水和廢水志賀菌檢測

㈠ 游泳池水，廢水和生活飲用水中大腸菌群檢測有何異同

游泳池水中大腸菌群檢驗方法：
一、大腸菌群多管發酵法測定
1定義
大腸菌群（coliform bacteria）系指一群在36±1℃培養24h能發酵乳糖、產酸產氣的需氧和兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。
2 儀器
見《公共場茶具的大腸菌群測定方法》。
3培養基和試劑
3.1乳糖蛋白腖培養液
3.1.1成分：蛋白腖 10g，牛肉膏 2g，乳糖 5g，氯化鈉 5g，1.6%（V/V）溴甲酚紫乙醇溶液 1mL，蒸餾水 1000mL
三.倍濃縮乳糖蛋白腖培養液按上述乳糖蛋白腖培養液濃縮三倍配製。
3.1.2配法：將蛋白腖、牛肉膏、乳糖及氯化鈉置於1000ml蒸餾水中加熱溶解，調pH到]7.2～7.4。再加入1ml 1.6%溴甲酚指示劑，充分混勻，分裝到含有倒管的試管中，115℃高壓滅菌15min。
3.2伊紅美蘭瓊脂
見《公共場所茶具的大腸菌群測定方法》。
3.3革蘭氏染色液
風《公共場所茶具的大腸菌群測定方法》。
3.4染色法
見《公共場所茶具的大腸菌群測定方法》。
4推測性試驗
4.1在2個裝有50ml三倍濃縮乳糖膽鹽培養液的大試管或燒杯內各加入水樣100ml。
4.2在10支裝有5ml三倍濃縮乳糖膽鹽培養液的試管里各加入水樣10ml。
4.3輕搖試管，使液體充分混勻，置36±1℃培養箱中，培養24h。
4.4觀察每管是否產氣，如不產氣則報告為大腸菌群陰性；若有氣體產生則為推測性試驗陽性，需做進一步的證實試驗。
5證實試驗
5.1平板分離
自推測性檢驗陽性管中取一接種環培養液，接種到伊紅美藍瓊脂平板上，置36±1℃培養箱培養18～24h，觀察菌落形態，典型的大腸菌群菌落為黑紫色或紅紫色，具有金屬光澤。
5.2復發酵試驗
挑取可疑大腸菌群菌落1或2個進行革蘭氏染色，同時接種乳糖發酵管，於36±1℃培養箱中，培養24h。
5.3凡乳糖發酵管最終產酸產氣，革蘭氏染色為陰性的最大可能數（MPN）檢索表得出1000ml水樣中總大腸菌群的MPN值。

㈡ 美國apha《水和廢水檢驗標准方法》2005版怎麼引用

APHA, 2005. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater
(Washington, DC, USA).

㈢ 水和廢水監測分析方法

不懂你想問什麼，你看的是文獻還是標准還是課本什麼的，原文是怎樣的說的，拍照上來看看

㈣ 如何檢驗環境水中的微生物

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水質微生物

一、水質微生物及指示菌

在各種水體，特別是污染水體中存在有大量的有機物質，適於各種微生物的生長，因此水體是僅次於土壤的第二種微生物天然培養基。水體中的微生物主要來源於土壤，以及人類的動物的排泄物及污染。水體中微生物的數量和種類受各種環境條件的制約。

一般認為，水中微生物以革蘭氏陰性桿菌佔有較大優勢。與其他水體相比，河水及溪水中革蘭氏陽性菌相對較多，這是因為陸地微生物沖洗污染的緣故。

水體中的致病性微生物一般並不是水中原有微生物，大部分是從外界環境污染而來，特別是人和其它溫血動物的糞便污染。水中常見的致病性細菌主要包括：志賀氏菌、沙門氏菌、大腸桿菌、小腸結炎耶爾森氏菌、霍亂弧菌、副溶血性弧菌等。

在實際控制中，對水質衛生質量的評價和控制，是無法對各種可能存在的致病微生物一一進行檢測，而一般利用對指示菌的檢測和控制，來了解水體是否受到過人畜糞便的污染，是否有腸道病原微生物存在的可能，從而評價水的質量，以保證水質的衛生安全。

目前，世界各國一般認為大腸菌群是指示水質受糞便污染較好的指示菌。

我國水質控制也採用大腸菌群作為指示菌，GB5749-85《中華人民共和國國家標准 生活飲用水衛生標准》規定，生活飲用水中大腸菌群每升不得超過3個。

在某些情況下，水體中的細菌總數也可指示水體受糞便等污染物污染的情況。這里的細菌總數其實是指營養瓊脂培養後形成的菌落總數。目前世界各國對於控制飲用水的衛生質量，除採用大腸菌群等指標外，一般還採用細菌總數這個指標。我國GB5749-85《中華人民共和國國家標准 生活飲用水衛生標准》中規定生活飲用水細菌總數每毫升不得超過100個。

二、水質微生物檢驗方法

GB5750-85《中華人民共和國國家標准 生活飲用水標准檢驗法》提供了水質中細菌總數和總大腸菌群的檢測方法。

（一）細菌總數的檢測：

國家標准中，細菌總數是指1ml水樣在營養瓊脂培養基中，於37℃經24h培養後，所生長的細菌菌落的總數。

對生活飲用水，直接吸取1ml水樣於平皿中，加入營養瓊脂後混勻，37℃培養24h，進行計數。

對水源水，根據情況對樣品進行10倍梯度稀釋，選擇適宜稀釋液1ml，加註平皿，營養瓊脂混勻，37℃培養24h，進行計數。

按照規定格式報告每毫升水中細菌總數。

（二）總大腸菌群的檢測：

國家標准中，利用總大腸菌群作為糞便污染的指標。總大腸菌群是指一群需氧及兼性厭氧的，37℃生長時能使乳糖發酵，在24h內產酸產氣的革蘭氏陰性無芽胞桿菌。水樣中總大腸菌群數的含量，表明水被糞便污染的程度，而且間接地表明有腸道致病菌存在的可能。

國家標准提供了多管發酵法及濾膜法檢測總大腸菌群的方法。

多管發酵法檢測總大腸菌群，分為三步：初發酵試驗，平板分離，復發酵證實試驗。初發酵試驗，採用乳糖蛋白腖培養液37℃培養24h，觀察產酸產氣情況。對陽性管培養物，接種於品紅亞硫酸鈉培養基或伊紅美藍培養基，觀察菌落特徵，並進行革蘭氏染色和鏡檢。對典型和可疑菌落，接種於乳糖蛋白腖培養液，進行復發酵證實試驗，並根據標准所附檢數表報告結果。

其中，對生活飲用水，初發酵試驗接種水樣總量300ml，即100ml接種2管，10ml接種10管，採用兩個稀釋度，12支發酵管。對水源水，初發酵試驗接種水樣總量55.5ml，即10ml接種5管，1ml接種5管，0.1ml接種10管，共採用三個稀釋度，15支發酵管。兩種接種方法，所用的檢數表是不同的。

濾膜法檢測總大腸菌群，就是利用微孔濾膜，過濾一定量水樣，將水樣中含有的細菌截留在濾膜上，然後將濾膜帖放在選擇性培養基上（如品紅亞硫酸鈉培養基），經培養和證實試驗後，直接計數濾膜上生長的典型大腸菌群菌落，並計算出每升水樣中含有的總大腸菌群數。

三、說明：

1．菌落總數測定中，應選擇合適的稀釋度進行。生活飲用水，國家標准規定每毫升不得超過100個，因此可以直接吸取1毫升到平板進行培養。

2．培養時間。與食品中菌落計數不同，測定水中細菌總數，培養時間採用24h。

3．總大腸菌群的測定方法，由於飲用水和水源水可能的污染程度不同，因此採用不同的接種量，檢數表也不相同。

4．當接種量超過1毫升時，一般採用多倍濃度培養液。如配製3倍濃縮乳糖蛋白腖培養液50mL，加入100mL水樣後，總體積為150mL，培養液恢復到正常濃度。

5．濾膜法檢測總大腸菌群，一般在檢測較大量低濁度水樣時採用，大量水樣濾過濾膜後，水中所含有的所有細菌均截留在濾膜上。

㈤ 水和廢水監測分析方法裡面有介紹揮發性脂肪酸的測定嗎

水和廢水監測分析方法裡面有介紹揮發性脂肪酸的測定
①若用洗氣裝置除雜，專一般除雜在前，乾燥在後。屬原因：從溶液中出來的氣體通常混有水蒸氣，乾燥在後可將水蒸氣完全除去。如除去CO中混有的CO2和水蒸氣，應將氣體先通過。NaOH溶液，再通過濃H2SO4。
②若用加熱裝置除雜，一般是乾燥在前，除雜在後。如除去CO2中混有的CO和水蒸氣，應將氣體先通過濃H2SO4，再通過灼熱的CuO。
(2)除去多種雜質氣體的順序一般是先除去酸性較強的氣體。如N2中混有 HCl、H2O(氣)、O2時，應先除去HCl，再除去水，最後除去O2(用灼熱的銅網)。
(3)檢驗多種氣體的先後順序(一般先驗水蒸氣)：有多種氣體需要檢驗時，應盡量避免前步檢驗對後步檢驗的干擾。如被檢驗的氣體中含有CO2和水蒸氣時，應先通過無水CuSO4。檢驗水蒸氣，再通過澄清的石灰水檢驗CO2.

㈥ 志賀氏菌最簡單的檢驗方法和收集方法100分!

4 志賀氏菌屬細菌的形態與一般腸道桿菌無明顯區別，為革蘭氏陰性桿菌，長約2-3μ m ,寬0.5-0.7μ m 。不形成芽胞，無莢膜，無鞭毛，有菌毛。DNA的G+C為49-53克分子%（Tm法）。
1 增菌培養：

宋內氏志賀氏菌的增菌培養；以無菌的手續稱取樣品25g放入事先加有0.5μg/mL新生黴素的250mL志賀氏菌肉湯中，將此混懸液於室溫中靜置10min並時時振搖之。將浸液傾入滅菌的500mL錐形瓶中，調整pH，必要時用1N NaOH或1NHCL調至pH7.2±0.2，再將此錐形瓶置於加有新鮮催化劑的厭氧缸中，放入 GasPak並加水使之活化。因此厭氧罐內部溫度較高，每次用後皆應將催化劑加熱。將厭氧罐置於44.0℃水浴中培養20h，振搖混懸液後劃線接種於麥康凱氏瓊脂平板。於35℃培養20h。

對其他志賀氏菌的增菌培養亦按上述方法進行。但加入新生黴素量為3μg/mL，並在厭氧環境下置42.0℃水浴培養。

志賀氏菌的分離

a.常規培養方法

檢查麥康凱瓊脂平板，志賀氏菌的菌落為淺粉紅色，半透明，將此可疑菌落接種於下列培養基中：葡萄糖肉湯，TSI瓊脂斜面，賴氨酸脫羧酶肉湯，動力試驗瓊脂和胰腖。置35℃培養48h，但應在20h進行檢查，棄去所有有動力、產H2S、產氣、賴氨酸脫羧以及發酵蔗糖與乳糖的培養物。關於產生吲哚者，應棄去其44℃增菌物中的陽性培養物。至於42℃增菌培養中的所有可疑培養物皆有可能是陽性或是陰性，因此皆應予保留。

b.生理學性狀

將初篩反應良好的培養物再接種其他生化試驗，志賀氏菌的特性概述如下分離：H2S、尿素酶、葡萄糖、（產氣）運動、賴氨酸、脫羧酶、蔗糖、側金盞花醇、乳糖（2日）、KCN、丙二酸鹽、檸檬酸鹽、與水楊素皆為陰性；甲基紅為陽性。用抗血清鑒定其血清型或參照表二所列32個血清型的生物學特性進行試驗。其粘液酸鹽（mucate）和乙酸鹽（acetate）的反應是會有所幫助的。在這些反應中志賀氏菌一般為陰性，而不產氣的大腸桿菌一般至少在此反應中的一項為陽性。

c.血清學性狀:

將犢牛肉浸汁瓊脂斜面的24h培養物混懸於3mL0.85%生理鹽水中,使其濃度相當於 標准比濁管第5號,在潔凈的玻璃平皿上用蠟筆標記9個3x1cm的方塊.按照以下方案滴加混懸液，抗血清與生理鹽水。

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