纯水裂解红细胞
1. 裂解红细胞后再加入percoll会怎样
细胞裂解液一般都用得是含酶的,在血红细胞表面上有红细胞专署的表面抗原版,当裂解液中含可以权攻击特定红细胞表面抗原的酶的时候就只会造成红细胞的变形,生物通道扩大,膨胀,裂解,或者引起红细胞的变性.而不会攻击其他细胞.另外红细胞有自己的电负性
2. 求红细胞裂解液配制方法
现在红细胞裂解液都是直接买现成的了,可以去北京索莱宝买。
以下是红细胞裂解液配方:(仅供参考)
1.裂解液:的确是ACK裂解液作用更柔和些
配方:
NH4CL 8.29g
KHCO3 1.00g
Na2EDTA 37.2mg
溶于1000mL蒸馏水, pH 7.2-7.4, 效果一直很好。
注意:
(1) 裂解液如果放在冰箱里,一定要预热,37度即可。裂解期间试管也可水浴,但如果是夏天室温比较高则不必;
(2) 裂解5min后立刻离心(从所有管都混匀后计时间);
(3) PBS离心洗涤2次;
(4) 裂解液pH值很重要,最好一次不要配多,时间长效果不好,我一般一次配100mL,
避光保存。
2.离心速度:800-1000rpm,5min
3.研磨轻柔很重要
4.培养淋巴细胞的最佳培养液是RPMI 1640,因为是原代细胞,要用10%胎牛血清。还有非常重要的一点,要想让细胞增殖得好,必须加二巯基乙醇(beta-2ME)
5.细胞密度1-2X10^6/mL
3. 红细胞裂解液的配制(在线等!!急!!!)
配制试剂所需材料:
1. Ammonium Chloride x10 Lysing Concentrate Solution
a) NH4Cl (1.5 M) 80 g
b) KHCO3 (100 nM) 10 g
c) Na4EDTA (10 nM) 3.7 g
d) Distilled H2O 1000 mL
2. 1N HCl or 1N NaOH(调节pH值用)
配制步骤:
1.将以上a、b、c试剂溶于900ml去离子水中;专
2.调节溶液pH值到属7.2-7.4,加去离子水定容到1000ml;
3.在制备工作液时,将此储存液稀释10倍后使用。
保存:
1.10x 储存液储存于2-8°C不能超过半年(六个月);
2.在使用前,工作液每天都应该新鲜配制放置于室温,当日用不完的弃掉。
4. 红细胞裂解液的作用原理是什么 拜求答案!
细胞裂解液一般都用得是含酶的,在血红细胞表面上有红细胞专署的表面抗版原,当裂解液中含可以攻权击特定红细胞表面抗原的酶的时候 就只会造成红细胞的变形,生物通道扩大,膨胀,裂解,或者引起红细胞的变性.而不会攻击其他细胞.另外红细胞有自己的电负性,渗透脆性(通常是一些非酶细胞裂解液的突破点) ,悬浮稳定性,这都是区别于其他种类细胞的区别点.红细胞裂解液就是利用这些特性裂解红细胞的.另外红细胞裂解液不能达到100% 准确的裂解红细胞,总会或多或少导致其他种类细胞的裂解.
5. 为什么红细胞放入纯水中会胀破,而蛙卵不破
因为卵细胞的细复胞膜制在不含有水通道,因而放在水中水分子不会进入.
老的教科书上都认为水是通过自由扩散的方式进入细胞的.2003年Agre因在水通道方面的研究成果而与离子通道的研究者Roderick MacKinnon共享当年的诺贝尔化学奖,水的代谢问题才引起人们的注意,现在可以肯定细胞的水分主要是通过水通道进入细胞的,而卵母细胞不表达水通道蛋白,所以水很难进入.
6. 为什么红细胞放入纯水中会胀破,而蛙卵不破
蛙卵的表面有一层受精膜,它的张力大。它也吸水后胀大而不破。
7. 红细胞裂解液,裂解人类红细胞红细胞的方法
不知道你用的和我的一样不,我上次用的华越洋生物的红细胞裂解液,裂解步回骤如下:首先要把裂解液室温放置答直到温度回到室温,再用去离子水把裂解液(10×)稀释为1×工作液(1
mL
裂解液加9
mL
去离子水)。
1.每1
mL人类血液加10
mL工作液。
2.室温放置15分钟。(注意:放置时间不要超过15分钟)。
3.加入20
mL自备1×PBS,通过稀释反应液来终止反应。
4.4℃
300
g
离心10分钟,吸弃上清液。
5.加入10
mL自备
1×PBS重悬沉淀。
6.300
g离心10分钟,吸弃上清液。
7.用适当的缓冲液重悬沉淀
8.细胞计数。
8. 为什么能裂解红细胞,而几乎不影响淋巴细胞
你好,从血常规检查结果显示,有淋巴细胞数升高和白细胞数值接近回上限,提示有病毒性感染的可答能,请说明有无出现发烧、咽痛、咳嗽、咳痰、肌肉关节酸痛、乏力、腹痛、腹泻、乏力、淋巴结肿大等症状,以便于我们判断清楚病情。急性感染时,尤其是发烧时,会导致红细胞和红细胞压积升高。
9. buffer rcl裂解红细胞原理
细胞裂解液一般都用的是含酶的,在血红细胞表面上有红细胞专属的表面抗回原,当裂解液中含可以攻答击特定红细胞表面抗原的酶的时候 就只会造成红细胞的变形,生物通道扩大,膨胀,裂解,或者引起红细胞的变性.而不会攻击其他细胞.另外红细胞有自己的电负性,渗透脆性(通常是一些非酶细胞裂解液的突破点) ,悬浮稳定性,这都是区别于其他种类细胞的区别点.红细胞裂解液就是利用这些特性裂解红细胞的.另外红细胞裂解液不能达到100% 准确的裂解红细胞,总会或多或少导致其他种类细胞的裂解.
10. 红细胞裂解液配制方法有哪些
具体如下:
1、裂解液:的确是ACK裂解液作用更柔和些
配方:
NH4CL 8.29g
KHCO3 1.00g
Na2EDTA 37.2mg
溶于1000mL蒸馏水,回 pH 7.2-7.4, 效果一直很答好。
注意:
(1) 裂解液如果放在冰箱里,一定要预热,37度即可。裂解期间试管也可水浴,但如果是夏天室温比较高则不必;
(2) 裂解5min后立刻离心(从所有管都混匀后计时间);
(3) PBS离心洗涤2次;
(4) 裂解液pH值很重要,最好一次不要配多,时间长效果不好,我一般一次配100mL,
避光保存。
2.离心速度:800-1000rpm,5min
3.研磨轻柔很重要
4.培养淋巴细胞的最佳培养液是RPMI 1640,因为是原代细胞,要用10%胎牛血清。还有非常重要的一点,要想让细胞增殖得好,必须加二巯基乙醇(beta-2ME)
5.细胞密度1-2X10^6/mL