免疫组化一抗用纯水稀释

A. 免疫组化一抗是单抗还是多抗好

根据你的实来验需求来确定。自

如果你的目标蛋白丰度小，则用多抗可能抗体结合位点多，信号能强些。

如果你的实验对免疫染色特异性要求高，需要特别注意排除假阳性，则选择单抗能够得到比较可靠的结果。

最后如果费用也是个大问题，就要考虑到多抗比单抗便宜。

B. 石蜡切片免疫荧光与免疫组化一抗浓度有区别吗

免疫荧光的一抗浓度一般高于免疫组化的一抗浓度，但是也要看具体情况：
因此免疫荧光一般采取二步法，而免疫组化中有biotin放大这一步。所以建议免疫荧光的时候重新摸索浓度，要是采用三步法可能不需要摸索了。另我们免疫荧光抗体一般用推荐浓度。
免疫荧光抗体浓度要根据免疫组化结果的强弱调整，如果较强，用相同浓度即可；如果组化阳性较弱，那么做荧光时要加大抗体浓度。至于免疫组化的抗体是否能做免疫荧光，其实是由组织类型及标本的固定方式决定的。一般组化为石蜡切片，荧光为冰冻切片或细胞爬片。如果组化和荧光用的是相同的标本，那么抗体就能通用，毕竟组化和荧光的区别在于一抗的呈现方式，而非抗原抗体的结合。

C. 免疫组化的一抗和二抗浓度和孵育时间有什么要求啊

一抗孵来育温度有几种：源4度、室温、37度，其中4度效果最佳；孵育时间与温度、抗体浓度有关，一般37度1-2h，4度过夜（从冰箱拿出后37度复温45min）。具体条件还要摸索。二抗一般室温或37度30min-1h，浓度一般有工作液，若是浓缩液还要摸索浓度。可以找下爱必信

D. 免疫组化为什么要用一抗又要用二抗啊

一抗特异性结合组织中你要检测的物质，而二抗则能和一抗结合，并带有放射性、生物素或者地高辛标记，使得你可以观察到。

E. 免疫组化一抗用什么稀释PBS可以吗

建议用血清稀释，最理想的方法是用二抗同种属的血清，如二抗是山羊的，用山羊血清，或者是用2%BSA，前提是一抗不是牛的。也就是说，一抗是羊的，小鼠的，兔子的，都可以用BSA。

F. 免疫组化一抗怎么制备

最方便的办法是直接购买商品化的，尤其是对于一些常见抗原的检查。因为免疫组专化实验步骤繁多，非常复杂，如属果自己制备抗体，还需要大量的时间来免疫动物（几个月），获得抗体后还要筛选，优化。因为很多抗体公司的IHC抗体都是经过很多实验验证的，直接购买使用，效果也有保障。
以前很多医院做免疫组化买的是lab
vision的抗体。或者是通过biocompare查有哪些公司提供你要的抗体。
如果已经有抗体了，基本上就是用封闭缓冲液，稀释到建议的浓度，孵片就行了。

G. 免疫组化中一抗与二抗有什么要求谢谢！

比如一抗是鼠抗人，二抗必须是×抗鼠的。×表示可以是羊，兔，马等。一抗是单抗，二抗是多抗，是抗一类同种异型的Ig，带有特殊的可产生发光现象的标记。

条件允许尽量选择进口，一抗abcam，Santa，CST等值得信赖，二抗的话国产的就行了。

源性一抗如果需要做共定位，那么就需要不同源性的且要能够用于人组织的，可以做组化的，二抗建议选择驴抗，这样用处多；如果说是做组织化学，那么一抗源性就无所谓了只要能用于人的组织，二抗相应配套就行。

(7)免疫组化一抗用纯水稀释扩展阅读：

抗体选择没问题，关于二抗你直接购买国产的二抗试剂盒就可以了，如中杉金桥或者博士德的都没问题，里面封闭用的过氧化氢和山羊血清都有的。按照试剂盒说明，一步一步做即可。

免疫荧光，ABC，western blotting一抗应该可以通用，

某些抗体的说明书上会给推荐效价，有时会同时给出western blotting 和免疫组化的效价。

一点更正：

免疫荧光就是一种免疫组化方法！免疫荧光使用的是荧光抗体（荧光一抗为直接法，普通一抗加荧光二抗为间接法）。

免疫组化的二抗必须是抗一抗物种的抗原，比如说：做A动物的B蛋白所用的一抗为动物C抗动物A的B蛋白抗体，二抗就应该是动物D抗动物C抗体。

如：豚鼠抗大鼠cofilin1一抗，羊抗豚鼠二抗。二抗远比一抗便宜。

H. 免疫组化为什么要用一抗又要用二抗啊

一抗，特异性识别靶标分子；
二抗，起到信号放大的作用

I. 免疫组化为什么要用一抗又要用二抗啊求解

一抗，是免疫组化中特异步骤，决定着你的检查目标。
二抗，是特异性结合一抗，通常是Fc，具有放大检测信号，提高检测灵敏度。