细胞过滤效果

❶ 请教常用的细胞筛选的方法~~

应该是流式细胞仪了 这个东西很管用
以下是部分内容 其实去网络一搜就好了

流式细胞计是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量，并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器，它只能测量一个细胞的诸如总核酸量，总蛋白量等指标，而不能鉴别和测出某一特定部位的核酸或蛋白的多少。也就是说，它的细节 分辨率为零。

流式细胞计可同时进行多参数测量，信息主要来自特异性荧光信号及非荧光散射信号。测量是在测量区进行的，所谓测量区就是照射激光束和喷出喷孔的液流束垂直相交点。液流中央的单个细胞通过测量区时，受到激光照射会向立体角为2π的整个空间散射光线，散射光的波长和入射光的波长相同。散射光的强度及其空间分布与细胞的大小、形态、质膜和细胞内部结构密切相关，因为这些生物学参数又和细胞对光线的反射、折射等光学特性有关。未遭受任何损坏的细胞对光线都具有特征性的散射，因此可利用不同的散射光信号对不经染色活细胞进行分析和分选。经过固定的和染色处理的细胞由于光学性质的改变，其散射光信号当然不同于活细胞。散射光不仅与作为散射中心的细胞的参数相关，还跟散射角、及收集散射光线的立体角等非生物因素有关。
在流式细胞术测量中，常用的是两种散射方向的散射光测量：①前向角（即0角）散射（FSC）；②侧向散射（SSC），又称90角散射。这时所说的角度指的是激光束照射方向与收集散射光信号的光电倍增管轴向方向之间大致所成的角度。一般说来，前向角散射光的强度与细胞的大小有关，对同种细胞群体随着细胞截面积的增大而增大；对球形活细胞经实验表明在小立体角范围内基本上和截面积大小成线性关系；对于形状复杂具有取向性的细胞则可能差异很大，尤其需要注意。侧向散射光的测量主要用来获取有关细胞内部精细结构的颗粒性质的有关信息。侧向散射光虽然也与细胞的形状和大小有关，但它对细胞膜、胞质、核膜的折射率更为敏感，也能对细胞质内较大颗粒给出灵敏反映。
在实际使用中，仪器首先要对光散射信号进行测量。当光散射分析与荧光探针联合使用时，可鉴别出样品中被染色和未被染色细胞。光散射测量最有效的用途是从非均一的群体中鉴别出某些亚群。
荧光信号主要包括两部分：①自发荧光，即不经荧光染色细胞内部的荧光分子经光照射后所发出的荧光；②特征荧光，即由细胞经染色结合上的荧光染料受光照而发出的荧光，其荧光强度较弱，波长也与照射激光不同。自发荧光信号为噪声信号，在多数情况下会干扰对特异荧光信号的分辨和测量。在免疫细胞化学等测量中，对于结合水平不高的荧光抗体来说，如何提高信噪比是个关键。一般说来，细胞成分中能够产生的自发荧光的分子（例核黄素、细胞色素等）的含量越高，自发荧光越强；培养细胞中死细胞/活细胞比例越高，自发荧光越强；细胞样品中所含亮细胞的比例越高，自发荧光越强。
减少自发荧光干扰、提高信噪比的主要措施是：①尽量选用较亮的荧光染料；②选用适宜的激光和滤片光学系统；③采用电子补偿电路，将自发荧光的本底贡献予以补偿。

样品分选原理

流式细胞计的分选功能是由细胞分选器来完成的。总的过程是：由喷嘴射出的液柱被分割成一连串的小水滴，根据选定的某个参数由逻辑电路判明是否将被分选，而后由充电电路对选定细胞液滴充电，带电液滴携带细胞通过静电场而发生偏转，落入收集器中；其它液体被当作废液抽吸掉，某些类型的仪器也有采用捕获管来进行分选的。
稳定的小液滴是由流动室上的压电晶体在几十KHz的电信号作用下发生振动而迫使液流均匀断裂而形成的。一般液滴间距约距约数百μm。实验经验公式f=v/4.5d给出形成稳定水滴的振荡信号频率。其中v是液流速度，d为喷孔直径。由此可知使用不同孔径的喷孔及改变液流速度，可能会改变分选效果。使分选的含细胞液滴在静电场中的偏转是由充电电路和偏转板共同完成的。充电电压一般选+150V，或-150V；偏转板间的电位差为数千伏。充电电路中的充电脉冲发生器是由逻辑电路控制的，因此从参数测定经逻辑选择再到脉冲充电需要一段延迟时间，一般为数十ms。精确测定延迟时间是决定分选质量的关键，仪器多采用移位寄存器数字电路来产生延迟。可根据具体要求予以适当调整。
（50）数据处理原理：FCM的数据处理主要包括数据的显示和分析，至于对仪器给出的结果如何解释则随所要解决的具体问题而定。
①数据显示：FCM的数据显示方式包括单参数直方图、二维点图、二维等高图、假三维图和列表模式等。
直方图是一维数据用昨最多的图形显示形式，既可用于定性分析，又可用于定量分析，形同一般X—Y平面描图仪给出的曲线。根据选择放大器类型不同，横座标可以是线性标度或对数标度，用“道数”来表示,实质上是所测的荧光或散射光的强度。纵座标一般表示的是细胞的相对数。图10-2给出的是直方图形式。只能显示一个参数与细胞之间的关系是它的局限性。
二维点图能够显示两个独立参数与细胞相对数之间的关系。横座标和纵座标分别为与细胞有关的两个独立参数，平面上每一个点表示同时具有相应座标植的细胞存在（图10-3）。可以由二维点图得到两个一维直方图，但是由于兼并现象存在，二维点图的信息量要大于二个一维直方图的信息量。所谓兼并就是说多个细胞具有相同的二维座标在图上只表现为一个点，这样对细胞点密集的地方就难于显示它的精细结构。

图10-2 直方图 图10-3 二维点图
二维等高图类似于地图上的等高线表示法。它是为了克服二维点图的不足而设置的显示方法。等高图上每一条连续曲线上具有相同的细胞相对或绝对数，即“等高”。曲线层次越高所代表的细胞数愈多。一般层次所表示的细胞数间隔是相等的，因此等高线越密集则表示变化率越大，等高线越疏则表示变化平衡。图10-4给出了二维等高图的样式。
假三维图是利用计算机技术对二维等高图的一种视觉直观的表现方法。它把原二维图中的隐座标—细胞数同时显现，但参数维图可以通过旋转、倾斜等操作，以便多方位的观察“山峰”和“谷地”的结构和细节 ，这无疑是有助于对数据进行分析的。图10-5为假三维图的示意图。

图10-4 二维等高图 图10-5 假三维图
列表模式其实只是多参数数据文件的一种计算机存贮方式，三个以上的参数数据显示是用多个直方图、二维图和假三维图来完成的。可用ListMode中的特殊技术，开窗或用游标调出相关部分再改变维数进行显示。例如，“一调二”就是在一维图上调出二维图来；“二调一”就是从二维图中调出一维图来。图10-6给出了从二维图等高图中调出相应窗口的直方图的示意图。

图10-6 从二维图设窗调出直方图示意
上面简要地介绍了几种数据显示形式，在实际应用中，可根据需要选择匹配，以便了解和获得尽可能多的有用信息。
②数据分析：数据分析的方法总的可分为参数方法和非参数方法两大类。当被检测的生物学系统能够用某种数学模型技术时则多使用参数方法。数学模型可以是一个方程或方程组，方程的参数产生所需要的信息来自所测的数据。例如在测定老鼠精子的DNA含量时，可以获取细胞频数的尖锐波形分布。如果采用正态分布函数来描述这些数据，则参数即为面积、平均值和标准偏差。方程的数据拟合则通常使用最小二乘法。而非参数分析法对测量得到的分布形状不需要做任何假设，即采用无设定参数分析法。分析程序可以很简单，只需要直观观测频数分布；也可能很复杂，要对两个或多个直方图逐道地进行比较。
逐点描图（或用手工，或用描图仪、计算机系统）是大家常用的数据分析的重要手段。我们常可以用来了解数据的特性、寻找那些不曾预料的特异征兆、选择统计分析的模型、显示最终结果等。事实上，不经过先对数据进行直观观察分析就决不应该对这批数据进行数值分析。从这一点来看，非参数分析是参数分析的基础。
逐道比较工作量较大，但用直观法很容易发现明显的差异，特别是对照组和测试组。考虑到FCM的可靠性，要注意到对每组测量，都要有对照组，对照组可以是空白对照组、阴性对照组、或零时刻对照组等，具体设置应根据整体实验要求而定。对照组和测试组的逐道比较往往可以减少许多不必要的误差和错误解释。顺便指出，进行比较时对曲线的总细胞数进行归一化处理，甚至对两条曲线逐道相减而得到“差结果曲线”往往是适宜的。
因为数据分析往往和结果解释关系十分密切，也就是说和生物学背景相关，因此具体的分析法和原理将在后面结合实例再介绍。

❷ 细胞膜的自由扩散和滤过作用的差别

所谓自由抄扩散，是小分子物质进出细胞的一种方式，能否发生也与细胞本身是否需要该物质有关； 而滤过作用血液经肾小球时，血浆中的水分子、小分子溶质（包括相对分子质量较小的血浆蛋白质），从肾小球的毛细血管中转移到肾小囊的囊腔而形成原尿过程； 而过滤则是依据分子直径大小来决定是否进入或通过的某一介质一种方法。

若非得分差别的话，即滤过作用包括自由扩散。（不知你是“区分细胞膜的自由扩散和滤过作用的差别”，还是区分“细胞膜的自由扩散和过滤的差别”）

❸ 能够过滤血细胞和蛋白质的是什么

（1）构成肾抄脏结构和功能的基本单位是肾单位，由肾小管和肾小体组成，肾小体由肾小囊和肾小球组成．肾小球有滤过作用，当血液流经肾小球时，除了血细胞和大分子的蛋白质外，其他的如水、无机盐、尿素、葡萄糖会滤过到肾小囊腔形成原尿；
（2）③肾小囊腔内的液体是原尿，一个健康的成年人一天约产生150L；
（3）肾小管有重吸收作用．当原尿流经肾小管时，其中大部分水、部分无机盐和全部的葡萄糖被重新吸收回血液，而剩下的如尿素、一部分无机盐和水等由肾小管流出形成尿液．
故答案为：（1）肾小球（2）原尿（3）肾小管 重吸收 葡萄糖

❹ 无菌细胞过滤器有200目的吗

有的，我们中科院一直用的晶安生物200目细胞过滤器。

❺ 细胞过滤网有什么用途

打散细胞团，得到单细胞悬液。最常用的是200目，70um左右孔径的细胞滤网。

❻ 什么是淋巴结的过滤作用

淋巴结的功能

(1)造血功能：淋巴结内的淋巴细胞可分裂、分化形成新的淋巴细胞。

(2)过滤功能：当淋巴液流经淋巴结时，淋巴窦内的巨噬细胞可将淋巴内的细菌、病毒等异物及时吞噬，起到过滤淋巴液的作用。

(3)免疫功能：淋巴结是人体重要的免疫器官之一，接受抗原刺激后，淋巴小结和髓索内的 B淋巴细胞能转化为浆细胞，产生抗体；深皮质内的T淋巴细胞可转化为具有杀伤异体细胞能力的细胞，从而参与机体的免疫活动。

局部淋巴结(regional lymph nodes)指引流某个器官或某个部位淋巴的第一级淋巴结，临床上统称为哨卫淋巴结。通过其输入淋巴管收纳机体一定区域的淋巴，过滤后经其输出淋巴管输送至下一级淋巴结群或其他淋巴管道。当某器官感染或癌变时，细菌、病毒、寄生虫或癌细胞可沿淋巴管到达相应的局部淋巴结，淋巴结则迅速增殖、肿大，产生大量的淋巴细胞来过滤、阻截和、杀灭这些病原体，防止病变进一步扩散，从而使病灶远处免受病原体的侵袭。但当病原体的致病力过强或淋巴结功能低下时，该局部淋巴结不能成功地过滤、拦截和杀灭病原体，病变则沿该淋巴结的引流方向继续向远处蔓延，波及下一级淋巴结群。因此，局部淋巴结的肿大往往提示其引流范围内有感染灶存在。了解局部淋巴结的位置及其变化情况、淋巴液的引流范围和引流去向，对某些部位疾病的诊断和治疗有重要的临床意义。有些器官如甲状腺、食管及肝的部分淋巴管可不经淋巴结的过滤，直接注入胸导管，使得这些器官的病变或肿瘤细胞得不到淋巴结的监测，病变易于向远处转移，波及其他器官。

❼ 细胞过滤网是一次性的吗

耗材一般是一次性的，实验室用的百千生物的。

❽ 哪种类型的滤膜可以用来过滤细胞培养基

孔径为0.22微米的滤膜 这种滤膜可以过滤掉细菌和病毒。 孔径0.45微米的滤膜已经可以过滤掉细菌，但是不能过滤病毒。 为了防止噬菌体污染，一般还是用0.22微米的滤膜比较好。

❾ 血液过滤有好处吗

过滤血也叫洗血”。“洗血”疗法全称为肝素诱导低密度脂蛋白沉淀法(HELP)。在“洗血”过程中，血液以每分钟70毫升的速度从患者的手臂引到体外，经过“HELP血脂分离系统”时血细胞被从血液中分离出来，重新输入体内；而剩下的血浆中则加入了肝素缓冲液，将低密度脂蛋白、纤维蛋白原沉淀后清除出体内，其他指标(如甘油三酯、胆固醇)也能明显降低，血浆经过过滤后，也重新回流到患者体内。
“洗血”对降低血脂及胆固醇有一定效果，但由于高血脂属于慢性代谢性疾病，血脂的产生是不断反复的，想要一蹴而就，靠一两次“洗血”来改善不良的代谢状况是难以如愿的。药物(如他汀类药物)降脂时，其作用不仅是降脂，还有预防炎症反应、抗血小板聚集、稳定动脉斑块、抑制平滑肌平移和增生等作用，循证医学已经证明这些作用在降低冠心病、心梗等发病率和死亡率中都有着重要的作用。单纯的降脂并不能预防心脑血管疾病。因此，从循证医学的角度，“洗血”能否达到降脂的最终目的———即降低冠心病的发病率和死亡率，缺乏有说服力的临床评价。

“洗血”降低血脂的功效只能维持两周左右，1个月左右血脂就恢复到原来的水平。如果“洗”过后仍然大吃大喝，不加强锻炼，那么降低动脉硬化、冠心病等心血管疾病的发病率就更无从谈起了。

❿ 过滤血的好处

过滤抄血，即血液净化，有以下好处：

1、降低高血脂、高胆固醇预防高血压。

2、清除血液中的慢性炎症因子，控制慢性疾病急性发作的风险。

3、清除体内环境毒素和重金属，预防癌症发生。

4、清除血液中的过敏源，预防过敏发生。

5、清除肝脏内毒素，提升肝脏的解毒功能。

6、修复受损的心肌和血管壁，预防心脑血管疾病。

(10)细胞过滤效果扩展阅读：

血液净化的优势：

1、通过高速离心血液中的大分子物质和全血分离开，有效祛除血液中的低密度胆固醇、甘油三酯，从而降低血脂血液的粘稠度。

2、通过仪器直接滤出血液中的病原体、炎症因子、重金属等毒素。

3、提高自身免疫功能，改善过敏和慢性炎症所致的疼痛症状。

4、清除血管内的垃圾，增加血管弹性和通透性。

5、修复血管内皮功能，改善机体血液循环。