ARG樹脂
⑴ 請求幫忙，有關氨基酸洗脫
1 PH=2~3比較好
2 Ph逐漸升高，鹽離子強度逐漸增強
3 順序從先到後：asp gly leu lys
以下是跟你這個題同類的，具體原因寫在下面
Lys Arg Asp Glu Tyr Ala的混合物在高pH條件下加到陰離子交換樹脂上，用連續遞減pH值緩沖溶液洗脫
懸賞分：50 - 解決時間：2010-11-4 17:42
預測這些氨基酸的洗脫順序 請詳細說明下這個洗脫順序的理由和陰離子交換樹脂洗脫的一般規律 謝謝
提問者： sd3318405 - 四級最佳答案洗脫先後順序：Arg Lys Tyr Ala Glu Asp
先分組：1 Arg Lys是鹼性氨基酸 PH=7 正電荷
2 Tyr ALa是中性氨基酸 PH=7 中性為主
3 Glu Asp是酸性氨基酸 PH=7 酸性
由於是交換樹脂層析，氨基酸的與樹脂的親和力主要取決於他們之間的親和力，其次是氨基酸與樹脂之間的疏水相互作用。由於緩沖液先是鹼性，所以氨基酸與樹脂的親和力為：酸性氨基酸》中性氨基酸>鹼性氨基酸（陰離子樹脂的疏水基團帶正電，負電被交換了），洗脫的順序就是：鹼性 中性 酸性
考慮氨基酸與樹脂的疏水作用：Arg的R基團是三個亞甲基+一個亞氨基，Lys是四個亞甲基，很明顯，Arg的疏水作用要弱，與樹脂吸引力不夠強，最先被洗下來。其他的兩組樓主自己分析R基團的疏水性
⑵ 陰離子交換樹脂的作用原理是什麼
陰離子交換樹脂的工作原理是什麼
離子交換樹脂是一種高分子化合物，這種材料有著很好的機械強度。離子交換樹脂的化學性質比較穩定，在沒有意外的情況下陰離子交換樹脂的使用可以有很長時間。那麼，離子交換樹脂的工作原理是什麼？
既然是一種陰離子交換樹脂廠家，那麼它的作用環境就是溶液。水溶液中一般還有的是金屬陽離子，這些金屬陽離子可以與材料上的氫離子發生離子交換作用，這樣溶液中的陽離子就會跑到材料上，這樣陽離子就交換完畢。這個過程靠的就是離子交換樹脂的原料的作用。
而陰離子的交換和上面的是一樣的，就是水中的陰離子與材料上的OH-交換，交換到水中的H+與OH-反應生成水，這樣就會使溶液脫鹽。我們生產廠家在多年的生產中，提高了離子交換樹脂 壽命，讓人們從一定程度上節約了成本。離子交換樹脂的定義就是脫鹽，是溶液中的鹽分脫離出來。
陰離子交換樹脂廠家的工作原理是及其簡單的，廠家關鍵是選擇良好的材料才能將這種原理體現出來。如果你需要這種產品，可以到我們廠家進行挑選，保證使用方便，使用時間
一種生產純化的過氧化氫水溶液的方法,包括使含金屬離子雜質的過氧化氫水溶液和H+型陽離子交換樹脂,第二和碳酸根離子(CO32－)型或碳酸氫根離子(HCO3－)型陰離子交換樹脂,第三和H+型陽離子交換樹脂進行接觸另外,一種生產純化的過氧化氫水溶液的方法,包括使含金屬離子雜質的過氧化氫水溶液和H+型陽離子交換樹脂,第二和氟離子(F－)型陰離子交換樹脂,第三和碳酸根離子(CO32－)型或碳酸氫根離子(HCO3－)型陰離子交換樹脂,第四和H+型陽離子交換樹脂接觸。
⑶ 酸鹼度高的水通過樹脂規律能達到城市排放嗎
洗脫先後順序來：Arg Lys Tyr Ala Glu Asp 先分組：1 Arg Lys是鹼性自氨基酸 PH=7 正電荷 2 Tyr ALa是中性氨基酸 PH=7 中性為主 3 Glu Asp是酸性氨基酸 PH=7 酸性由於是交換樹脂層析,氨基酸的與樹脂的親和力主要取決於他們之間的親和力,其次是氨基酸與樹脂之間的疏水相互作用.由於緩沖液先是鹼性,所以氨基酸與樹脂的親和力為：酸性氨基酸》中性氨基酸>鹼性氨基酸（陰離子樹脂的疏水基團帶正電,負電被交換了）,洗脫的順序就是：鹼性 中性 酸性考慮氨基酸與樹脂的疏水作用：Arg的R基團是三個亞甲基+一個亞氨基,Lys是四個亞甲基,很明顯,Arg的疏水作用要弱,與樹脂吸引力不夠強,最先被洗下來.其他的兩組樓主自己分析R基團的疏水性
⑷ 氨基酸顯色方法
1、使用茚三酮試劑，噴後110oC加熱顯出顏色。用茚三酮劑顯色後用硝酸酮試劑噴，斑點由蘭紫色轉成紅色。
2、使用茚三酮+硝酸酮試劑，噴後在電爐上烤至剛剛顯色，顏色在日光燈中逐漸加深，某些氨基酸首先顯出顏色，用筆立刻將色點記下，許多氨基酸賧出特殊的顏色，不同的氨基酸顯出的速度也有差別。
3、使用2—萘醌—4—磺酸試劑（Folin試劑），噴後在室溫乾燥，不同的氨基產生各種顏色。
4．使用氯氣—聯甲苯胺試劑。也可以使氨基酸顯色。
(4)ARG樹脂擴展閱讀；
常用的顯色反應
雙縮脲反應：
該反應是肽鍵常用的反應，即在鹼性銅溶液中， 肽鍵與銅離子形成絡合物，呈紫色(在540nm有最大光吸收峰)。
酚試劑法：
該反應是比色法測定蛋白質的常用方法，即蛋白 質以鹼性銅溶液處理後,加用酚試劑,呈藍色(在650nm有最大光吸收峰)。
考馬斯亮藍法： 即蛋白質與一種蛋白質染料考馬斯亮藍g250反應形成復合物，該復合物在595nm有最大光吸收峰。ms蛋白質遇硝酸也顯色為黃色，不過這樣蛋白質就變性了。
茚三酮反應：除脯氨酸、羥脯氨酸和茚三酮反應生成黃色物質外，所有的α?氨基酸及一切蛋白質都能和茚三酮反應生成藍紫色物質。
還有坂口反應 。在次溴酸鈉或次氯酸鈉存在的條件下，許多含有胍基的化合物 (如胍乙酸、甲胍、胍基丁胺等)能與α-萘酚發生反應生成紅色物質。
⑸ AGR球閥
ARG是新一代工程材料——亞克力共聚合聚氯乙烯樹脂製成的。表示此球閥的材質為ARG，以下是ARG材料的介紹。
AGR是一種亞克力分子與聚氯乙烯樹脂發生化學結合(聚合)的樹脂。 AGR管材和管件的生產原料全部是從日本積水化學工業株式會社進口的潔凈供水管系統專用料。 AGR管道專用料是採用日本積水化學工業株式會社獨家生產的商品號為HIG的AGR樹脂與部分環保衛生的添加劑製成，添加劑的種類和用量對AGR管道專用料和最終產品的性能有非常重要的影響。因為分子的分散均勻、細密，所以可以發揮特殊的性能。
AGR的特長
（1）耐沖擊性能 AGR管亞克力彈性體成分的微粒分布非常均勻，呈「超微粒子分散」狀態，當受到沖擊時，材料分散吸收外部沖擊的應力，能迅速制止碎裂的傳播，因此，防止了由外力沖擊或內部水錘效應所導致的爆喉現象。（2）耐低溫性能 AGR管抗凍結性能高，在承受零下30度的低溫環境下，仍可保證管材非常安全地使用，不會發生爆裂。（3）伸延新能大幅加強 AGR管道系統獨有的卓越的伸延性能，經嚴格伸延測試證明，管道連同部件均能承受橫、直向的高壓重擊，抗震性能優越。（4）清潔衛生，可用於潔凈水，直飲水供水管道 AGR管道內壁非常光滑，不僅僅水流阻力小，更為重要的是與其它塑料管道比，不產生內壁堆積物，不易滋生微生物、細菌；此外，AGR管道氧氣滲透率相當低，僅為PP-R、PE等塑料管道的1/13－15，管路系統內的金屬件會因氧化而腐蝕，進而影響管路壽命和水質，不易透氧也意味著更不易滋生微生物、細菌。（5）管道使用壽命長達50年以上嚴格按照ISO/DIS11673標准規定的實驗方法進行管道內水壓蠕變實驗，實驗結果表明在20度條件下，50年後AGR材料的抗蠕動強度仍高為20.7Mpa，可充分保證其使用壽命在50年以上。（6）耐腐蝕性好 AGR管道對酸鹼有很強的抵抗性能，可以應用於化工、造紙等領域的化工流體輸送管道系統。（7）粘合強度增強3倍 AGR管道系統的AGR專用樹脂粘合度特別強，配合NO.80粘合劑的迅速融接，粘合強度較普通的塑料管高出約3倍。牢固的粘合，有助於預防一般塑料管受壓滲漏的潛在問題。（8）施工安全方便 AGR連接方法非常簡單，只需要粘合劑便可連接，不需要復雜昂貴的施工機械，僅需要簡單的倒角工具、切割器和拉緊器即可。並且，AGR有一套完整的管件系統，無需其它材料的管件來連接。這都在最大程度上保證了AGR管道安裝施工的快捷性與便利性。
⑹ Lys、Arg、Asp、Glu、Tyr和A1a的混合液在高pH時，
這些氨基酸的pI 分別是Arg 10.76，Lys 9.74，Thr 6.53，Ala 6.0，Glu 3.22，Asp 2.97。在高pH值時它們均帶負電荷，與陰離子樹脂發生交換而結內合於容柱上隨著洗脫液的pH逐步降低，首先是Arg的凈電荷變為零而先被洗脫下來，同理可得其他氨基酸的洗脫順序為Lys，Thr，Ala，Glu，Asp。
⑺ 跪求實驗方案急。關於植物小分子多肽的提取分離和分析 最好用到高效液相提取的
多肽類化合物廣泛存在於自然界中，其中對具有一定生物活性的多肽的研究，一直是葯物開發的一個主要方向。生物體內已知的活性多肽主要是從內分泌腺組織器官、分泌細胞和體液中產生或獲得的，生命活動中的細胞分化、神經激素遞質調節、腫瘤病變、免疫調節等均與活性多肽密切相關。隨著現代科技的飛速發展，從天然產物中獲得肽類物質的手段也不斷得到提高。一些新方法、新思路的應用。不斷有新的肽類物質被發現應用於防病治病之中。本文介紹了近幾年肽類物質分離、分析的主要方法研究進展。
1 分離方法
採取何種分離純化方法要由所提取的組織材料、所要提取物質的性質決定。對蛋白質、多肽提取分離常用的方法包括：鹽析法、超濾法、凝膠過濾法、等電點沉澱法、離子交換層析、親和層析、吸附層析、逆流分溶、酶解法等。這些方法常常組合到一起對特定的物質進行分離純化，同時上述這些方法也是蛋白、多肽類物質分析中常用的手段，如層析、叫泳等。
1.1 高效液相色譜（HPLC）
HPLC的出現為肽類物質的分離提供了有利的方法手段，因為蛋白質、多肽的HPLC應用與其它化合物相比，在適宜的色譜條件下不僅可以在短時間內完成分離目的，更重要的是HPLC能在制備規模上生產具有生物活性的多肽。因此在尋找多肽類物質分離制備的最佳條件上，不少學者做了大量的工作。如何保持多肽活性、如何選擇固定相材料、洗脫液種類、如何分析測定都是目前研究的內容。
1．1．1 反相高效液相色譜（RP-HPLC）
結果與保留值之間的關系：利用RP-HPLC分離多肽首先得確定不同結構的多肽在柱上的保留情況。為了獲得一系列的保留系數，Wilce等利用多線性回歸方法對2106種肽的保留性質與結構進行分析，得出了不同氨基酸組成對保留系數影響的關系，其中極性氨基酸殘基在2～20氨基酸組成的肽中，可減少在柱上的保留時間；在10～60氨基酸組成的肽中，非極性氨基酸較多也可減少在柱上的保留時間，而含5～25個氨基酸的小肽中，非極性氨基酸增加可延長在柱上的保留時間。同時有不少文獻報道了肽鏈長度、氨基酸組成、溫度等條件對保留情況的影響，並利用計算機處理分析得到每種多肽的分離提取的最佳條件。
肽圖分析（Peptide Mapping）：肽圖分析是根據蛋白質、多肽的分子量大小以及氨基酸組成特點，使用專一性較強的蛋白水解酶[一般未肽鏈內切酶（endopeptidase）]作用於特殊的肽鏈位點將多肽裂解成小片斷，通過一定的分離檢測手段形成特徵性指紋圖譜，肽圖分析對多肽結構研究合特性鑒別具有重要意義。利用胰蛋白酶能特意性作用於Arg和Lys羧基端的肽鏈的性質，通過RP-HPLC法採用C18柱檢測了重組人生長激素特徵性胰肽圖譜。同時胰島素的肽圖經V8酶專一裂解也製得，並可鑒別僅相差一個氨基酸殘疾的不同種屬來源的胰島素。人類腫瘤壞死因子的單克隆抗體結構也應用酶解法及在線分析技術確定了肽圖，便於鑒定分析。此項技術已經在新葯開發中得到廣泛應用。
1.1.2 疏水作用色譜（Hydrophobic interaction chromatogrphy，HIC）
HIC是利用多肽中含有疏水基因，可與固定相之間產生疏水作用而達到分離分析的目的，其比RP-GPLC具有較少使多肽變性的特點。利用GIC分離生產激素（GH）產品的結構與活性比EP-GPLC分離的要穩定，活性較穩定。Geng等利用HIC柱的低變性特點，將大腸桿菌表達出的經鹽酸胍乙啶變性得到人重組干擾素-γ。通過HIC柱純化、折疊出高生物活性的產品。不同人尿表皮生長因子（EGF）也利用HIC純化到了，均具有良好的生物活性。HIC可將未經離子交換柱的樣品純化。而RP-HPLC則不能達到這一要求。
1.1.3 分子排阻色譜（Sizs-Exclusion chromatogrphy，SEC）
SEC是利用多肽分子大小、形狀差異來分離純化多肽物質，特別對一些較大的聚集態的分子更為方便，如人重組生長激素（hgH）的分離，不同結構、構型的GH在SEC柱上分離行為完全不同，從而可分離不同構型或在氨基酸序列上有微小差異的變異體，利用SEC研究修飾化的PEG的分離方法，此PEC具有半衰期長、作用強的特點。一些分子量較大的肽或蛋白均可利用此法分離分析。
1．1．4離子交換色譜（Iron-Exchange chromatography,IEXC）
IEXC可在中性條件下，利用多肽的帶電性不同分離純化具有生物活性的多肽。其可分為陽離子柱與陰離子柱兩大類，還有一些新型樹脂，如大孔型樹脂、均孔型樹脂、離子交換纖維素、葡聚糖凝膠、瓊脂糖凝膠樹脂等。在多肽類物質的分離分析研究中，對多肽的性質、洗脫劑、洗脫條件的研究較多，不同的多肽分離條件有所不同，特別是洗脫劑的離子強度、鹽濃度等對純化影響較大。Wu等報道利用離子交換柱層析法，探討分離牛碳酸酐異構體和牛血清白蛋白、雞血清白蛋白酶的提取條件，獲得了有價值的數據供今後此類物質分離研究。
1．1．5膜蛋白色譜（Chromatography of Membrane Protein,CMP）
CMP+分離強蔬水性蛋白、多肽混合物的層析系統，一般有去垢劑（如SDS）溶解膜蛋白後形成SDS-融膜蛋白，並由羥基磷灰石為固定相的柱子分離純化。羥基磷灰石柱具有陰離子磷酸基團（P-端），又具有陽離子鈣（C-端），與固定相結合主要決定於膜蛋白的大小、SDS結合量有關。利用原子散射法研究cAMP的分離機制發現，樣品與SDS結合後在離子交換柱上存在SDS分子、帶電荷氨基酸與固定相中帶電離子間的交換，從而達到分級分離的目的。
1．1．6高效置換色譜（High-Performance Displacement Chromatography,HPDC）
HPDC是利用小分子高效置換劑來交換色譜柱上的樣品，從而達到分離的目的。它具有分離組分含量較少成分的特性。利用HPDC鑒定分離了低於總量1%組分的活性人重組生長激素（rHG ）。在研究非毒性交換劑時Jayarama發現硫酸化葡萄糖（Detran Sulfate，DS）是對β乳球蛋白A和B的良好置換劑，一般DS的相對分子質量為1×104和4×104最宜。研究表明置換劑的相對分子質量越低，越易於與固定相結合，因此在分離相對分子質量小的多肽時，需要更小的置換劑才能將其置換純化出來。
1.1.7 灌注層析（Perfusion Chromatography，PC）
PC是一種基於分子篩原理與高速流動的流動相的層析分離方法，固定相孔徑大小及流動相速度直接影響分離效果。試驗證明其在生產、制備過程中具有低投入、高產出的特性。目前市場上可供應的PC固定相種類較多，適合於不同分子量的多肽分離使用。
1.2 親和層析（Affinity Chromatography，AC）
AC是利用連接在固定相基質上的配基與可以和其特異性產生作用的配體之間的特異親和性而分離物質的層析方法。自1968年Cuatrecasas提出親和層析概念以來，在尋找特異親和作用物質上發現了許多組合，如抗原-抗體、酶-催化底物、凝集素-多糖、寡核苷酸與其互補鏈等等。對多肽類物質分離目前主要應用其單抗或生物模擬配基與其親和，這些配基由天然的，也有根據其結構人工合成的。Patel等人利用一系列親和柱分離純化到了組織血漿纖維蛋白酶原激活劑蛋白多肽。
固定金屬親和層析（Immobilized Metal Affinity Chromatography.LMAC）是近年來發展起來的一種親和方法。其固定相基質上鰲合了一些金屬離子，如Cu2+、Ni2+、Fe3+等，此柱可通過配為鍵鰲合側鏈含有Lys、Met、Asp、Arg、Tyr、Glu和His的多肽，特別是肽序列中含有His-X-X-X-His的結構最易結合到金屬離子親和柱上，純化效果較好。其中胰島素樣生長因子（Insylin Like Growth Factor，IGF）、二氫葉還原酶融合蛋白等均用此方法分離到純度較高的產品。
Chaiken等人報道了另一種親和層析方法，利用反義DNA表達產生，其與正鏈DNA表達產生的肽或蛋白具有一定的親和性，如Arg加壓素受體復合物，已用此法分離得到。DNA與蛋白、多肽復合物之間的作用也是生物親和中常用的方法。將人工合成的寡核苷酸結合在固定相基質上，將樣品蛋白或多肽從柱中流過，與之結合可達到分離特定結構多肽的目的。
1.3 毛細管電泳（Capillary electrophoresis，CE）--分離分析方法
CE是在傳統的電泳技術基礎上於本世紀60年代末由Hjerten發明的，其利用小的毛細管代替傳統的大電泳槽，使電泳效率提高了幾十倍。此技術從80年代以來發展迅速，是生物化學分析工作者與生化學家分離、定性多肽與蛋白類物質的有利工具。CE根據應用原理不同可分為以下幾種；毛細管區帶電泳Capillary Zone electrophoresis，CZE）、毛細管等電聚焦電泳（Capillary Isoeletric Focusing，CIEF）毛細管凝膠電泳（CapillaryGelElectrophoresis，CGE）和膠束電動毛細管層析（Micellar Electokinetic Electrophoresis Chromatorgraphy,MECC）等。
1.3.1 毛細管區帶電泳（Capillary Zone Electrophoresis，CZE）
CZE分離多肽類物質主要是依據不同組分中的化合物所帶電性決定，比傳統凝膠電泳更准確。目前存在於CZE分離分析多肽物質的主要問題是天然蛋白或肽易與毛細管硅膠柱上的硅醇發生反應，影響峰形與電泳時間，針對這些問題不少學者做了大量實驗進行改進，如調節電池泳液的PH值，使與硅醇反應的極性基團減少；改進毛細管柱材料的組成，針對多肽性質的不同採取不同的CZE方法研究分離5個含9個氨基酸殘基的小肽，確定了小肽分析的基本條件，即在低PH條件下，緩沖液中含有一定濃度的金屬離子如Zn2+等，此時分離速度快而且准確。
1．3．2細管等電聚電泳（Capillary Isleletric Focusing,CIEF）
由於不同的蛋白、多肽的等電點（PI）不同，因此在具有不同pH梯度的電泳槽中，其可在等電點pH條件下聚集沉澱下來，而與其他肽類分離開來。CIEF在分離、分析混合多肽物質中應用不多，主要應用與不同來源的多肽異構體之間的分離，如對rHG不同異構體分離。由於在CIEF柱表面覆蓋物的不穩定性限制了此法的廣泛應用。
1．3. 3毛細管凝膠電泳 (Capillary Gel Electrophoresis,CGE)
CGE是基於分子篩原理，經十二烷基磺酸鈉（SDS）處理的蛋白或多肽在電泳過程中主要靠分子形狀、分子量不同而分離。目前，又有一種非交聯歡、線性、疏水多聚凝膠柱被用於多肽物質的分離分析，此電泳法適於含疏水側鏈較多的肽分離，這種凝膠易於灌注，使用壽命長，性質較為穩定。
1．3．4膠束電動毛細管層析（Micellar Electrokinetic Electorphoresis Chromatography, MECC）
MECC的原理是在電泳液中加入表面活性劑，如SDS，使一些中性分子帶相同電荷分子得以分離。特別對一些小分子肽，陰離子、陽離子表面活性劑的應用都可使之形成帶有一定電荷的膠束，從而得到很好的分離效果。有文獻報道在電解液中加入環糊精等物質，可使用權含疏水結構組分的多肽選擇性與環糊精的環孔作用，從而利用疏水作用使多肽得到分離。
1．4多肽蛋白質分離工程的系統應用
以上提到的分離多肽的技術在實際應用過程中多相互結合，根據分離多肽性質的不同，採用不同的分離手段。特別是後基因組時代，對於蛋白質組深入的研究，人們對於分離多肽及蛋白質的手段不斷改進，綜合利用了蛋白質和多肽的各種性質，採用包括前面提到的常規蛋白多肽提取方法，同時利用了高效液相色譜，毛細管電泳，2-D電泳等手段分離得到細胞或組織中盡可能多的蛋白多肽。在蛋白質組學研究中系統應用蛋白和多肽分離鑒定的技術在此研究中即是分離手段也是分析方法之一。特別是以下提到的質譜技術的發展，大大的提高了蛋白多肽類物質的分析鑒定的效率。
2 分析方法
2．1 質譜分析（Mass Spectrometry, MS）
MS在蛋白、多肽分析中已經得到了廣泛應用，特別是在分離純化後的在線分析中，MS的高敏性、快速性特別適合多肽物質分析鑒定。其中連續流快原子轟擊質譜（Continuous-Flow Fast Atom Bombardment, cf-FAB）和電霧離子化質譜（Electrospray Ionization, EIS）是近幾年發展起來的新方法。
2．1．1連續流快原子轟擊質譜（Continuous-Flow Fast Atom Bombardment, cf-FAB）
cf-FAB是一種弱離子化技術，可將肽類或小分子量蛋白離子化成MH+或（M-H）形式。主要應用於肽類的分離檢測，其具有中等解析度，精確度大於+0.2amu，流速一般在0.5-1.5μl·Ml-1。在測定使流動相需加0.5%-10%基質如甘油和高有機溶劑成分，使樣品在檢測探針處達到敏感化。cf-FAB常與HPLC、CEZ等方法結合使用達分離分析的目的，許多多肽的cf-FAB分析方法已經建立，並得到很好的應用。如Hideaki等利用此法研究L-Pro、L-Ala的四肽化合物系列。證明L-Pro在保持小肽構相穩定性。連接分子方面具有重要意義。
2.1.2 電霧離子化質譜（Electrospray Ionozation，EIS）
EIS可產生多價離子化的蛋白或多肽，允許相對分子質量達1×105蛋白進行分析，解析度在1500-2000amu。精確度在0.01%左右。EIS更適合相對分子質量大的蛋白質的在線分析，且需要氣化或有機溶劑使樣品敏感化。利用EIS與HPLC聯合分離分析GH和血紅蛋白均獲成功，其也可與CEZ聯合應用。
2.1.3 基質輔助激光解析/離子化-飛行時間質譜（Matrix-associated laser disso-ciation/ionization time of flight mass spectrmtry，MALDI-TOF MS）
MALDI-TOF是目前蛋白質鑒定中精確測定測定分子質量的手段，特別適合對混合蛋白多肽類物質的相對分子質量的測定，靈敏度和解析度均較高。它是目前蛋白質組學研究的必備工具。同時結合液相色譜的聯用技術可以高效率的鑒定多肽物質。特別是當各種原理的質譜技術串聯應用時，不但可以得到多肽的相對分子質量信息，還可以測定它的序列結構，此項技術將在未來蛋白質組學研究中起到決定性作用。
2.2 核磁共振(Nuclear Magnetic resonance，NMR)
NMR因圖譜信號的純數字化、過度的重疊范圍過寬（由於相對分子質量太大）核信號弱等原因，在蛋白、多肽物質的分析中應用一直不多。隨著二維、三維以及四維NMR的應用，分子生物學、計算機處理技術的發展，使NMR逐漸成為此類物質分析的主要方法之一。NMR可用於確定氨基酸序列、定量混合物中的各組分組成含量等分析中。但要應用於蛋白質分析中仍有許多問題需要解決，例如，如何使分子量大的蛋白質有特定的形狀而便於定量與定性分析，如何減少數據處理的時間問題等。這些問題多有不少學者在進行研究。雖然在蛋白質分析中應用較少，NMR在分析分子中含少於30個氨基酸的小肽時是非常有用的，可以克服上述蛋白質分析中的缺點而達到快速准確分析的目的。
2.3 其他
除上述方法之外，氨基酸組成分析、氨基酸序列分析、場解析質譜、IR、UV光譜、CD、圓而色譜、生物鑒定法、放射性同位素標記法及免疫學方法等都已應用於多肽類物質的結果鑒定、分析檢測之中。
以上簡要的介紹了近幾年多肽物質分離、分析的常用方法及最新研究方向。隨著科學技術水平的不斷發展，會有許多更新的分離分析手段不斷涌現，因此這一領域的研究具有廣闊的前景。
應用SDS-PAGE顯示小分子多肽
SDS-PAGE在分離、鑒定和純化蛋白質方面有著廣泛應用，其有效分離范圍取決於聚丙烯醯胺的濃度和交聯度，其孔徑隨著雙丙烯醯胺與丙烯醯胺比率的增加而減小，比率接近於1：20時，孔徑達到最小值。分子量低於10kD的小分子肽類，即使用較高濃度的聚丙烯醯胺凝膠的SDS-PAGE也不能完全分離，或是顯不出色，或是顯帶較弱，帶型彌散。且分子量越小，效果也越差。
為了能在SDS-PAGE上顯示測定小分子量的多肽，通常採取兩種方法：一是增加凝膠的濃度和交聯度，在制膠時加入一些可以降低聚丙烯醯胺凝膠網限孔徑的溶質分子，使用尿素、甘油或蔗糖等物質；二是選擇緩沖液中的拖尾離子的種類和濃度以達到改善多肽的分離效果。
操作步驟
1．電泳緩沖液的配製如下表所示
緩沖液Tris
(mol/L)Tricine
(mol/L)pHSDS
(%)
陽極緩沖液
陰極緩沖液
膠緩沖液0.2
0.1
3.0—
0.1
—8.9*
8.25**
8.4*—
0.1
0.3
* 用HCl調pH
** pH約為8.25
2．丙烯醯胺貯存液的配製
單丙-雙丙混合物單丙的百分數雙丙的百分數
49.5% T, 3%C
49.5% T, 6%C48
46.51.5
3.0
T：丙烯醯胺的總濃度
C：交聯度
3．膠的制備，與一般SDS-PAGE相似，按下表配製分離膠和濃縮膠
組 份分離膠
16% T，6%C濃縮膠
6% T，3%C
49.5% T, 3%C丙烯醯胺溶液（ml）
49.5% T, 6%C 丙烯醯胺溶液（ml）
膠緩沖液（ml）
脲（g）[甘油（ml）]
水（ml）
10%過硫酸銨（μl）
TEMED（μl）
總體積（ml）—
3.3
3.3
3.6[2.4]
1
40
4.0
10.040.48
—
1.00
—
1.50
25
2.5
3.03
4．樣品緩沖液
4% SDS
12%甘油
50mmol/L Tris
2%巰基乙醇
0.01% Serva blue
多肽樣品與樣品緩沖液混合沸煮2min（或40℃溫浴30min）。
5．將灌膠的玻璃板固定在電泳裝置上，用1%瓊脂糖封邊，倒入陰極緩沖液，依次加樣。
6．將電泳裝置放入電泳槽內，倒入陽極緩沖液，將正負極與電泳儀相接，恆電壓50~60V，待指示劑進入分離膠後，電壓可升至70~90V，恆壓約3h待指示劑走出凝膠下緣停止電泳。
7．染色、脫色及膠的保存同SDS-PAGE
⑻ Lys Arg Asp Glu Tyr Ala的混合物在高pH條件下加到陰離子交換樹脂上，用連續遞減pH值緩沖溶液洗脫
洗脫先後順序：Arg Lys Tyr Ala Glu Asp
先分組：1 Arg Lys是鹼性氨基酸 PH=7 正電荷
2 Tyr ALa是中性氨基酸 PH=7 中性為主
3 Glu Asp是酸性氨基酸 PH=7 酸性
由於專是交換屬樹脂層析，氨基酸的與樹脂的親和力主要取決於他們之間的親和力，其次是氨基酸與樹脂之間的疏水相互作用。由於緩沖液先是鹼性，所以氨基酸與樹脂的親和力為：酸性氨基酸》中性氨基酸>鹼性氨基酸（陰離子樹脂的疏水基團帶正電，負電被交換了），洗脫的順序就是：鹼性 中性 酸性
考慮氨基酸與樹脂的疏水作用：Arg的R基團是三個亞甲基+一個亞氨基，Lys是四個亞甲基，很明顯，Arg的疏水作用要弱，與樹脂吸引力不夠強，最先被洗下來。其他的兩組樓主自己分析R基團的疏水性
⑼ 有沒有人分析過利拉魯肽的專利
利拉魯肽的制備方法
有權閱讀公開文獻
申請號：201310201411.2
申請日：2013-05-27
摘要：本發明屬於多肽葯物制備方法技術領域，特別涉及利拉魯肽的制備方法。本發明要解決的技術問題是現有制備方法分離純化困難、產品的總收率和純度低。本發明解決上述技術問題的技術方案是提供一種利拉魯肽的制備方法。該方法包括：採用固相多肽法制利拉魯肽肽樹脂、再酸解得到利拉魯肽粗品、最後純化得利拉魯肽純品。其中固相多肽法的步驟為：氨基樹脂通過固相偶聯合成法依次接入下列序列中對應的保護氨基酸或保護氨基酸片段，制備利拉魯肽肽樹脂：Boc-W(Trt)-X(OtBu)-Thr(tBu)-Phe-Thr(tBu)-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Val-Ser(tBu)-Ser(tBu)-Tyr(tBu)-Leu-X(OtBu)-Gln(Trt)-Ala-Ala-Lys[Y(α-OtBu)]-Glu(OtBu)-Phe-Ile-Ala-Trp(Boc)-Leu-Val-Z(Pbf)-Arg(Pbf)-Gly-樹脂；其中，W為His-Ala，X為Glu-Gly，Y為Nα-PAL-Glu，Z為Arg-Gly。本發明為縮短生產周期、提高產品的純度和收率提供了一種新方法。
申請人：成都聖諾生物制葯有限公司
地址：611330四川省成都市大邑縣工業大道一段258號
發明(設計)人：郭德文曾德志盧昌亮文永均
主分類號：C07K14/605(2006.01)I
分類號：C07K14/605(2006.01)I C07K1/16(2006.01)I C07K1/06(2006.01)I C07K1/04(2006.01)I
⑽ 用洗脫曲線說明ASP和lys的出峰次數並解釋
應該是出峰順序吧，先是Asp再Lys。陽離子交換樹脂，Asp在pH5.3中帶負電被排斥先洗出，Lys帶正電與樹脂交換。