蛋白样品中有糖无法超滤浓缩
『壹』 常用的浓缩蛋白样品的方法有哪些
1、沉淀法(蛋白质的沉淀性质)
2、吸附法(吸水剂)
3、冻干法(真空低温脱水)
4、超滤法(分子量)
『贰』 蛋白质电泳所加样品在浓缩胶中跑的不成一条直线,为什么怎么解决
浓缩胶的意思就是让蛋白浓缩嘛!由于浓缩胶的孔径比较大,分离胶的孔径较小所以蛋白质在浓缩胶中快速运动,到分离胶时速度变慢,就被压到一块了。加溴酚
『叁』 蛋白用超滤管浓缩容易沉淀怎么办
可能是这个蛋白的水溶性较差,也就是只能保持在一定浓度不能太高
另外就内和这个蛋白容的稳定性有关了,超滤时保持低温,体积缩小一点后就把滤液混匀避免局部浓度过高,选择更合适的缓冲液,添加一点甘油等小分子物质等都可以增加蛋白的稳定性。
『肆』 Western的蛋白样品加过loading buffer煮沸以后,还能用Amicon Ultra-0.5 mL 超滤离心管进行超滤浓缩富集么
应该可以吧。你试完后也告我一声。
『伍』 蛋白在超滤管浓缩过程中出现沉淀怎么办
1、选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。
通常应截留分子量不应专大于目的蛋属白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快,否则直接损坏超滤膜。
注意,一定要等离心机达到目的转速之后,方可离开
离心机,否则离心机出问题时,无法第一时间处理,后果不可预测!膜与转轴的方向根据说明书调整(角转离心机的情况是膜与轴垂直)。在实际使用中,一般转速开的比说明书里的要低,这样可以延长离心管的使用寿命。
『陆』 western中的蛋白质样品没浓缩成一条直线有影响吗
首先得确认你配置胶的浓度以及配胶的试剂没问题,如果浓度没问题的话,应该是胶板下面(原先圈着的胶条位置)存有气泡没有赶跑,把气泡用吸管赶走后就OK了
『柒』 蛋白质溶液中混有少量葡萄糖,提纯为什么用渗析,而不用盐析
(1)可以用盐析,你的想法不错,盐析后,蛋白质不会变性!
(2)盐析后,蛋白质就会沉淀!
『捌』 “蔗糖可以用来浓缩蛋白样品”为什么是错的
蛋白样品,看见样品二字了吗,它不是活性的蛋白
『玖』 怎么去除多糖中的蛋白
去除蛋白质习惯上用Sevag法即:氯仿:戊醇或丁醇 4:1 与要去蛋白质溶液的量为5:1,振摇,去专沉淀即是。去多糖采用属乙醇沉淀法,即视多糖分子量大小于溶液中加无水乙醇达到乙醇含量70-90%(v/v),去沉淀即是。
『拾』 蛋白浓缩过程中,培养基的糖类物质如何去除
可以采用脱盐或者透析的方法去除培养基内的糖类物质
如果蛋白可以盐析,也能去除糖类物质