大孔樹脂多糖純化
㈠ 植物有效成分的提取用層析硅膠、大孔樹脂、活性氧化鋁那種最合適
硅膠最適合!因為硅膠的極性最強,孔結構和比表面可以調整,而且沒有有機物污染;相對而言,大孔樹脂因為有有機物材料,早被國家葯監局列為限制使用產品;而活性氧化鋁的極性不如硅膠,選擇性吸附這一特點上不如硅膠。(1) 硅膠:層析用硅膠為一多孔性物質,分子中具有硅氧烷的交鏈結構,同時在顆
粒表面又有很多硅醇基。硅膠吸附作用的強弱與硅醇基的含量多少有關。硅醇基能夠通過氫鍵的形成而吸附水分,因此硅膠的吸附力隨吸著的水分增加而降低。若吸水量超過17%,吸附力極弱不能用作為吸附劑,但可作為分配層析中的支持劑。對硅膠的活化,當硅膠加熱至100~110℃時,硅膠表面因氫鍵所吸附的水分即能被除去。當溫度升高至500℃時,硅膠表面的硅醇基也能脫水縮台轉變為硅氧烷鍵,從而喪失了因氫鍵吸附水分的活往,就不再有吸附劑的性質,雖用水處理亦不能恢復其吸附活性。所以硅膠的活化不宜在較高溫度進行(一般在170cC以上即有少量結合水失去)。
硅膠是一種酸性吸附劑,適用於中性或酸性成分的層析。同時硅膠又是一種弱酸性陽離子交換劑,其表面上的硅醇基能釋放弱酸性的氫離子,當遇到較強的鹼注化台物,則可因離子交換反應而吸附鹼性化合物。
(2)氧化鋁:氧化鋁可能帶有鹼性(因其中可混有碳酸鈉等成分),對於分離一些鹼性中草葯成分,如生物鹼類的分離頗為理想。但是鹼性氧化鋁不宜用於醛、酮、醋、內酯等類型的化合物分離。因為有時鹼性氧化鋁可與上述成分發生次級反應,如異構化、氧化、消除反應等。除去氧化鋁中絢鹼性雜質可用水洗至中性,稱為中性氧化鋁。中性氧化鋁仍屬於鹼性吸附劑的范疇,本適用於酸性成分的分離。用稀硝酸或稀鹽酸處理氧化鋁,不僅可中和氧化鋁中含有的鹼性雜質,並可使氧化鋁顆粒表面帶有NO3一或CI一的陰離子,從而具有離於交換劑的性質,適合於酸性成分的層析,這種氧化鋁稱為酸性氧化鋁。供層析用的氧化鋁,用於拄層析的,其粒度要求在100~160目之間。粒度大子100目,分離效果差:小於160目,溶濃流速大慢,易使譜帶擴散。樣品與氧化鋁的用量比,一般在1:20~50之間層析柱的內徑與柱長比例在1:10-20之向。
在用溶劑沖洗柱時,流速不宜過快,洗脫液的流速一般以每半~1小時內流出液體的毫升數與所用吸附劑的重量(克)相等為合適。
(3)活性炭:是使用較多的一種非極性吸附劑。一般需要先用稀鹽酸洗滌,其次用乙醇洗,再以水洗凈,於80℃乾燥後即可供層析用。層析用的活性炭,最好選用顆粒活注炭,若為活性炭細粉,則需加入適量硅藻土作為助濾劑一並裝柱,以免流速太慢。活性炭主要且於分離水溶性成分,如氨基酸、糖類及某些甙。活性炭的有為吸附作用,在水溶液中最強,在有機溶劑中則較低弱。故水的洗脫能力最弱,而有機溶劑則較強。例如以醇-水進行洗脫時,則隨乙醇濃度的遞增而洗脫力增加。活性炭對芳香族化合物的吸附力大於脂肪族化合物,對大分子化合物的吸附力大於小分子化合物。利用這些吸附性的差別,可將水溶性芳香族物質與脂肪族物質分開,單糖與多糖分開,氨基酸與多肽分開。下邊我就硅膠作為分離提純的介質詳細做以描述:硅膠表面結構概述在色譜和工業水處理領域中,無定形硅膠已得到了廣泛的應用,它具有多孔的無定形結構,不產生任何x 射線衍射[1,4]。硅膠的表面存在著硅醇基團(si-oh)和暴露的硅氧烷鍵(si-o-si)。硅醇基團是強吸附的極性基團,而硅氧烷鍵是疏水基團。硅氧烷鍵上的δ鍵被dπ-pπ作用而加強,氧原子上的孤對電子參與π作用,不能參與給體與受體間的相互作用,不能形成氫鍵。scott和kucera證實硅氧烷基團幾乎不吸附極性溶劑分子。然而,由於硅氧烷鍵的疏水作用性,可以吸附某些非極性溶劑分子。對硅膠改性而言,硅醇基比硅氧烷基重要得多。硅醇基團可以孤立、成對(雙生)和締合(連位)等不同的方式存在於硅膠表面。最近研究表明,不僅兩個或兩個以上的締合硅醇基團可以形成鍵合對,甚至成對硅醇基團也可以形成鍵合對。硅膠表面的結構可以通過許多方法進行測定。一般情況下,隨著比表面積的增加,硅膠表面上硅醇基團的濃度略有降低。通常硅醇含量的測定方法有同位素交換法、滴定法、光譜法和烷基鋁法等。nawrock[1]報道了用同位素交換法測定硅膠表面的硅醇基濃度是8.0±1.0μmol/m2,而且這個數值常常被視為硅膠的物理化學常數。硅醇基團具有明顯的酸性,測定的pka值是7.1。通過對硅膠表面的結構分析,可知硅膠表面硅醇基的類型、濃度和表面分布都會影響所制備鍵合相的性能,而硅膠的預處理則可以改變表面硅醇類型的分布,提高表面的締合硅醇的含量,改善硅膠表面鍵合相的性能。 柱層析硅膠在生物工程技術中應用的突出優勢 (1)具有剛性的骨架結構,機械強度高,可以耐受30MPa以內的壓力;
(2)優良的吸附性能,對性質、結構相似乃至同分異構體都有理想的分離功能;
(3)有良好的熱穩定性和化學穩定性;
(4)與有機柱填料相比,硅膠為固體以SiO2為基質的膠體,結構緻密,在應用中不會發生有機質流失而污染目標產物;
(5)能從多組分溶液中有選擇地吸附提純同分異構體組分;
(6)在制備柱層析硅膠過程中,可以通過控制不同工藝條件生產出平均孔徑20
㈡ 粗多糖提純的方法有哪些
西安市天園生物制劑廠
大豆粗多糖:是從大豆籽粒中提取出的可溶性寡糖的回總稱,大豆中的寡答糖屬於а-半乳糖苷類,包括棉籽糖、水蘇糖和Vabascose.
(1)、促進雙歧桿菌的增殖:人體雖然不能直接利用粗多糖,但是粗多糖可被腸內細菌利用,並且能促進雙歧桿菌的增殖。雙歧桿菌是一種厭氧革蘭氏陽性細菌,是維護和保持腸道菌群平衡的一個極為重要的因素,也是判斷腸內外環境是否正常的一個可靠依據。
(2)、抑制病原菌:大豆粗多糖能促進雙歧桿菌的增殖,從而抑制有害細菌如產生梭狀芽孢桿菌的生長。雙歧桿菌能發酵粗多糖產生短鏈脂肪酸和一些抗菌素物質,從而可抑制外源致病菌和腸內固有腐敗細菌的生長繁殖。
(3)、防止便秘、腹脹,促進消化,調節胃腸功能:腸道內的雙歧桿菌發酵粗多糖產生大量的短鏈脂肪酸(主要是醋酸和乳酸),能刺激腸道蠕動,從而促進消化,防止便秘的產生。
(4)、增強免疫功能:如果人較長期的食用無細菌食物,腸道就會因為缺少刺激而使其產生抗體的能力下降,從而容易誘發疾病。食用粗多糖,促進雙歧桿菌的增殖,將對腸道免疫細胞產生刺激,提高其產生抗體的能力從而起到防治疾病的效果。
㈢ 確定ab-8大孔樹脂純化多糖可以直接用20%乙醇洗脫嗎
確定
㈣ 多糖上大孔樹脂脫色,色素會被洗脫下來嗎
大孔吸附樹脂都是這樣的,你用羅門哈斯比如XAD系列比如XAD1600什麼的也會有這個情況我以前摸條件的時候,用5%濃差乙醇溶液梯度洗脫,兩三次下來就發現全是氣泡~
㈤ 聚醯胺、硅膠、大孔樹脂色譜柱適合分離的成分分別是什麼
聚醯胺與硅膠對極性大的有機物吸附強 大孔樹脂主要用於水溶性成分的分離純化,尤其是大分子的親水性成分如多糖、皂苷、黃酮、生物鹼、三萜類化合物
㈥ 請問D301型大孔弱鹼性苯乙烯系陰離子交換樹脂可以用來分離多糖么,吸附硫酸根么不勝感激
D301弱鹼苯乙烯陰樹脂可以吸附硫酸根
如果用於多糖分離的話,需轉型至指定形態,後採用色譜方式分離不同組分糖,粒度越均勻越好
㈦ 多糖脫除色素 用什麼大孔樹脂效果比較好
這個需要用吸附樹脂了,而且要根據你的用途而定。要是實驗室做實回驗的話從國葯中心買點樹脂答,工業生產的話很多廠子都賣這種樹脂,像什麼凱瑞化工、丹東立和什麼的。具體用到什麼樹脂需要問他們那邊了。型號很多,具體用途也不一樣。如果想了解詳細的可以問我。
㈧ 我最近在用大孔樹脂進行多糖的脫色,我在選擇色素測定波長時遇到問題,求指導幫助!
採用水提、絮凝脫色、樹脂吸附、重結晶工藝提取純化。結果杜仲葉的水浸提液內濃縮後用1%殼聚糖容絮凝去雜、活性碳脫色得到進樣液,進樣液用NKA-9樹脂吸附,50%乙醇解吸,洗脫液濃縮後的粗品經甲醇重結晶得到純度≥97%的綠原酸,提取率 ≥65%。結論 優化完善了杜仲葉中綠原酸的提取純化方法,為杜仲資源的充分綜合利用和產業化開發提供了參考。
㈨ 大孔吸附樹脂用什麼洗脫比較好啊
可以走分子篩,用層析法分離,大孔樹脂對極性物質的吸附效果很差