纯水进入反相色谱柱

㈠ 高效液相色谱使用磷酸盐做流动相时应该注意什么

一个来就是在流动相配制的过程中，源保证磷酸盐完全溶解，然后减压抽滤。因为一般实验室使用的磷酸盐只是化学纯的，所以一定要过滤。避免污染色谱柱。
另外一个就是在实验前后记得冲洗系统和冲洗色谱柱。无机盐对于色谱柱和系统都有损伤，所以使用之后要清洗干净。又因为无机盐在水溶液中容易溶解，但是在有机相中溶解度非常低。所以中间要用甲醇水（或者乙腈水）过渡。
每天的顺序应该是：先冲40min流速0.8ml/min的10%的甲醇水（或者乙腈水），然后换流动相，平衡后进样分析。试验结束后再冲40min流速0.8ml/min的10%的甲醇水（或者乙腈水），然后冲30min0.8ml/min的甲醇（或者乙腈）。关机。
这个选择甲醇还是乙腈，要看你实验的有机相了。

㈡ 在冲洗高效液相C18反相柱的时候，为什么不能用纯水

相C18色谱柱（即憎水柱子）如果用纯水冲洗后，如果立即停泵则由于其憎水（疏水）专的缘故使得柱子内属的水因而流失掉，长时间停泵使得柱子干掉（变干），会造成柱子内固定相填料表面键合的硅烷基结构塌陷（也说成是失去支撑倒下），柱子就这样报废了。那么一旦冲洗柱子用了纯水相怎么办呢？诶！不要惊慌，只要你不停泵，上述情况不会立即发生，我们只要保证最后用有机相冲洗柱子，停泵后使柱子内留存的是有机相，就无大碍，