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离子交换层析填料基质种类

发布时间: 2021-03-22 12:22:53

⑴ 关于离子交换色谱中弱阳离子交换的填料,只要是羧甲基(CM)的填料都行

这个我知道的也不多,我们公司代理的就有,TOSOH的,他的Toyopearl弱阳离子交换树脂,这个不错,资料有些,你要的话可以发给你,留个邮箱啥的

⑵ 离子交换层析可用于哪些种类蛋白质的分离

离子来交换层析是利用蛋白质在不同自PH带不同种电荷的方法,利用离子交换的方法分离蛋白的。
离子交换内的介质一般是树脂,阳离子交换型的,使用前树脂先用碱处理成钠型,将氨基酸混合液(pH=2-3)上柱,pH=2-3时,氨基酸主要以阳离子形式存在,与树脂上的钠离子发生交换而被“挂”在树脂上,再用洗脱剂洗脱。不同的氨基酸(带的电荷不同)与树脂的亲和力不同,要将其分离洗脱下来,需要降低它们之间的亲和力,方法是逐步提高洗脱剂的pH和盐浓度,这样各种氨基酸将以不同的速度被洗脱下来,反之亦然。

不同反荷离子与树脂亲和力是不同的,其强弱关系为阳性竞争离子:Ag+〉CS+〉K+〉NH4+〉Na+〉H+〉Li+ 阴性竞争离子:I->NO3->(PO4)3->CN-〉HSO3-〉Mg2+〉HCO3-〉HCOO-〉CH3COO-〉OH-〉F- 如果某种离子溶液洗脱效果不好,可用另一种亲和力强的离子代替之,等电点>7选择阳离子交换树脂,等电点<7选择阴离子交换树脂。

⑶ 离子交换层析中流出物质顺序是什么

若用离子交换层析分离物质,以蛋白质为例,离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂;而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。

由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。

反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质,结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。

(3)离子交换层析填料基质种类扩展阅读:

对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。

溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理,使之成为带H+或OH-的交换剂型。阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理,使最终转为-OH-型或盐型交换剂;对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理,使最终转为-H-型交换剂。

梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。

⑷ 怎么用离子交换层析分离等电点分别为4,6,7, 9 的蛋白质

6.洗脱:用含NaCL(0.2-0.6M)的0.02M
Tris-HCL
缓冲液
pH7.4(内含0.
等电聚焦电泳
(IEF)分离蛋白及测定
蛋白质等电点
一、原理
等电点聚焦
(IEF)

⑸ 按层析原理分类除了凝胶层析之外还有哪几类层析

免疫亲和层析
吸附物质与特异性配基配对到色谱基质上,且与配基间具有可逆的相互作用。
离子交换层析
吸附物质通过表面净电荷的差异,分别与带正负电荷的层析色谱结合。
疏水相互作用层析
根据吸附物质表面疏水性的不同,利用与疏水层析介质疏表面可逆的相互作用来实现分离。
凝胶过滤层析
根据分子通过凝胶填料大小不同对其进行分离。
反向层析
类似于疏水相互作用层析

⑹ 色谱柱的填料有哪些阳离子交换柱

阳离子是指功能基团,有很多选择,强阳弱阳;基质又有多种,主要可分为硅胶和聚合物,聚合物种类比较多,如PSDVB,聚甲基丙烯酸酯等。

⑺ 离子交换层析可用于哪些种类蛋白质的分离

离子交换层析是根据蛋白质所带电荷的差异进行分离纯化的一种方法。蛋白质的带电性是由蛋白质多肽中带电氨基酸决定的。

⑻ 需要一种离子交换层析膜,基质为纤维素膜(纸),配体为羧酸

用来做什么的啊 离子交换膜一般基质都是树脂,配体大多为磺酸的说

⑼ 聚合物填料色谱柱适合分离什么样品

液相色谱柱的分类:(按色谱固定相基质分)

一.硅胶基质:

1.反相色谱柱:

反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对较弱的官能团的键合相。

反相色谱所使用的流动相极性较强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。

样品流出色谱柱的顺序是极性较强组合最先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。

常用的反相填料有C18(ODS)、C8(MOS)、C4(B)、C6H5(Phenyl)等。

2.正相色谱:

正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(NH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。

由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性较强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强弱的组份最先被冲洗出色谱柱。

正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯仿(Chloroform),二氯甲烷(Methylene Chloride)等。

3.离子交换色谱柱:以磺化交联强阴/阳离子键合硅胶色谱柱,常用规格:强阴离子色谱柱(SAX),强阳离子交换色谱柱(SCX)

二 .聚合物基质:

聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等,其主要优点是在PH值为1~14均可使用。相对与硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的疏水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效较低。

三.其他无机填料:

其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质,一般仅限于特殊的用途。如石墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相,石墨化碳的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性,该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强,石墨化碳可用于分离某些几何导构体,又由于HPLC流动相中不会被溶解,这类柱可在任何PH与温度下使用。氧化铝也可用于HPLC,

氧化铝微粒刚性强,可制成稳定的色谱柱柱床,其优点是可在PH高达12的流动相中使用。

但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强,应用范围受到一定的限制,所以未能广泛应用,新型氧化锆填料也可用于HPLC,商品化的仅有聚合物涂层的多孔氧化锆微球色谱柱,应用PH范围1~14,温度可达100℃。由于氧化锆填料几年才开始研究,加之面临的实验难度,其重要用途与优势尚在进行中。

⑽ 我要分离纯化一种未知酶,一切未知,想用凝胶层析和离子交换层析分离,不知选用什么填料合适有好的建议

建议用离子交换层析。凝胶过滤层析流速慢,上样量低,而且分离效内果一般,凝胶过滤一般用容于层析的后期包括除盐,去除降解片段之类的。
离子交换一般就用到DEAE,因为大部分蛋白都偏酸。要是你的酶是碱性蛋白,那就更好办,上个CM柱,其他杂蛋白就留不下多少了。
所以先拿DEAE试试吧。

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