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1. 電泳分離四種核苷酸時，通常將緩沖液調到什麼ph
① 電泳分離4種核苷酸時應取pH3.5 的緩沖液，在該pH時，這4種單核苷酸之間所帶版負電荷差異較大，它權們都向正極移動，但移動的速度不同，依次為：UMP>GMP>AMP>CMP；
② 應取pH8.0，這樣可使核苷酸帶較多負電荷，利於吸附於陰離子交換樹脂柱。雖然pH 11.4時核苷酸帶有更多的負電荷，但pH過高對分離不利。
③ 當不考慮樹脂的非極性吸附時，根據核苷酸負電荷的多少來決定洗脫速度，則洗脫順序為CMP>AMP> GMP > UMP，但實際上核苷酸和聚苯乙烯陰離子交換樹脂之間存在著非極性吸附，嘌呤鹼基的非極性吸附是嘧啶鹼基的3倍。靜電吸附與非極性吸附共同作用的結果使洗脫順序為：CMP> AMP > UMP >GMP。
2. Lys Arg Asp Glu Tyr Ala的混合物在高pH條件下加到陰離子交換樹脂上，用連續遞減pH值緩沖溶液洗脫
洗脫先後順序：Arg Lys Tyr Ala Glu Asp
先分組：1 Arg Lys是鹼性氨基酸 PH=7 正電荷
2 Tyr ALa是中性氨基酸 PH=7 中性為主
3 Glu Asp是酸性氨基酸 PH=7 酸性
由於專是交換屬樹脂層析，氨基酸的與樹脂的親和力主要取決於他們之間的親和力，其次是氨基酸與樹脂之間的疏水相互作用。由於緩沖液先是鹼性，所以氨基酸與樹脂的親和力為：酸性氨基酸》中性氨基酸>鹼性氨基酸（陰離子樹脂的疏水基團帶正電，負電被交換了），洗脫的順序就是：鹼性 中性 酸性
考慮氨基酸與樹脂的疏水作用：Arg的R基團是三個亞甲基+一個亞氨基，Lys是四個亞甲基，很明顯，Arg的疏水作用要弱，與樹脂吸引力不夠強，最先被洗下來。其他的兩組樓主自己分析R基團的疏水性
3. 在溶菌酶的粗提取實驗中,為什麼將蛋清緩沖液PH調到4.7後又調到8.0
因為卵清蛋白的等電點是4.7，為了提純溶菌酶，要將卵清蛋白沉澱，所以要把PH調到4.7，至於8.0，這是溶菌酶的最適PH值。
提取溶菌酶的方法：
樹脂預處理：干樹脂清水浸泡，使其充分膨脹並除去細小顆粒和較大雜質； 1 mol/L 的HCl浸泡2 h，去離子水洗3次至至近中性；抽濾收集樹脂,1 mol/L 的NaOH溶液浸泡2 h，去離子水洗3次至近中性；抽濾收集樹脂,加0.15 mol/L、pH 值為6．5的磷酸緩沖液平衡過夜待用。
蛋清制備：將3個新鮮雞蛋洗凈乾燥，小端敲一個小洞，大端打一個小孔進氣，分離得雞蛋清，用1 mol/L HCl調節PH到7。過濾前稱量燒杯重48.7g，緩慢攪拌用滅菌的兩層紗布過濾除去臍帶塊和碎蛋殼等，蛋清與燒杯總重207.5g，蛋清凈重158.8g。用1 mol/L 的HCl 溶液調pH 值至7.0，量蛋清體積為100 ml。在調節PH時蛋清中出現少量白色沉澱，可能為部分蛋白由於局部過酸而變性。
吸附：蛋清在不斷攪拌下加入抽濾好的724樹脂25g（相當蛋清四分之一體積的樹脂），冰水浴中磁力攪拌器緩慢攪拌（使樹脂全部懸浮在雞蛋清中，攪拌不能起泡）吸附2.5 h，4℃靜置1.5h。然後3000r/min離心15min分層，收集樹脂，回收蛋清（留樣A）。
去除雜蛋白：收集樹脂用去離子水振盪水洗直至洗液澄清（至無白沫為止），吸管輕吸去洗液，以去除雜蛋白。（每洗1次，離心1次，總共3次）冰浴中用等體積的0.15mol/L、pH =6.5的磷酸緩沖液攪拌洗滌15min，抽濾，重復洗三次，注意防止樹脂流失。最後一次抽濾濾除樹脂水分至乾燥。
洗脫溶菌酶：樹脂中加入35ml（等體積）的10％（NH4）2SO4溶液攪拌洗脫30 min，抽濾,使溶菌酶從樹脂上洗脫下來，重復兩次，合並收集洗脫液（留樣），洗脫液過濾後，准確量取體積100ml。（留樣B）
鹽析:每83mL洗脫液加32g磨細的固體（NH4）2SO4，本實驗中總量為38.55g。緩慢加入（NH4）2SO4攪拌待完全溶解後保鮮膜封口，置於4℃冰箱鹽析過夜。
透析:待白色沉澱析出，3000r/min離心15 min，收集沉澱，用去離子水將沉澱洗下並全部溶解（4.5ml去離子水），裝於透析袋中，於去離子水中透析（冰浴），期間2次更換去離子水，直至用BaCl2檢測透析完全。透析裝置中加入磁子，於磁力攪拌器中攪拌加快透析速度。
去雜質蛋白：取出透析袋中的透析液，用0.1mol/L HCl調整pH4.6，產生少量白色沉澱（留樣D），可能為雜蛋白。3000r/min離心10min，收集上清液（留樣C 20ul）。
濃縮：用PEG-20000濃縮上清液至1.5ml（留樣E，20ul，加loading buffer,出現黃色（可能為濃縮時透析袋中滲入了PEG-20000）。[5][6]
4. 樹脂預處理時，用有機溶劑、酸鹼洗完後，用磷酸鹽緩沖液平衡時為什麼要進行抽濾，有什麼用
抽慮是為了提高平衡效率，不抽率，多用緩沖溶液清洗幾次，我認為也是可以的，關註：分離材料網
5. 求高人指點，環氧樹脂的固化劑哪種韌性最好，低溫固化時間1～12小時之內，聚醯胺試過了，因為顏色是暗
你好抄，首先固化劑不決定韌性，不管襲你是酸酐還是胺基都一樣，要韌性是要在你的環氧樹脂里改性而不是在固化劑里，你的意思就是不要那麼脆對吧，加5個點的DBP試試只要不冒油就行，或者稀釋劑里加5-10個點的丙二醇碳酸酯成膜都可以變得不易碎。希望能對你有所幫助，另外不是所有固化劑和環氧樹脂都通用，酸酐不能和胺基及其他混用，反應原理完全不同。低溫固化的種類能選的比較少，要不你就是減少固化劑的量導致不完全交聯，形成半凝膠的部份殘留環氧樹脂可以提供一定的緩沖韌性。
6. 如用陽離子交換樹脂分離M,K和D三種氨基酸的混合液,用pH5.5的緩沖液洗脫時,洗脫下來的順序是
陽離子交換樹脂可以吸附陽離子氨基酸在PH5.5的條件下，D帶負電荷最多最早被洗脫，K帶正電荷最多最晚被洗脫
7. 0.12 M KCl，5 mM 組氨酸緩沖溶液 (pH 6.8)溶液的配製方法謝謝！
這不能配緩沖溶液，緩沖溶液需要共軛酸鹼對，僅限弱酸或弱鹼，互相抑制對方電離所以才具有緩沖性
8. 用732#陽離子樹脂處理水時，氨-氯化銨緩沖溶液的配製
你說的這種軟化水的方法，是比較簡單的，只要認真負責，一點也不難學。
陽離子樹脂回作水的軟化答處理，在軟化罐中進行，簡單的化學反應方程式是這樣的：
NaR + Ca+2 ---- Na+1 + CaR (方程式未平衡，+1 +2表示化合價）
當樹脂中的鈉離子被水中的鈣鎂離子置換，降低了水的硬度，同時樹脂的軟化能力降低，到一定程度，就停止使用交換器，用一定濃度的食鹽水，將樹脂再生還原。
CaR + Na+1 --- NaR + Ca+2
用水將置換出來的鈣離子沖洗，陽離子樹脂又恢復了軟化水的能力。
問題中的氨——氯化銨緩沖液，不是直接用於軟化水處理的，而是測定鈣鎂離子的化驗試劑，配製極其簡單安全，按照說明配製即可。
9. 利用陽離子交換層析分離下列每一對氨基酸，哪一種氨基酸首先被PH7緩沖液從離子交換柱上洗脫出來。
氨基酸與粒子交復換樹脂的制吸附力大小取決於它們之間的電荷引力和疏水作用。第一組中甘氨酸和亮氨酸均為非極性氨基酸，但是相比之下甘氨酸的極性要更強，也就是疏水性更弱，它會先被洗脫。第二組中，絲氨酸是中性條件下不帶電荷的極性氨基酸，丙氨酸是非極性氨基酸，所以絲氨酸疏水性差，先被洗脫。
