 A1 E6 U+ o9.嚴格掌握新、舊樹脂的活化、再生條件，及時再生舊樹脂。$ h4 U9 m: L5 L7 g
樹脂的再生：每次洗脫結束，用清水將樹脂洗出柱體再用、再生，或用高濃度的NaCl溶液浸泡貯存。樹脂經過一段使用後樹脂上的活性基團因被交換而使交換容量大為降低，此時樹脂需要再生處理。( z# |! T+ @) z" O
大處理（酸—鹼—酸）：加入樹脂2倍量的2mol HCL溶液攪拌3小時，自來水沖洗至中性；又用2mol NaOH溶液照酸處理方式處理；再用2mol HCL處理。
5 F% O1 U$ W2 r小處理（鹼—酸）：濃度、方法同上。) o4 @' Y" x8 ]8 s2 {8 P6 i
連續用數次的樹脂進行小處理，用十次後的樹脂要進行大處理。
4 {, T2 J( F& L& C: a- C% E& g$ X9 v10．注意脫水乾燥條件。$ M) H0 {1 @& q' Y9 j" t7 n1 x

Ⅸ 安捷倫色譜柱 帶ltm有什麼區別

色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此擔負分離作用的色譜柱是色譜系統的心內臟。對色譜柱的要求是柱效高容、選擇性好，分析速度快等。市售的用於HPLC的各種微粒填料如多孔硅膠以及以硅膠為基質的鍵合相、氧化鋁、有機聚合物微球（包括離子交換樹脂）、多孔碳等，其粒度一般為3,5,7,10μm等，柱效理論值可達5~16萬/米。對於一般的分析只需5000塔板數的柱效；對於同系物分析，只要500即可；對於較難分離物質對則可採用高達2萬的柱子，因此一般10~30cm左右的柱長就能滿足復雜混合物分析的需要。

Ⅹ 強陽離子交換(SCX)色譜柱與以強陽離子交換鍵和硅膠為填充劑的柱子有什麼區別

強陽離子交換(SCX)色譜柱與以強陽離子交換鍵和硅膠為填充劑的柱子有什麼區別