雙氧水處理細胞凋亡需要多久

㈠ 雙氧水處理細胞 多久能誘導凋亡

首先檢查所用的雙氧水是否失效，因為雙氧水很容易分解。
如果沒有失效，則可以增加雙氧水處理濃度或者加一點fe2+（fenton反應）。
要是還沒用，換一種氧化試劑。比如abts。

㈡ 細胞凋亡發生的過程

細胞凋亡的過程大致可分為以下幾個階段：
接受凋亡信號→凋亡調控分子間的相互作用→蛋白水解酶的活化（Caspase）→進入連續反應過程
1.凋亡的啟動階段
細胞凋亡的啟動是細胞在感受到相應的信號刺激後胞內一系列控制開關的開啟或關閉，不同的外界因素啟動凋亡的方式不同，所引起的信號轉導也不相同，客觀上說對細胞凋亡過程中信號傳遞系統的認識還是不全面的，目前比較清楚的通路主要有：
1）細胞凋亡的膜受體通路：各種外界因素是細胞凋亡的啟動劑，它們可以通過不同的信號傳遞系統傳遞凋亡信號，引起細胞凋亡，我們以Fas -FasL為例：
Fas是一種跨膜蛋白，屬於腫瘤壞死因子受體超家族成員，它與FasL結合可以啟動凋亡信號的轉導引起細胞凋亡。它的活化包括一系列步驟：首先配體誘導受體三聚體化，然後在細胞膜上形成凋亡誘導復合物，這個復合物中包括帶有死亡結構域的Fas相關蛋白FADD。Fas又稱CD95，是由325個氨基酸組成的受體分子，Fas一旦和配體FasL結合，可通過Fas分子啟動致死性信號轉導，最終引起細胞一系列特徵性變化，使細胞死亡。Fas作為一種普遍表達的受體分子，可出現於多種細胞表面，但FasL的表達卻有其特點，通常只出現於活化的T細胞和NK細胞，因而已被活化的殺傷性免疫細胞，往往能夠最有效地以凋亡途徑置靶細胞於死地。Fas分子胞內段帶有特殊的死亡結構域（DD,death domain）。三聚化的Fas和FasL結合後，使三個Fas分子的死亡結構域相聚成簇，吸引了胞漿中另一種帶有相同死亡結構域的蛋白FADD。FADD是死亡信號轉錄中的一個連接蛋白，它由兩部分組成：C端（DD結構域）和N端（DED）部分。DD結構域負責和Fas分子胞內段上的DD結構域結合，該蛋白再以DED連接另一個帶有DED的後續成分，由此引起N段DED隨即與無活性的半胱氨酸蛋白酶8（caspase8）酶原發生同嗜性交聯，聚合多個caspase8的分子，caspase8分子逐由單鏈酶原轉成有活性的雙鏈蛋白，進而引起隨後的級聯反應，即Caspases，後者作為酶原而被激活，引起下面的級聯反應。細胞發生凋亡。因而TNF誘導的細胞凋亡途徑與此類似
2）細胞色素C釋放和Caspases激活的生物化學途經
細胞核是細胞生命活動控制中心，它不僅是細胞呼吸鏈和氧化磷酸化的中心，而且是細胞凋亡調控中心。實驗表明了細胞色素C從線粒體釋放是細胞凋亡的關鍵步驟。釋放到細胞漿的細胞色素C在dATP存在的條件下能與凋亡相關因子1（Apaf-1）結合，使其形成多聚體，並促使caspase-9與其結合形成凋亡小體，caspase-9被激活，被激活的caspase-9能激活其它的caspase如caspase-3等，從而誘導細胞凋亡。此外，線粒體還釋放凋亡誘導因子，如AIF，參與激活caspase。可見，細胞凋亡小體的相關組份存在於正常細胞的不同部位。促凋亡因子能誘導細胞色素C釋放和凋亡小體的形成。很顯然，細胞色素C從線粒體釋放的調節是細胞凋亡分子機理研究的關鍵問題。多數凋亡刺激因子通過線粒體激活細胞凋亡途經。有人認為受體介導的凋亡途經也有細胞色素C從線粒體的釋放。如對Fas應答的細胞中，一類細胞（type1）中含有足夠的胱解酶8 （caspase8）可被死亡受體活化從而導致細胞凋亡。在這類細胞中高表達Bcl-2並不能抑制Fas誘導的細胞凋亡。在另一類細胞（type2）如肝細胞中，Fas受體介導的胱解酶8活化不能達到很高的水平。因此這類細胞中的凋亡信號需要藉助凋亡的線粒體途經來放大，而Bid -- 一種僅含有BH3結構域的Bcl-2家族蛋白是將凋亡信號從胱解酶8向線粒體傳遞的信使。
2.凋亡的執行
盡管凋亡過程的詳細機制尚不完全清楚，但是已經確定Caspase即半胱天冬蛋白酶在凋亡過程中是起著必不可少的作用，細胞凋亡的過程實際上是Caspase不可逆有限水解底物的級聯放大反應過程，到目前為止，至少已有14種Caspase被發現，Caspase分子間的同源性很高，結構相似，都是半胱氨酸家族蛋白酶，根據功能可把Caspase基本分為二類：一類參與細胞的加工，如Pro-IL-1β和Pro-IL-1δ，形成有活性的IL-1β和IL-1δ；第二類參與細胞凋亡，包括caspase2,3,6,7,8,9.10。Caspase家族一般具有以下特徵：
1)C端同源區存在半胱氨酸激活位點，此激活位點結構域為QACR/QG。
2）通常以酶原的形式存在，相對分子質量29000-49000(29-49KD），在受到激活後其內部保守的天冬氨酸殘基經水解形成大（P20）小（P10）兩個亞單位，並進而形成兩兩組成的有活性的四聚體，其中，每個P20/P10異二聚體可來源於同一前體分子也可來源於兩個不同的前體分子。
3）末端具有一個小的或大的原結構域。
參與誘導凋亡的Caspase分成兩大類：啟動酶（inititaor）和效應酶（effector）它們分別在死亡信號轉導的上游和下游發揮作用。
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㈢ 細胞凋亡是怎樣的過程

細胞凋亡是指細胞在一定的生理或病理條件下，受內在遺傳機制的版控制自動結束權生命的過程。而細胞程序性死亡是指生物在發育過程中對一定生理刺激的反應性死亡，它需要一定的基因表達。凋亡是對細胞死亡過程中一系列固定模式的形態變化的描述，而PCD則是側重功能上的概念。兩者有差異，但常混為一談。

㈣ 細胞凋亡有沒有時長從更新到凋亡有沒有固定時間

每個物種的細胞存活時間是不同的，而且同一個生命體的不同種細胞的存活時間也內是不同的，容比如人小腸的上皮細胞更新周期約為3－6天；胃內胃底腺的頸粘液細胞壽命約1周，但主細胞和壁細胞的壽命則長達200天。血細胞中，紅細胞壽命是120天，但白細胞就只有幾天。正常表皮細胞的更新時間平均為28天。

㈤ 活體分離到的細胞做凋亡可以放多久

活體分離到的細胞做凋亡可以放多久
細胞凋亡是生物體調節細胞群體相對恆定的一種重要方式,近年來成為生命科學中的研究熱點。目 前認為腫瘤的發生是細胞喪失自發調節凋亡反應能力的最終結果。

㈥ 關於細胞凋亡的問題，請對此有了解的同學，或者老師幫忙一下呵呵

我來嘗試回答一下，還望大牛指正
1.如果你說的是凋亡的早期和晚期的話，這個是用來描述細胞程序性凋亡的不同階段。就好象細胞有絲分裂的不同時期有不同的活動特徵一樣。具體你可以參考這兩個檢測方法：
早期 http://biology.dzvv.com/biology/440/2009-02/216587.html
晚期 http://biology.dzvv.com/biology/440/2009-02/216586.html
2.一般病毒大量復制（繁殖）的機制是，將病毒的序列整合到宿主細胞的DNA序列中，然後借用宿主細胞的DNA復制來擴增病毒序列。由此可見，當被感染的細胞啟動凋亡程序，其中的病毒就得不到擴增，從而達到犧牲少數被感染細胞而保護大多數未被感染細胞的目的。
3.你所說的通過抗體是體液免疫的過程，同時還存在細胞免疫。實際上，導致被感染細胞的凋亡是細胞免疫的一個重要步驟。具體可以參考以下鏈接
http://ke..com/view/39005.htm
4.端粒在染色體末端，目前知識來看，端粒本身不攜帶遺傳信息。正如你所說，一般認為，當在細胞分裂過程中，當端粒消耗完，損傷到其內的DNA時細胞會啟動凋亡程序（這也是一種防止細胞在分裂中老化和積累有害突變的機制）。但是同時，也存在端粒酶，能夠反向擴增，延長端粒。這就是為什麼有性生殖的時候，子代不受影響。同時，這也是癌細胞能夠不斷分裂的基礎之一。有關端粒和端粒酶可以參考以下鏈接
http://www.hudong.com/wiki/%E7%AB%AF%E7%B2%92
http://ke..com/view/213631.htm

㈦ 細胞凋亡一般加入lps多久後測

每種物是不同的，如果你不能確定時間點，需要做一個時間曲線。給一組細胞用後，每隔一段時間取一個樣本檢測，得到凋亡開始發生的時間點。然後再測不同濃度的物在這個時間點所引起凋亡的程度。

㈧ 細胞凋亡實驗中細胞培養多長時間後可以收集細胞

因為是誘導凋抄亡的襲實驗，細胞加葯處理後，貼壁細胞會因為活力喪失而脫壁漂浮，而這部分細胞正是你需要的，所以加葯處理完後要收集全部培養上清，少量PBS洗瓶內剩下的細胞，洗的PBS與之前收集的上清合並。胰酶消化。消化完畢用之前收集的培養基中止消化。離心後PBS再洗一遍。離心，棄上清，細胞沉澱中加入70% 4度預冷的乙醇（PBS配製），4度放置不少於1小時（有的文獻說是不少於15分鍾）。之後離心去乙醇，PBS洗一遍後加入PI和DNAse，終濃度50 ug/ml，混勻，避光室溫放置30 min後即可上流式細胞儀測定。

㈨ 使用雙氧水誘導細胞凋亡一般的使用濃度是多少

工業上生產有27.5%,35%,50%等幾個規格成品。自己使用可以根據需要加水稀釋。

㈩ 為什麼我用h2o2處理30分鍾細胞就凋亡了

求助細胞凋亡 我們一般是這樣建立凋亡模型的: 100 μM H2O2處理1h 10%細胞早期凋亡 100 mM H2O2處理1h 90%細胞晚期凋亡 市售30% H2O2是10 M