多肽离子交换
Ⅰ 多肽是如何纯化的
“对多肽纯化常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是多肽类物质分析中常用的手段。”
Ⅱ 离子交换的原理是什么,简述其在食品工业中的利用
离子交换,可以把水中呈离子态的阳、阴离子去除,以氯化钠(NaCl)代表水中无机盐类专,水质除盐的基本反属应可以用下列方程式表达:
1、阳离子交换树脂:R—H+Na+ R—Na+H+
2、阴离子交换树脂:R—OH+Cl- R—Cl+OH-
阳、阴离子交换树脂总的反应式即可写成:
RH+ROH+NaCl——RNa+RCL+H2O
可看出,水中的NaCl已分别被树脂上的H+和OH-所取代,而反应生成物只有H2O,故达到了去除水中盐的作用.
食品工业的运用主要包含制糖脱色,掩苦剂,水体除氨氮,硝酸盐,饮用水除铁,玉米糖浆催化,酶,多肽,和蛋白质分离,有机酸纯化,饮料除砷等等。
Ⅲ 如何选择离子交换层析的离子交换剂和缓冲液
离子交换层析是根据蛋白质所带电荷的差异进行分离纯化的一种方法。
蛋白质的带电性是由蛋白质多肽中带电氨基酸决定的。
由于蛋白质中氨基酸的电性又取决于介质中的pH,所以蛋白质的带电性也就依赖于介质的pH。
Ⅳ 请教关于离子交换树脂的使用
一、离子交换抄树脂袭的预处理:
离子交换树脂在使用之前,为了防止树脂内含有杂质,对水质造成污染,需要对树脂进行预处理,以下是预处理的步骤:
1.首先使用热水对树脂进行清洗,阳树脂可以使用70-80℃的热水清洗,阴树脂的耐热性较差,一般使用50-60℃的热水,每隔15分钟左右需要更换热水,4-5次之后可以每隔30分钟左右更换热水,总共需要7-8次左右,直至出水清澈为止。
2.使用浓度为5%的氯化氢浸泡树脂,大概浸泡4-8小时左右,然后将水排放,对树脂进行清洗,直至出水为中性为止。
3.再使用浓度为2-4%的氢氧化钠浸泡树脂,浸泡时间与上一步相同,然后将水排放,对树脂进行清洗,直至出水为中性为止。如此重复2~3次,每次用量为树脂体积的2倍。
4.阳树脂最后一次浸泡需要使用浓度为5%的氯化氢,用量加倍效果更好。放尽酸液,用清水淋洗至中性即可。
5.阴树脂最后一次浸泡需要使用4~5%的NaOH溶液,用量加倍效果更好。放尽碱液,用清水淋洗至中性即可。
Ⅳ 多肽纯化的方法有哪些
对多肽纯化常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点专沉淀法、离子交换层属析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是多肽类物质分析中常用的手段。
Ⅵ 离子交换层析的原理是什么 已解决
离子交换层析法是从复杂的混合物中,分离性质相似大分子的方法之一,依据版的原理是物质的酸碱性,极权性,所带阴阳离子的不同。电荷不同的物质,对管柱上的离子交换剂有不同的亲和力,改变冲洗液的离子强度和pH值,物质就能依次从层析柱中分离出来。
层析开始前,功能基团与反离子稳定结合,就与反离子发生可逆交换,与层析剂结合被固定下来。因为盐离子可以与底物竞争功能基团,盐浓度越高样品与层析剂结合越不紧密,易被洗脱下来。不同物质与层析剂结合程度不同,洗脱下来的时间不同,因此得以分开。
(6)多肽离子交换扩展阅读
离子交换剂的选择首重保持欲分离物质的生物活性,以及在不同pH值环境中,此物质所带的电荷和电性强弱,阴阳离子交换剂的选择若被分离物质带正电荷,这些碱性蛋白质,它们在酸性溶液中较稳定,亲和力强,故采用阳离子交换剂。
在碱性溶液中较稳定,则使用阴离子交换剂,如果欲分离的物质是两性离子,一般考虑在它稳定的pH范围带有何种电荷,作为交换剂的选择。离子交换剂的再生与保存离子交换剂可在柱上再生,若有脂溶性物质则可用非离子型去污剂洗柱后再生,也可用乙醇洗涤。
Ⅶ 您好,请问一下可以用离子交换树脂来对蛋白水解液脱盐吗,蛋白水解液主要含钠离子,氯离子,多肽。
离子交换树脂可以很轻松去除掉水解液中的盐,Na离子也是非常好脱除,使回用H型交换;Cl离子可使用阴离子树脂答OH型交换。
使用离交树脂对于多肽确实有一定的去除,尤其是强酸和强碱树脂;
多肽的脱除一般是在一定PH值范围内,这取决于氨基酸的等电点,大部分氨基酸在强酸环境下是很容易被干掉的。
Ⅷ 多肽固相合成法的分析
分析HPLC使用柱子和泵系统,可以经受传递高压,这样可以用极细的微粒(3-10μ m)做填料。由此多肽要在几分钟内高度被分析。
HPLC分两类:离子交换和反相。离子交换HPLC依靠多肽和固相间的直接电荷相互作用。柱子在一定PH范围带有特定电荷衍变成一种离子体,而多肽或多肽混合物,由其氨基酸组成表现出相反电荷。 分离是一种电荷相互作用,通过可变PH, 离子强度, 或两者洗脱出多肽,通常,先用低离子强度的溶液,以后逐渐加强或一步一步加强,直到多肽从柱中洗脱出。离子交换分离的一个例子使用强阳离子交换柱。如sulfoethylaspartimide通过酸性PH中带正电来分离。
反相HPLC条件与正常层析正相反。多肽通过疏水作用连到柱上,用降低离子强度洗脱,如增加洗脱剂的疏水性。通常柱子由共价吸附到硅上的碳氢烷链构成,这种链长度为G4-G8碳原子。由于洗脱是一种疏水作用。大的疏水肽用短链柱洗脱好。 然而,总体实践中, 这两类柱互变无多少显著差别,别类载体由碳水化合物构成, 比如苯基。
典型的操作常由两绶冲剂组成,0.1%TFA-H2o和80% acetonitrile0.1%TFA--H2o稀acetonitrile。用线型梯变以每分钟0.5%到1.0%改变的速度混合。常见分析和纯化用柱为4.6×250mm(3-10μ m)和22×250mm(10μ m). 如果用径向填柱,那么大小是8×100(3-10μm)和25×250mm(10μ m)。
大量各种缓冲剂含许多不同试剂,比如heptafluorobutyric酸,0.1%磷酸,稀He formic酸(5-6%, pH2-4), 10-100mM NH4HCO3,醋酸钠/氨,TFA/TEA,磷酸钠或钾,异戊酚。这样许多不同组合可形成缓冲剂,但要注意一点:硅反相柱料不能长时间暴露于高pH,甚至微碱pH,因为这样会破坏柱子。
Fmoc―氨基酸的制备和侧链保护
Fmoc基团是在有NaHCO3或Na2CO3存在的二氧六环溶液中,理想的Fmoc-氨基酸的侧链保护基应在碱性条件下稳定,在酸性条件下脱除..
Ⅸ 怎么除掉多肽中TFA盐或将其转换成醋酸盐
多肽转盐或者除盐一般建议选择离子交换填料进行,对于填料选择需要有针对性,一般填料会对多肽进行吸附,经常在转盐的过程中遇到多肽洗不下来的情况。因此一般会选取经过改性离子色谱进行转盐。针对不同多肽,转盐有两种情况,一种是过柱直接交换离子达到转盐目的,一种是多肽挂柱,经过相关盐溶液过柱转盐后再使用相应溶媒将多肽洗涤下来已达到转盐的目的。
Ⅹ 多肽和寡肽的区别
1、营养价值不同
多肽:牛乳中的酪蛋白具有较强的抗变异能力,能减少癌变。。
其次,乳中必需氨基酸的量与人类所需的最适氨基酸量关系十分密切。因此,乳蛋白质最好的应用可作为植物性蛋白质的补充,从而发挥其富含必需氨基酸的优点,强化混合食品的营养价值。
寡肽:乳清中富含半胱氨酸和蛋氨酸,它们能维持人体内抗氧化剂的水平。
其次,乳清蛋白中脂肪、乳糖含量低,但它含有β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、免疫球蛋白,还有其他多种活性成分。正是这些活性成分使乳清蛋白具备了有益于人体的诸多保健功能。
2、形成途径不同
多肽:乳中蛋白质的形成主要是经两个途经,一个途径是由血清蛋白转移而来。另一途径是由乳腺上皮细胞从血清中吸收的氨基酸和葡萄糖转化的氨基酸合成而来。
寡肽:美国早在1990年采用离子交换法从乳清中分离乳清蛋白。
生物选择吸附、亲和色谱提纯法及反相胶束萃取法等都是开发的新的分离乳清蛋白成分的方法。
3、生理功能不同
多肽:调节机体免疫功能、抗氧化作用、调节铁离子的吸收。
寡肽:延缓或者构筑肌肉、延缓疲劳的产生、保护免疫细胞功能。
参考资料来源:网络-寡肽
网络-多肽