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离子交换缓冲液ph

发布时间: 2021-02-20 06:04:20

① 将四种核苷酸吸附于阴离子交换柱上时,应将溶液调到什么 ph

① 电泳分离4种核苷酸时应取pH3.5 的缓冲液,在该pH时,这4种单核苷酸之间所带负电荷差异较大,回它们都向正极答移动,但移动的速度不同,依次为:UMP>GMP>AMP>CMP;
② 应取pH8.0,这样可使核苷酸带较多负电荷,利于吸附于阴离子交换树脂柱。虽然pH 11.4时核苷酸带有更多的负电荷,但pH过高对分离不利。
③ 当不考虑树脂的非极性吸附时,根据核苷酸负电荷的多少来决定洗脱速度,则洗脱顺序为CMP>AMP> GMP > UMP,但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之间存在着非极性吸附,嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3倍。静电吸附与非极性吸附共同作用的结果使洗脱顺序为:CMP> AMP > UMP >GMP。

② 电泳分离四种核苷酸时,通常将缓冲液调到什么ph

① 电泳分离4种核苷酸时应取pH3.5 的缓冲液,在该pH时,这4种单核苷酸之间所带版负电荷差异较大,它权们都向正极移动,但移动的速度不同,依次为:UMP>GMP>AMP>CMP;
② 应取pH8.0,这样可使核苷酸带较多负电荷,利于吸附于阴离子交换树脂柱。虽然pH 11.4时核苷酸带有更多的负电荷,但pH过高对分离不利。
③ 当不考虑树脂的非极性吸附时,根据核苷酸负电荷的多少来决定洗脱速度,则洗脱顺序为CMP>AMP> GMP > UMP,但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之间存在着非极性吸附,嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3倍。静电吸附与非极性吸附共同作用的结果使洗脱顺序为:CMP> AMP > UMP >GMP。

③ 过离子交换柱时,pH梯度洗脱缓冲液一般用什么缓冲液

如果不限定纯化方法,可以考虑亲和层析或离子交换,但根据你问题的意思版,是选定离子权交换。
此时就要考虑你蛋白的等电点了,如果等电点在你稳定pH之上,就用阳离子交换柱:
设计阳离子交换层析:将你的样品置换到你所指的稳定pH的running
buffer。同时装柱,平衡,然后上样,平衡,洗脱(因为你的pH不稳定,建议盐洗脱),收峰。得你的蛋白;
如果你的等电点在稳定pH之下,就用阴离子交换柱,其步骤如上,只是改变柱子类型。

④ PH标准液与PH缓冲液有区别吗,知道的请详细说明下,谢谢

有区别的,缓冲液一般是弱酸(碱),标准液一般是正酸(碱)!
当往某些溶液中加入回一定答量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3·H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。
由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H 离子基本上被A-离子消耗:
所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。

⑤ 用阳离子交换柱子分离蛋白,怎么调缓冲液ph

不知你将什么"缓冲液"调节到一定PH浓度?把问题讲明了一点…

⑥ 蛋白纯化阴离子交换,缓冲液带什么电荷

既然是阴离子交换,就要让目标蛋白带负电,那么缓冲液PH就要大于等电点。缓冲体系的选择也很重要,一般用TRIS-HCl,特别是弱阴离子柱不可选用带负电强的磷酸盐缓冲液,否则上样液中被交换的将是磷酸根而不是目标蛋白。一般用NaCl平衡后上样进行离子交换,然后再用较强的阴离子洗脱。

⑦ 缓冲溶液用什么调PH值

在化学中,有一类能够减缓因外加强酸或强碱以及稀释等而引起的pH急剧变化的作用的溶液,此种溶液被称为pH缓冲溶液。pH缓冲溶液一般都是由浓度较大的弱酸及其共轭碱所组成,如HAc-Ac-,NH4+-NH3等,此种缓冲溶液具有抗外加强酸强碱的作用,同时还有抗稀释的作用。在高浓度的强酸或强碱溶液中,由于H+或OH-浓度本来就很高,外加少量酸或碱基本不会对溶液的酸度产生太大的影响。在这种情况下,强酸(pH<2)、强碱(pH>12)也是缓冲溶液,但此类缓冲溶液不具有抗稀释的作用。

在分析化学中用到的缓冲溶液,大多数是用于控制溶液的pH,也有一部分是专门用于测量溶液的pH值时的参照标准,被称为标准缓冲溶液

当往某些溶液中加入一定量的酸和碱时,有阻碍溶液pH变化的作用,称为缓冲作用,这样的溶液叫做缓冲溶液。弱酸及其盐的混合溶液(如HAc与NaAc),弱碱及其盐的混合溶液(如NH3·H2O与NH4Cl)等都是缓冲溶液。

由弱酸HA及其盐NaA所组成的缓冲溶液对酸的缓冲作用,是由于溶液中存在足够量的碱A-的缘故。当向这种溶液中加入一定量的强酸时,H 离子基本上被A-离子消耗:

所以溶液的pH值几乎不变;当加入一定量强碱时,溶液中存在的弱酸HA消耗OH-离子而阻碍pH的变化。

http://www.hudong.com/wiki/%E7%BC%93%E5%86%B2%E6%B6%B2

⑧ 谁能帮我解释一下,为什么分离酸性蛋白质要选择pH较大的缓冲液,而分离碱性蛋白质选择pH较小的缓冲液

若使用缓冲液的pH值高于蛋白质的等电点时,蛋白质在该缓冲液中携带净负电荷,可以使用阴离子交换剂进行分离。反之,用阳离子交换剂进行分离。阴离子交换剂应选用阳离子缓冲液,如Tris、乙二胺、烷基胺等。

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