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硝酸纖維素膜是半透膜嗎

發布時間: 2021-02-17 12:22:47

⑴ 中空纖維超濾膜和硝酸纖維素濾膜的區別

硝酸纖維素濾膜是微孔濾膜,過濾精度0.2微米以上,超濾膜都在0.1微米以下

⑵ 硝酸纖維素膜NC膜的應用技巧

從本節開始,我們開始對膜進行深入討論和談一些應用技巧。
1. 蛋白與膜的結合原理
蛋白與膜的結合原理, 已知的結合力包括疏水作用力H鍵靜電作用力等,確切的結合原理並不明確,主要靠假說來支撐。主要有兩種假說:
1)首先兩者靠靜電作用力結合,然後靠H鍵和疏水作用來維持長時間結合。
2)首先兩者靠疏水作用結合,然後靠靜電作用來維持長時間結合。
兩條假說,都表明其結合過程分為兩步,首先結合和後面長時間結合。由於結合原理的不明確性,導致在這方面的工作非常依賴實踐經驗。
2. 膜對結合的影響
1)膜孔徑
有些技術人員傾向使用膜孔徑來區分不同的膜,但是請注意這只僅僅限於同一廠家的產品,如果是不同廠家的產品,這種比較是無意義的。膜孔徑與層析速度的關系,已在上文描述。隨著膜孔徑減小,膜的實際可用表面積遞增,膜結合蛋白的量也遞增. 估量表面積的參數為表面積比率(實際可用表面積與所用膜平面積的比率)。
另外,膜孔徑越小,層析速度也越小,那麼金標復合物通過T線的時間也就越長,反應也就越充分。
綜合以上兩點,結論為膜孔徑越小靈敏度越高。但是同時也減慢了跑板速度,增加了非特異性結合的機會,也就是假陽性越高.所以要按照試驗結果挑選適合實際項目的膜,找到合適的平衡點。
2)不同廠家的膜差異
這個差異主要來源於兩點:
1> 生產膜時,使用的聚合物和表面活性劑的來源,類型,數量不同。同理,在膜處理中這兩類物質一般會對性能產生較大影響。 2> 處理過程不同。
3. 生物原料,緩沖溶液的試劑和配方
1)生物原料, 作為CT線的生物原料使用情況各異,所以這里只做略述。
首先,單克隆抗體與膜的結合優於多克隆抗體,主要時由於多克隆抗體有很多不同的表面位點,而各位點與膜的最佳結合條件都有細微的差別,毫無疑問就增加了優化難度。其次,分子量越大,蛋白越難結合到固相材料上。
2)緩沖液
大家最關心的可能就是希望獲得一個性能優良的配方,包括緩沖液,封閉液等等處理溶液配方。
其實我也無法提供給你一個萬用配方清單。因為不同的反應體系需要不同的配方來支持, 而不同機構的反應體系又有差異。想獲」魚」先學」漁」.。為了不誤導大家,我在下面涉及到配方的問題上,僅提供思路,具體配方請自己摸索。
緩沖液的構成一般是:PBS(或其他緩沖體系)+作用物質(針對某一特定問題)+PH調整. 我在參考過以前的各種資料後,個人意見為配方原則為宜簡不宜繁,根據自己的需要添加作用物質,原來的很多需要添加的作用物質,由於膜製造技術的改進已經不再需要。
推薦的緩沖體系為0.01M PBS PH7-7.2, 該緩沖體系對多種抗原抗體都有良好的適應性。
作用物質的情況大致羅列如下:
少量NACL,減少信號強度,消假陽。
有機醇(甲醇,異丙醇等),潤濕膜,減少膜帶有的靜電,利於結合包被。個人不推薦,因制膜工藝改進。
表面活性劑(TW20,TX100),增加親水力,可避免線條中空現象,也可增色。
糖,保護劑,減緩老化速度,也可以增加親水力同上。
調PH到某個位置,可以消假陽。
4. 點樣環境
環境濕度對點膜過程非常重要。最佳濕度一般在45-65%。濕度過低,膜上容易聚集靜電荷,點膜容易出現散點,導致測試會出現疏水斑。濕度過高,膜上毛細作用加強,點膜容易引起CT線變寬甚至擴散。為了保證點樣時膜濕度的均一性,一般在點樣前把膜放到該濕度條件下平衡一段時間。
5. 點樣儀器與膜面情況的關系
目前有兩種點樣方式,劃膜式和非接觸點膜式.非接觸點膜式優於劃膜式,進口劃膜式優於國產劃膜式。
因劃膜式為軟管將抗體劃到膜表面,而膜本身的物理性質為軟脆,劃管會在其表面留下印痕.進口的劃膜機由於使用的材料和控制系統較好,所以留下的劃痕較輕,而國產儀器較差,留下的劃痕也就比較嚴重。 劃痕容易對層析的金標復合物形成阻力,導致假陽性。 同時容易出現跑板時在T線位置出現若有若無一條細線(鬼線),而跑板結束後鬼線消失的奇怪現象。
6. 膜的寬度與點樣位置
膜的寬度一般有18mm(or 20mm)和25mm兩種, 分別使用在做測試條和做測試板上。然而,不同的T線點樣位置將帶來不同的靈敏度。點樣位置上移,金標復合物通過T線位置時速度變慢,反應時間增加,靈敏度升高。反之靈敏度降低。這個方法可以用來改變靈敏度和消除假陽性。
7. 溶液在膜上的擴散
溶液在膜上的點樣量一般情況下為1ml/cm。溶液在膜上的擴散是趨向兩端的,噴點上去的是均勻的抗體溶液,但當乾燥時線條邊緣的乾燥速度高於中間,中間的抗體會不斷向兩邊擴散,所以乾燥後抗體是向線條的兩端聚集的。一般情況下不影響你的試驗。如果你發現線條出現兩端紅,中間淡的現象,就要考慮這個問題了。可以加如上面說的作用物質來解決。
8. 點膜前後的封閉作用
從供應商處購買回的膜基本上都是已經優化處理好的,直接點膜就可使用.然而我們還是經常會遇到關於封閉的討論。其實封閉不象大家認為的那樣,一封閉什麼問題都解決了. 老問題走了新問題又來了,而且更麻煩,我要說的是慎用封閉。我極其反對點膜前封閉的做法。原因為廠家在生產膜時候,各種配方是混合加入原漿的。而點膜前封閉時要將膜浸泡在封閉液內,必然擾亂了膜內正常的物質分布。由此引發了許多問題,也降低了工作效率。也有廠家遇到不封閉就無法包被上膜的問題,其實可以通過其他辦法來解決,封閉必然是下測。
我經常使用的封閉手法有兩種:流動封閉,將作用物質處理在樣品墊上。膜上定點封閉,將作用物質配成溶液噴點在膜的特定位置上。該方法需要使用BIODOT的AIRJET噴頭,可以將不合格的半成品大板重新復活。只要是將封閉做在了膜上,就必然會對產品的穩定性造成影響,具體的影響程度要通過穩定性測試來評判。
9. 膜的儲存
剛生產出的膜一般含有5-10%的水分。關於膜的老化機理,有個理論支持,不過爭議比較大。理論認為:膜的老化是因為膜上的水分蒸發,使膜變得疏水,帶電荷並變脆。儲存膜一般要求是避光,密封,過干或過濕都不利。在這種保存條件下,一般可以放置兩年。但是如果膜上做了封閉處理,就要根據具體試驗情況來判斷了。有些膜由於生產工藝的問題,使用後靈敏度會在一段時間內發生變化,遇到這種問題,就需要在點膜後放置一段時間,待穩定後方可進入調試生產。
硝酸纖維素膜NC膜
規格: 15X20cm
孔徑: 0.45μm
保存: 5-15℃密封保存,保質期一年
產品簡介: 本品外觀潔白,膜正面呈光澤,與水接觸應立即浸潤,不能立即浸潤老者視為失活,不能點樣,膜面有花斑或有粉性結構皆視為次品。用於轉移電泳,宜選孔經0.22或0.45,以保證膜的強度,並減少穿透損失,硝纖膜過份乾燥時脆,濕時有彈性,操作時室內應保持中常溫度,避免過份乾燥,防止發脆,本品靜電吸附膜的親水性好,滲濾時間適中,蛋白吸附力強,轉膜的蛋白集中而不擴散,顯色的靈敏度和特異性高,背景低。

⑶ 硝酸纖維素膜的概念

在膠體金試紙中用做C/T線的承載體,同時也是 免疫反應 的發生處。NC膜是生物學試驗中最重版要的耗材之一。
硝酸纖維素膜又稱為NC膜,,在膠體金試紙中用做C/T線的承載體,同時也是免權疫反應的發生處,所以NC膜成為該試驗中最重要的耗材,而由於其屬於非標准器件,基本上每個項目開始階段都會遇到如何選擇合適的NC膜的問題。同時也存在是否要對NC膜進行後期處理及如何處理的討論。

⑷ 硝酸纖維素膜的分類及來源、作用

硝基化的纖維素微孔薄膜。對核酸或蛋白質有很強的結合力,常用於印跡分析

⑸ 硝酸纖維素膜NC膜的生產原理

通過以上步驟生產出來的膜是呈一個寬度極大的產品,寬度的大小直接和滾筒的大小相關回,滾筒越答大生產越方便,但設備的成本也越高.寬膜要經過切割才能成為我們購買到的25mm或18mm(或20mm)寬的膜,而長度上,成品卷膜和寬膜的長度是相同的.理論上可以讓廠家切成你需要的任意寬度,但這樣會造成原料的浪費和人力成本的增加,後來廠商在和試紙生產廠家的協調過程中,綜合用料成本和生產便利性基本確定了上面說的寬度,以此為標准。
從生產過程,我們可以得知,NC膜本身已經添加了表面活性劑來改善親水能力,而且已經存在有一定的緩沖系統(雖然對紙條測試影響不會很大)。

⑹ 醋酸纖維素膜和硝酸纖維素膜,尼龍膜的區別是什麼

醋酸纖維素濾膜對過濾物質如葯物的吸附量最低,與混合纖維素酯微孔濾膜、尼龍內膜、PVDF膜相比,醋酸容纖維素濾膜是吸附量最低的過濾膜。
硝酸纖維素膜又稱為NC膜, 在膠體金試紙中用做C/T線的承載體,同時也是免疫反應的發生處。所以NC膜成為該試驗中最重要的耗材。

⑺ 什麼是半透膜


半透膜

透膜是一種只讓某些分子和離子擴散進出的薄膜,一般來說,半透膜只允許離子和小分子物質通過,而生物大分子物質不能自由通過半透膜,原因是半透膜的孔隙的大小比離子和小分子大,但比生物大分子例如蛋白質、澱粉等小,如羊皮紙、玻璃紙等都屬於半透膜。

半透膜一般只允透過溶劑或溶劑和小分子溶質而不允許過大分子溶質。如玻璃紙只允許水透過蔗糖溶液中,而蔗糖分子不能透過;動物的膀胱允許水透過,而不允許酒精分子過;灼熱的鈀或鉑允許氫透過,而氬分子不能透過。半透膜可用多種高分子材料製成,用以分離不同分子量的物質,定滲透壓和氣體分壓等。半透膜主要應於膜分離技術中的反滲透和超濾。應用反滲透過程時稱為反滲透膜,它是具有水性基團的薄膜,膜不僅具有篩濾作還有對水分子的優先吸附作用。常於反滲透的膜有醋酸纖維素膜、芳香聚胺膜、聚苯並咪唑膜等。半透膜可以制板狀、管狀和中空纖維狀,也應用於擴滲析。膜的表皮層微孔孔徑為0.6~0.9nm,臨界孔徑為1.3nm。孔徑較大的半透膜應用於超過濾,稱為超過濾膜,它在0.07~0.7MPa(0.7~7kgf/cm2)壓力下工作,用於分離直徑10nm以內的分子和微粒,其透過性能屬篩分原理。在污水處理中用到的膜過程有電滲析、反滲透和超濾,其所用的均為半透膜。半透膜應用在工業廢水治理,有的已有生產規模,有的還在實驗室研究階段。

詳見 網路

⑻ 硝酸纖維素膜的作用

硝酸纖維素膜又稱為NC膜, 在膠體金試紙中用做C/T線的承載體,同時也是免疫反應的發生處.

⑼ 硝酸纖維素膜的生產原理

這個雖然看上去屬於生產廠商的事情,但是GMP有個觀點是強調對過程的控制才會有好的結果.那麼只有了解NC膜的大致生產過程和基本原理才能更好的掌握這種材料的特性,最終製作出滿意的試紙.你了解嗎?
NC膜的過程和普通的造紙過程是非常類似的,我們可以借鑒對造紙的認識來理解.
首先,勻漿配比
購買回的原料硝酸纖維素粒子是一種非常普遍的有機化學物,溶解形成混漿,在該漿體內,會加入一定比例的試劑來調整最後形成的膜的性質,一般是一個試劑配方,主要包含表面活性劑/高分子聚合物/鹽離子/成型劑等溶解在一個緩沖體系內. 不同的廠家加入的溶液配方不一樣,直接導致了在產品的差異.
其次,滾筒鋪膜
配好的勻漿通過滾筒,形成了一張薄膜,平攤在十分光滑的平面載體上.這個和造紙的過程是非常相似的.
最後,成型
在勻漿內的成型劑開始揮發,膜逐步乾燥成型.同時在這個過程中由於溫度比較高,有些廠家在這個過程採取了在密閉腔體內成型,同時補充配方溶液的形式,來避免一些有效成分的蒸發.
切割出產品
通過以上步驟生產出來的膜是呈一個寬度極大的產品,寬度的大小直接和滾筒的大小相關,滾筒越大生產越方便,但設備的成本也越高.寬膜要經過切割才能成為我們購買到的25mm或18mm(或20mm)寬,而長度上,成品卷膜和寬膜的長度是相同的.理論上可以讓廠家切成你需要的任意寬度,但這樣會造成原料的浪費和人力成本的增加,後來廠商在和試紙生產廠家的協調過程中,綜合用料成本和生產便利性基本確定了上面說的寬度,以次為標准.關於不同寬度的用途差異,稍後詳述.
從生產的過程,我們可以得知, NC膜本身是已經添加了表面活性劑來改善親水能力,而且已經存在有一定的緩沖系統(雖然對紙條測試影響不會很大).對後面談到的一些問題就比較容易理解.

⑽ Western 硝酸纖維素膜有正反面嗎如何判斷

轉發了一個很全的回復:

  1. 國外的硝酸纖維素膜一般正反面不明顯,均比較光專滑,不易區分屬

  2. 國產的硝酸纖維素膜可以看出一面光潔一點,一面毛燥一點。

  3. 轉膜時無正反面之分,根據有些人的經驗,毛燥的一面有時對蛋白的吸附能力更強一點,蛋白載量更大一點。

  4. 硝酸纖維素膜轉膜之前大多的正規操作方法是使用前要泡一下甲醇,以活化表面的基團,但個人經驗是,可以不用泡,有些硝酸纖維素膜很易在甲醇中被消化掉,如果泡的話應該是浸一下就取出,或者在轉膜緩沖液中多泡一會。

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