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蛋白超濾膜濃縮法裝置

發布時間: 2021-03-01 23:10:15

㈠ 高濃度蛋白過濾用什麼材質的濾膜好

超濾膜比較適合分離和濃縮大分子蛋白質

㈡ 常有的蛋白濃縮方法有哪些

蛋白濃縮方法基本有: 丙酮沉澱法;免疫沉澱法;三氯醋酸沉澱法;硫酸銨沉澱法;(低溫)有機溶劑沉澱法;聚乙二醇沉澱法;超濾法;透析法;離子交換層析和冷凍乾燥法…… 1.丙酮沉澱法;三氯醋酸沉澱法 試驗要求的儀器簡單,但是常常導致蛋白質變性。 2.免疫沉澱法:得有特異性抗體! 3.硫酸銨沉澱法:利用高濃度鹽將蛋白質析出(鹽析),選擇硫酸按是因為:鹽析有效性,pH范圍廣,溶解度高,溶液散熱少,經濟! 4.(低溫)有機溶劑沉澱法:強調低溫(0-4度以下)是因為10度時蛋白會在有機溶劑中變性,可用乙醇,丙酮……注意:Mg2+離子,pH值 5.聚乙二醇沉澱法:使用PEG時旨在個別情況下才會是蛋白質稍有變性!他溶解是散熱低,形成沉澱的平衡時間短,通常達到30%時蛋白質就會達到最大量的沉澱! 6.超濾法:主要針對小體積蛋白質溶液(幾ml)此法更不易引起變性!不過得有濃縮器,不是哪個實驗室都有的! 7.透析法:主要用於更換蛋白質的緩沖液!的有透析袋!不需要特殊的儀器! 8.離子交換層析:可用陰離子交換樹脂進行濃縮! 9.冷凍乾燥法:在冷凍狀態下讓揚品種的液體升華 參考網址on http://www.bio1000.com/experiment/biochemical/351804.html

㈢ 如何用蛋白濃縮管

選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。

通常應截留分版子量權不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。

新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。

(3)蛋白超濾膜濃縮法裝置擴展閱讀:

超濾濃縮離心管,最新推出專利產品Hydrosart膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。

備有四種材質的超濾膜:聚醚碸、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取並回收,又可將離心管放入離心機反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使濃縮液達到近乎完全回收;

㈣ 蛋白用超濾管濃縮容易沉澱怎麼辦

可能是這個蛋白的水溶性較差,也就是只能保持在一定濃度不能太高
另外就內和這個蛋白容的穩定性有關了,超濾時保持低溫,體積縮小一點後就把濾液混勻避免局部濃度過高,選擇更合適的緩沖液,添加一點甘油等小分子物質等都可以增加蛋白的穩定性。

㈤ 膜濃縮是什麼概念具體怎麼操作法

膜濃縮是一種改革傳統工藝實現高效純化濃縮的技術。它利用有效成分與液體的分子量的不同實現定向的分離,達到濃縮的作用。相對於傳統的加熱濃縮,具有能耗低,常溫下進行,對產品影響小等優點,已經在以下進行應用:
1. 蛋白和酶的純化濃縮
超濾已成為蛋白和酶等純化和濃縮的高效過程。超濾濃縮的優點是無相變,一般不需加熱,工序簡化,適用pH范圍寬和防止失活等,很適於熱敏性物質的分離濃縮。通常是預處理的粗製品經超濾,使一些低分子物和鹽透過膜,使酶和蛋白獲得濃縮和精製。選用不同截留分子量的膜,不同的膜材質和工藝可實現不同酶和蛋白的純化濃縮。
2. 染料等的純化濃縮
納濾已在分子量200~2000物料的純化和濃縮方面獲得廣泛應用,如染料、抗生素、多肽和氨基酸等。一般的工藝是先經滲濾恆容除鹽,再脫水濃縮,據產品最終要求的純度和濃度,確定恆容除鹽的程度和脫水濃縮的倍數。實踐證明以納濾,可代替沉澱,pH調節和(部分)蒸發等過程,達到產品純化和濃縮的目的,這也是一新的高效節能過程。
3. 果汁、茶汁和醫葯制劑等的澄清和濃縮
果汁濃縮利於運輸和存放,低檔茶葉加工成速溶茶,既解決了低檔茶出路,又提高了效益。在果汁濃縮中,通常先用UF對果汁進行澄清(預處理),之後用反滲透法濃縮,一般可濃縮到20°BX以上。在茶汁濃縮中,經預處理的茶汁,通過反滲透濃縮到含固量15~20%,之後冷凍貯存或噴霧乾燥。膜技術在這一領域中的應用正在開拓,特別引人注目的應是醫葯(中草葯)制劑的澄清和濃縮,MF(UF)+NF(RO)是最常用的工藝。

㈥ 常用的濃縮蛋白樣品的方法有哪些

1、沉澱法(蛋白質的沉澱性質)
2、吸附法(吸水劑)
3、凍干法(真空低溫脫水)
4、超濾法(分子量)

㈦ 蛋白在超濾管濃縮過程中出現沉澱怎麼辦

1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。
通常應截留分子量不應專大於目的蛋屬白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。
若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同,表格中有。

2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。

3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。

注意,一定要等離心機達到目的轉速之後,方可離開
離心機,否則離心機出問題時,無法第一時間處理,後果不可預測!膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。

㈧ 超濾離心管濃縮蛋白會損失嗎

會有少量損失。取決於緩沖液,濾網的網眼大小和蛋白質的分子量

㈨ 選擇分離60KDa 的蛋白選擇什麼種類的超濾膜想讓蛋白留在濃縮液里

那就是濃縮,如果要提高回收率用10K的超濾膜

㈩ 同一個超濾濃縮管可以用來純化不同的蛋白嗎

不可以的
不管是哪個公司生產超濾濃縮管使用後都會有蛋白殘留在濾膜上,而不管是使用氯版化鈉或者氫氧權化鈉清洗都不能確保可以完全清理掉殘留在膜上的蛋白。
如果不同的蛋白間混合使用,可能前一個蛋白會污染到後一個蛋白,甚至有些某些高活性的酶殘留在上面會造成後一個蛋白被酶切降解,造成不必要的損失。

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