当前位置:首页 » 净水方式 » 离子交换分离的柱上操作分

离子交换分离的柱上操作分

发布时间: 2021-01-22 07:29:29

1. 离子交换色谱柱分离极弱酸阴离子时 怎么加快出峰

装填有固定相用以分离混合组分的柱管。
多为金属或玻璃制作。有直管形、回盘管形、U形管答等形状。
色谱柱可分为填充柱和开管柱两大类。液相色谱通常均采用填充柱。
色谱柱的分离效果取决于所选择的固定相,以及色谱柱的制备和操作条件。

2. 离子交换柱从实验室到生产如何放大

首先应该选用高通量抄的介质袭 比如Sepharose Fast Flow 线性流速可达300cm/h

当实验室探索完成后,应考虑优化洗脱方案,将线性梯度洗脱优化为一步式洗脱,减少分离时间和缓冲液消耗。

为了保持实验室探索时的峰型和出峰位置,可保持柱床的高度不变,加大柱床的横截面积,这样可以增加填料加大吸附量,加快速度,而且洗脱后峰型和出峰位置几乎保持不变。

放大生产的核心在于保证高流速,高容量,高回收率。需要在实验室探索阶段更多的考虑到这些因素,而非追求其他的结果。

3. 离子交换色谱法的分离原理

离子交换色谱(ion exchange chromatography,IEC)以离子交换树脂作为固定相,树脂上具有固回定离子基团及可交换的离答子基团。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时,组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换。根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。
阳离子交换:
阴离子交换:
式中"--"表示在固定相上,Kxy和Kzm是交换反应的平衡常数,Z+和X-代表被分析的组分离子。M+和Y-表示树脂上可交换的离子团。
离子交换反应的平衡常数分别为:
阳离子交换:
阴离子交换:
平衡常数K值越大,表示组分的离子与离子交换树脂的相互作用越强。由于不同的物质在溶剂中离解后,对离子交换中心具有不同的亲合力,因此具有不同的平衡常数。亲合力大的,在柱中的停留时间长,具有高的保留值。

4. 离子交换柱层析能分离纯化蔗糖酶的主要依据是什么

DEAE-纤维素抄为二乙氨乙基纤维素,是阴离子交换剂。
其原理基于离子交换层析:离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。
由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质,结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。

5. 酶分离纯化离子交换柱预装柱怎么使用

如果不限定纯化方法,可以考虑亲和层析或离子交换,但根据你版问题的意思,是选定权离子交换。
此时就要考虑你蛋白的等电点了,如果等电点在你稳定pH之上,就用阳离子交换柱:
设计阳离子交换层析:将你的样品置换到你所指的稳定pH的running buffer。同时装柱,平衡,然后上样,平衡,洗脱(因为你的pH不稳定,建议盐洗脱),收峰。得你的蛋白;
如果你的等电点在稳定pH之下,就用阴离子交换柱,其步骤如上,只是改变柱子类型。

6. 用阳离子交换柱子分离蛋白,怎么调缓冲液ph

不知你将什么"缓冲液"调节到一定PH浓度?把问题讲明了一点…

7. 离子交换色谱柱分离极弱酸阴离子时为什么要使用碱性淋洗液

就得知道其原理:
离子色谱是利用相反电荷之间的相互作用来分离的,当检测物内质带负电荷时,要选容择阴离子色谱柱,阴离子色谱柱带正电荷的配基,进行阴离子-阳离子交换,结合带负电荷的分子
我们的瑞伊缔洗液也是弱碱性

8. 制作混合床离子交换树脂柱时在操作上要注意哪些问题

在混床树脂使用的过程中,阳树脂会释放出H+离子,而阴树脂释放出OH-离子,这两种两种会结合回成答为水,阳树脂失去一些阳离子之后,会呈负电性,而阴树脂失去阴离子,呈正电性,这两种树脂就会相互吸引,导致两种树脂成为团状物,并且不易分离,而且一些碎树脂末和悬浮物也会增加树脂的“抱团”作用,这就是树脂出现“抱团”的原因,树脂如果被油脂污染也会造成树脂的“抱团”现象。


应该如何解决?

1.当混床树脂出现“抱团”的现象时,就会导致树脂再生时不能很好的分层,所以一般在树脂分层时,会加入一定量的电解质,比如碱等物质,阳树脂就会与阳离子结合成为中性,而阴树脂则会与阴离子结合,也呈中性,“抱团”的树脂也会随之分离,所以一般混床树脂在分层时都会使用一定的碱,能够有效的改善阴、阳树脂的分层效果。

2.被油脂污染的树脂,可以使用非离子型表面活性剂为主的碱性清洗剂进行处理,对树脂进行清洗,能够有效的去除树脂上的油脂。

详情点击:网页链接

9. 利用阳离子交换层析分离下列每一对氨基酸,哪一种氨基酸首先被PH7缓冲液从离子交换柱上洗脱出来。

氨基酸与粒子交复换树脂的制吸附力大小取决于它们之间的电荷引力和疏水作用。第一组中甘氨酸和亮氨酸均为非极性氨基酸,但是相比之下甘氨酸的极性要更强,也就是疏水性更弱,它会先被洗脱。第二组中,丝氨酸是中性条件下不带电荷的极性氨基酸,丙氨酸是非极性氨基酸,所以丝氨酸疏水性差,先被洗脱。

热点内容
丁度巴拉斯情人电影推荐 发布:2024-08-19 09:13:07 浏览:886
类似深水的露点电影 发布:2024-08-19 09:10:12 浏览:80
《消失的眼角膜》2电影 发布:2024-08-19 08:34:43 浏览:878
私人影院什么电影好看 发布:2024-08-19 08:33:32 浏览:593
干 B 发布:2024-08-19 08:30:21 浏览:910
夜晚看片网站 发布:2024-08-19 08:20:59 浏览:440
台湾男同电影《越界》 发布:2024-08-19 08:04:35 浏览:290
看电影选座位追女孩 发布:2024-08-19 07:54:42 浏览:975
日本a级爱情 发布:2024-08-19 07:30:38 浏览:832
生活中的玛丽类似电影 发布:2024-08-19 07:26:46 浏览:239