离子交换时
① 用离子交换法制备去离子水时 1,为什么树脂保持在液面以下,暴露在液面以上会有什么后果
如果是膜的话,全是保护树脂,流量过大可能会引起树脂破裂,暴露在空气中容易使树脂干裂,老化被氧化。
如果是颗粒的话,就是让水充分进行交换,流速就要慢了。
② 阳离子交换树脂时亲和力越大最先流出吗
亲和力强的复金属离子容易和制树脂结合(或吸附),也就是说,交换后的水,不会有亲和力强的金属离子。常见金属离子与强酸性阳离子交换树脂的亲和力顺序如下(从弱到强):
1)电荷数高,亲和力强:Na+ 、Ca2+ 、Fe3+
2)相同价态的离子,原子质量越大,亲和力越大:Fe3+大于AI3+;Ca2+大于Mg2+
③ 离子交换器停用一段时间后,重新启动时为什么先要正洗一下
以固定床离子交换器为例:在交换器停用一个时期后,交换器体内难免有反离子版现象出现,假如设备在运行前经权水质分析该水质指标不合格,此时最好开启与设备运行进水一至的正洗进水阀进水若干分钟后,再在正洗排水口取样进行水质指标分析合格后,设备停止正洗转入运行(制水),以上形式的操作,目的是不让不合格的水质进入中间水箱…。一杰水质
④ 蛋白质水解产物阳离子交换柱层析时的洗脱顺序
pI 10.76的那个应该带正电荷。阳离子交换柱本身带负电荷。
⑤ 将四种核苷酸吸附于阴离子交换柱上时,应将溶液调到什么 ph
① 电泳分离4种核苷酸时应取pH3.5 的缓冲液,在该pH时,这4种单核苷酸之间所带负电荷差异较大,回它们都向正极答移动,但移动的速度不同,依次为:UMP>GMP>AMP>CMP;
② 应取pH8.0,这样可使核苷酸带较多负电荷,利于吸附于阴离子交换树脂柱。虽然pH 11.4时核苷酸带有更多的负电荷,但pH过高对分离不利。
③ 当不考虑树脂的非极性吸附时,根据核苷酸负电荷的多少来决定洗脱速度,则洗脱顺序为CMP>AMP> GMP > UMP,但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之间存在着非极性吸附,嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3倍。静电吸附与非极性吸附共同作用的结果使洗脱顺序为:CMP> AMP > UMP >GMP。
⑥ 离子交换时常用的洗脱方式有哪些
再生剂方面:
软化钠床:浓度为5-8%的NaCl溶液,再生剂用量为树脂床层体积的3倍,再生液版接触时间大权于30分钟;
阳床(即氢床):浓度为4%的HCl溶液,再生剂用量为树脂床层体积的3倍,再生液接触时间大于30分钟;
阴床:浓度为4%的NaOH溶液,再生剂用量为树脂床层体积的3倍,再生液接触时间大于30分钟;
再生方式方面:
1)顺流再生
2)逆流再生
3)混床设备分同步再生(即上面进碱,下面进酸,计算准确流量,从中排口排出),两步再生(即先从上部进碱,从下部排除,然后从下部进酸,上部进水顶压,从中排口排出)。
⑦ 制作混合床离子交换树脂柱时在操作上要注意哪些问题
在混床树脂使用的过程中,阳树脂会释放出H+离子,而阴树脂释放出OH-离子,这两种两种会结合回成答为水,阳树脂失去一些阳离子之后,会呈负电性,而阴树脂失去阴离子,呈正电性,这两种树脂就会相互吸引,导致两种树脂成为团状物,并且不易分离,而且一些碎树脂末和悬浮物也会增加树脂的“抱团”作用,这就是树脂出现“抱团”的原因,树脂如果被油脂污染也会造成树脂的“抱团”现象。
应该如何解决?
1.当混床树脂出现“抱团”的现象时,就会导致树脂再生时不能很好的分层,所以一般在树脂分层时,会加入一定量的电解质,比如碱等物质,阳树脂就会与阳离子结合成为中性,而阴树脂则会与阴离子结合,也呈中性,“抱团”的树脂也会随之分离,所以一般混床树脂在分层时都会使用一定的碱,能够有效的改善阴、阳树脂的分层效果。
2.被油脂污染的树脂,可以使用非离子型表面活性剂为主的碱性清洗剂进行处理,对树脂进行清洗,能够有效的去除树脂上的油脂。
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⑧ 过离子交换柱时,pH梯度洗脱缓冲液一般用什么缓冲液
如果不限定纯化方法,可以考虑亲和层析或离子交换,但根据你问题的版意思,是选定离子交权换。
此时就要考虑你蛋白的等电点了,如果等电点在你稳定pH之上,就用阳离子交换柱:
设计阳离子交换层析:将你的样品置换到你所指的稳定pH的running buffer。同时装柱,平衡,然后上样,平衡,洗脱(因为你的pH不稳定,建议盐洗脱),收峰。得你的蛋白;
如果你的等电点在稳定pH之下,就用阴离子交换柱,其步骤如上,只是改变柱子类型。
⑨ 用离子交换剂测定蛋白质的等电点时,为什么一定要用强性离子交换剂
选用来纤维素离子交换自剂。因为蛋白质不能扩散到树脂的链状结构中,而纤维素离子交换剂交换容量大。选用ph为5.0的磷酸盐缓冲溶液和强酸型阳离子交换剂如SE-纤维素。装柱氢氧化钠处理,0.1mol/L起始缓冲液平衡,上样,吸附目标蛋白,0.15mol/L缓冲液洗脱,之后再选用ph6.5,8.0的缓冲液梯度洗脱。等电点=4.0的蛋白质在5.0缓冲液中带负电,不能被吸附,直接分离。随后6.0的蛋白质被洗脱出来。再用ph6.5,8.0的缓冲液梯度洗脱。
⑩ 离子交换时都是阳离子与阴离子等价交换吗
水溶液中的一些阳离子进入反离子层,而原来在反离子层中的阳离子进入专水溶液,这属种发生在反离子层与正常浓度处水溶液之间的同性离子交换被称为离子交换作用。离子交换主要发生在扩散层与正常水溶液之间,由于黏土颗粒表面通常带的是负电荷,故离子交换以阳离子交换为主,故又称为阳离子交换。离子交换严格服从当量定律,即进入反离子层的阳离子与被置换出反离子层的阳离子的当量相等。