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纯水中DNA

发布时间: 2021-01-09 17:18:04

Ⅰ DNA保存在纯水中和在盐溶液中有何区别

保存在纯水中没有在盐溶液中稳定,保存的时间不够长,易降解;但保存在盐溶液中对于后续的有些实验会有影响.短期用一般保存在纯水中.…………………
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详细资料请参考:

Ⅱ 双链DNA在纯水中会自动变性解链 这句话对不对

不会,解链需要在高温进行。所谓解链就是使双链分离成单链,比如PCR中常用的94或者95℃就是高温解链。

Ⅲ 核酸的保存,小为什么RNA可以放在纯水里DNA却不能

你问反了吧,做质粒DNA纯化,用试剂盒最后一步洗脱就可以用热的纯水,然后冷冻就专OK了

而对于大多数RNA,由于是单链属,而且环境中有菌,存在大量的 RNA酶 ,一般不容易保存,有些RNA酶热灭菌都不能失活

Ⅳ 水煮法提取DNA 的详细过程

提法:
利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA,然后将沉淀溶于水中,使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66% ٠80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.

一.DNA的提取方法简介
为了研究DNA分子在生命代谢中的作用,常常需要从不同的生物材料中提取DNA.由于DNA分子在生物体内的分布及含量不同,要选择适当的材料提取DNA。
动植物中,小牛胸腺۰动物肝脏۰鱼类精子,植物种子的胚中都含有丰富的DNA。
微生物中,谷氨酸菌体含7%~10%,面包酵母含4%,啤酒酵母含6%,大肠肝菌含9%~10%。

从各种材料中提取DNA方法不同,分离提取的难易程度也不同。
对于低等生物。如从病毒中提取DNA 比较容易,多数病毒DNA 分子量较小,提取时易保持其结构完整性。
从细菌及高等动植物中提取DNA难度大一些。细菌DNA 分子量较大,一般达2×10 道尔顿。因此易被机械张力剪断。细菌DNA,除核DNA 外,还有质粒DNA 等。

1、核酸的理化性质
RNA和核苷酸的纯品都呈白色粉末或结晶,DNA则为白色类似石棉样的纤维状物。除肌苷酸、鸟苷酸具有鲜味外,核酸和核苷酸大都呈酸味。
DNA、RNA和核苷酸都是极性化合物,一般都溶于水,不溶于乙醇、氯仿等有机溶剂,它们的钠盐比游离酸易溶于水,RNA钠盐在水中溶解度可达40g/L。DNA在水中为10g/L,呈黏性胶体溶液。在酸性溶液中,DNA、RNA易水解,在中性或弱碱性溶液中较稳定。

天然状态的DNA 是以脱氧核糖核蛋白(DNP)形式存在于细胞核中。要从细胞中提取DNA 时,先把DNP抽提出来,再把P除去,再除去细胞中的糖,RNA 及无机离子等,从中分离DNA 。
DNP和RNP在盐溶液中的溶解度受盐浓度的影响而不同。DNP在低浓度盐溶液中,几乎不溶解,如在0.14 mol/L的氯化钠溶解度最低,仅为在水中溶解度的1%,随着盐浓度的增加溶解度也增加,至1mol/L氯化钠中的溶解度很大,比纯水高2倍。
RNP在盐溶液中的溶解度受盐浓度的影响较小,在0.14mol/L氯化钠中溶解度较大。因此,在提取时,常用此法分离这两种核蛋白。

2.细胞的破碎
细菌有坚硬的细胞壁,首先要破碎经胞。方
法有三种:①机械方法:超声波处理法、研磨法、匀浆法;②化学试剂法:用SDS处理细胞; ③酶解法:加入溶菌酶或蜗牛酶,都可使细胞壁破碎。

由于高等动物DNA 主要存在于细胞核与线粒体中,所以提取时有两个困难(高等植物与此类似):
①破碎细胞难;从处死动物٠分离组织器宫到破碎细胞费时长。在此时期间DNA 可能会被DN ase降解,而动物组织:特别是肌肉组织很难破碎,即使是较易破碎的肝٠肾等组织也往往使用组织匀浆器,易造成DNA 断裂。
②分子量大,一般比细菌的大2—3个数量级,比病毒的大4—5个数量。对不同生物材料,要根据具体情况选择适当的分离提取方法。

3.DNA提取的几种方法
(1).浓盐法
利用RNP和DNP在电解溶液中溶解度不同,将二者分离,常用的方法是用1M 氯 纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的 氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间,而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA 钠盐沉淀出来.
也可用0.15 MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.
两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.
以稀盐酸溶液提取DNA 时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA 的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA 的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA.

(2).阴离子去污剂法:
用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA .由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA.
(3).苯酚抽提法:
苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA 联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相,而DNA溶于水相。离心分层后取出水层,多次重复操作,再合并含DNA 的水相,利用核酸不溶于醇的性质,用乙醇沉淀DNA 。此时DNA是十分粘稠的物质,可用玻璃漫漫绕成一团,取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态 .

Ⅳ DNA保存在纯水中和在盐溶液中有何区别

保存在纯水中没有在盐溶液中稳定,保存的时间不够长,易降解;但保存在盐溶液中对于专后续的有些实验属会有影响。短期用一般保存在纯水中。 …………………
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详细资料请参考:
盐溶液: http://proct.bio1000.com/100030/

Ⅵ 双链DNA在纯水中,会自动变性解链吗为什么



看你放置的环境,都会慢慢降解,低温解链缓慢

Ⅶ DNA在纯水中为何易变性

DNA的骨架磷酸根带负电,在纯水中没有阳离子来中和它的电性,所以无法维持双螺旋结构,易变性。

Ⅷ 为什么DNA在纯水中易变性

DNA在纯水中易变性原因:每一个核苷酸的磷酸基上都带有一个负电荷。版如果这些负电荷权没有被中和,双链之间的这种强有力的静电排斥作用将驱使两条链分开(在同一条链内虽然也存在着这种静电斥力,但由于链内的共价键,这种静电斥力并不重要)。但是当有盐类加入时,这些带负电荷的磷酸基团可以被正离子(如Na+)所中和,也就是正离子围绕在磷酸基周围形成了"离子云",有效地屏蔽了磷酸基之间的静电斥力。这就是Debye-Hvckel 离子屏蔽理论。

Ⅸ DNA保存在纯水中和保存在盐溶液中有什么不同

保存在纯水中没有在盐溶液中稳定,保存的时间不够长,易降解;但保存在盐溶液中对于后续的有些实验会有影响。短期用一般保存在纯水中。

Ⅹ DNA在水相中的分配与pH的关系求解。。

您问的是DNA在水溶液分子解离情况与pH的关系吗,只有在互不相溶的两相中才谈分配问内题
DNA的等电点为4~容4.5,因为其分子中的磷酸基团解离质子的倾向略大于其含氮碱基N原子捕获质子的倾向。故在DNA处于pI值时,二者解离度相同,分子静电量趋于0;在低于pI值的pH范围内,磷酸基团的解离受抑制,碱基N俘获质子趋势增高,DNA分子在不分解情况下逐渐显正电性;在高于pI的pH范围内原理相同,解离情况相反,分子渐显负电性。后两者在纯水溶液中的溶解度会有增加

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