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多糖离子交换

发布时间: 2020-12-21 22:55:22

Ⅰ 生物多糖提取已经经过了粗提,离子交换柱层析,浓缩中却出现了絮状沉淀,但搅拌下可溶解,沉淀是什么

粗提是除去大部分固体杂质,离子交换是去除一些盐类物质,浓缩时出现的杂质可能是一些粗体时没有去除干净的杂质,知识在很稀的时候看不到。也有可能是柱子没洗干净,树脂中的杂质!

Ⅱ 高血钾枸杞子能吃吗

可以!降血糖:枸杞提取物可显著而持久降低大鼠血糖,增加糖耐量,且毒性较小。 另外,本品还有抗肿瘤、促进造血功能等作用。补肾功能:李晓玫、王海燕、李丽英、毛亚文、韩可汉、耿琳、韩进、李美花、张晓英、余霞君在老年鼠肾线粒体的老化及其药物防护中论述道:通过观察应用枸杞多糖、维生素E-C合剂等抗衰老药物后,老年鼠肾细胞线粒体超微结构、ATP合成量以及脂质过氧化产物丙二醛水平的改变,发现老年鼠肾线粒体的结构和功能变化伴随着自由基代谢产物丙二醛的增高,老年鼠肾细胞线粒体ATP合成量为120.38nM/mgPrmin±16.72nM/mgPrmin,较青年组低18.75nM/mgPrmin;而肾组织丙二醛为 30.40μg/100mg±6.66μg/100mg湿重,是青年组的2.4倍。长期服用维生素E-C合剂或枸杞多糖均可在一定程度上起到对抗自由基的作用,使肾组织丙二醛水平下降,预防线粒体老化,使其功能有所改善。 滋补肝肾佳品枸杞子。枸杞子从诗经“集于苞杞”时起,便用于医药,迄今已有3000余年的历史。枸杞子之名始见于《神农本草经》,并列为上品,千百年来深受人们的喜爱。晋朝葛洪单用枸杞子捣汁滴目,治疗眼科疾患;唐代孙思邈用枸杞子配合其他药制成补肝丸,治疗肝经虚寒,目暗不明;唐代李梃《医学入门》中的五子衍宗丸,就是用枸杞配合菟丝子等做成蜜丸,用淡盐水送服,治疗男子阳痿早泄、久不生育,须发早白及小便后余沥不禁。枸杞子在增强性功能方面的具有独特的作用,我国民间流传甚广的“君行千里,莫食枸杞”的名言 ,就是讲枸杞具有很强的激发性功能的作用,对离家远行的青年男、女不宜。但是,对于在家的男女和那些性功能减弱的人来说,多食枸杞或其制品,又是非常必要的。对于肾虚的人,枸杞子无疑是最受欢迎的美味与妙药,更是一种不可多得的保健营养品。大诗人陆游到老年,因两目昏花,视物模糊,常吃枸杞治疗,因此而做“雪霁茅堂钟磬清,晨斋枸杞一杯羹”的诗句。枸杞子是古今养生的最佳选择,有延年益寿之功。历代医家着重于枸杞子的滋补肝肾作用,近年来人们对枸杞子的化学成分和药理作用有了进一步的认识,在临床上扩大了其使用范围。病情分析:
血清钾离子>5 mEq/L称为高钾血症,6~7 mEq/L为中度高钾血症,大于7 mEq/L为严重高钾血症.高血钾最常见的原因是肾衰,症状为乏力,心律失常等.
意见建议:
首先应纠正病因,减少钾的来源:如停用含钾的食物或药物;供给高糖高脂饮食或采用静脉营养,以确保足够热量,减少体内分解代谢所释放的钾;清除体内积血或坏死组织;避免使用库存血;减少感染,减少细胞分解.治疗脱水,酸中毒等.纠正酸中毒静脉注射11.2%乳酸钠溶液或5%碳酸氢钠溶液100ml,重危病犬也可向心腔内注射10~20ml,除纠正酸中毒外还有降低血钾的作用.降低血钾静脉注射25%葡萄糖溶液200m1加胰岛素10~20U,以促使钾由细胞外转入细胞内.为排除体内多余钾,可应用阳离子交换树脂口服或灌肠,如环钠树脂,每天20~40g,分3次使用,以促进排钾.对肾功能衰竭所引的高血钾,可采用腹膜透析疗法.解除高钾对心肌的有害作用可反复静脉注射10%葡萄糖酸钙溶液或氯化钙溶液5~10ml,因为钙可拮抗钾对心肌的作用.透析适合急重症者伴肾衰竭时,以血液透析为最佳,也可以使用腹膜透析. 如何预防高血钾症:1.避免摄取高钾食物例如代盐、咖啡、浓茶、肉汤、鸡精、蜜饯、龙眼干等。2.蔬菜水煮三分钟再炒;薯类切片后泡水20分钟后汁液倒掉不用。竹笋、菜汤及肉汤均为一般人所偏好之食物,请节制食用。3.高钾水果有柳丁、香蕉、芭乐、蕃茄、硬柿、枇杷、桃子和奇异果。 杨桃因有特殊的副作用,因此,绝对不可食用。西瓜因为容易食用过量,虽钾离子不高,仍需限制在每日半斤以内。4.胃口好的患者必须特别注意饮食中钾的摄取。5.食欲不振发高烧病患要注意足够热量的摄取。6.防止便秘,养成每天上大号的习惯。7.按时接受每周2--3次血液透析,不可无故延期。

Ⅲ 纯化多糖时,纤维素和纤维素阴离子交换柱的区别

库仑首宰 youtuoh142

Ⅳ RNA的测序原理及方法!^~^

细胞中的RNA可以分为信使RNA、转运RNA和核糖体RNA三大类,不同组织总提取的实质就是将细胞裂解,释放出RNA,并通过不同方式去除蛋白,DNA等杂质,最终获得高纯度RNA产物的过程。

RNA 提取流程
1. 样品处理
从各种不同来源样品(如细菌、酵母、血液、动物组织、植物组织和培养细胞),或同一来源样品的不同组织(如植物幼嫩叶片、成熟根、茎等)中提取高质量的RNA,因细胞结构及所含的成分不同,样品预处理的方式也各有差异。
样品的要求:
最好使用新鲜的样品或取样后立即在低温(-20℃或-70℃)冷冻保存的样品,避免反复冻融,因为这会导致提取的RNA降解和提取量下降。
样品预处理方式:
植物材料-液氮研磨
动物材料-匀浆、液氮研磨
细菌-溶菌酶破壁
酵母-液氮研磨、玻璃珠处理、混合酶破壁
2. 细胞裂解
异硫氰酸胍/苯酚法(TRIZOL)
这是一种传统的RNA提取方法,适用于大部分动植物材料,但对于次生代谢产物较多的植物材料提取RNA效果较差。异硫氰酸胍能使核蛋白复合体解离,并将RNA释放到溶液中,采用酸性酚-氯仿混合液抽提,低PH值的酚将使RNA进入水相,而蛋白质和DNA仍留在有机相,从而可以完成RNA的提取工作。
该法应用非常广泛,适用于包括动物组织、微生物、培养细胞等在内的各类动物性材料,同时还适用于次生代谢物较少的植物性材料,如幼苗、幼叶等。该法主要应用在动物组织和培养细胞的RNA提取中。
胍盐/ β- 巯基乙醇法:
适用于各种不同动物材料和次生代谢物少的植物材料。
在这种方法中,胍盐使细胞充分裂解,β-巯基乙醇作为蛋白的变性剂在实验全程中可以抑制RNaseA的活性,保护RNA不被降解。
我公司的“GREEN ”系列总RNA 提取试剂盒是基于这种方法开发的产品,分别适用于各类不同的材料。此系列产品的具体实验步骤和适用范围在实验技术手册中有详细介绍,实验者可根据自己的需要进行选择。
其它方法:
有些植物材料多糖多酚含量较高,如植物果实,番茄的叶子等,有些植物木质化程度较高,如根茎等组织。针对这类材料本公司推出了一种全新的植物总RNA提取试剂,该试剂特别适合于从富含多糖、多酚、淀粉的材料中提取纯度高、完整性好的总RNA,有关的具体步骤将在分论中详细介绍,实验者可根据自己的需要进行选择。

3. RNA 纯化及获得
纯化要求
RNA样品中不应存在对酶(如逆转录酶)有抑制作用的有机溶剂和过高浓度的金属离子。避免其它生物大分子如蛋白质、多糖和脂类分子的污染。排除DNA分子的污染。
纯化方法及沉淀
方法一:有机溶剂抽提法
氯仿抽提
在使用RNA提取试剂进行RNA提取时,常使用氯仿进行抽提,以去除蔗糖、蛋白等杂质,并促进水相与有机相的分离,从而达到纯化RNA的方法。在本公司的提取RNA的产品中,与TRIzol同型试剂法及其衍生试剂盒。
沉淀
氯仿抽提RNA后,一般采用了异丙醇或乙醇来沉淀水相RNA。加入0.6倍水相体积的异丙醇或与水相等体积的异丙醇,室温沉淀20-30分钟,高速离心,可获得RNA沉淀。
洗涤沉淀
加入无RNase的75%乙醇,将RNA沉淀振荡悬浮,使RNA沉淀中的盐离子被充分溶解。然后再离心10-30分钟。再次沉淀RNA。离心后,小心倒掉上清(注意不要倒出RNA沉淀),随后快速离心1-2秒,将残留在管壁上的乙醇手机到管底后,用小枪头吸净,超静台中风干1-2分钟(注意不要晾得太干,否则RNA沉淀不易溶解)。
溶解沉淀
加入适量RNase-free ddH2O溶解RNA沉淀。
方法二:硅基质吸附法
随着实验方法的改进,现已发展出一种采用吸附材料纯化核酸的方法。目前较常见的有:硅基质吸附材料、阴离子交换树脂和磁珠等。硅基质吸附材料因其具有可特异吸附核酸,使用方便、快捷、不使用有毒溶剂如苯酚、氯仿等优点,成为核酸纯化的首选。
本公司生产的总RNA提取试剂盒(ZP403-ZP407)和GREENspin系列总RNA提取试剂盒即采用硅基质吸附达到RNA分离纯化目的,通过专一结合RNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,使样品在高盐条件下与硅胶膜特异结合,而蛋白、有机溶剂等杂质不能结合到膜上而被洗脱,盐类则被含有乙醇的漂洗液洗涤,最后用RNase-free ddH2O将RNA从硅胶膜上洗脱下来。

Ⅳ 离子交换提取蛋白质为什么用多糖基离子交换剂

钛白复粉(二氧化钛TiO2)化学性质稳定,在一制般情况下与大部分物质不发生反应。在自然界中二氧化钛有三种结晶:板钛型、锐钛和金红石型。板钛型是不稳定的晶型,无工业利用价值,锐钛型(Anatase)简称A型,和金红石型(Rutile)简称R型

Ⅵ 离子交换纯化多糖使用什么方法检测收集

离子交换纯化多糖使用什么方法检测收集
鉴定多糖(参考资料):
1.苯酚-硫酸法 需要多糖的纯品和特定的酶
2.蒽酮-硫酸法 多糖在浓硫酸水合产生的高温下迅速水解,产生单糖,单糖在强酸条件下与苯酚反应生成橙色衍生物。在波长490nm左右处和一定浓度范围内,该衍生物的吸收值与单糖浓度呈线性关系,从而可用比色法测定其含量,所用的单糖对照品尽量采用与其多糖组成一致或为含量较高的单糖,这样测得的值较准确。
3.3,5-二硝基水杨酸比色法(DNS法) 在碱性条件下显色,较准确测定还原糖与总糖的含量从而求出多糖的含量,可消除还原性杂质的干扰。

多糖的分离纯化
在多糖提取物中,常会有无机盐、蛋白质、色素及小分子物质等杂质,必须分别除去.一般是先脱除非多糖组分,再对多糖组分进行分级.
2.1 除蛋白:除蛋白质时一般选择能使蛋白质沉淀而不使多糖沉淀的试剂来处理,如酚、三氯乙酸、鞣酸等。但必须处理时间短,温度低,避免多糖降解。Sevage法(氯仿:戊醇/丁醇=4:1)和三氟三氯乙烷法在避免降解上有较好效果但要达到除尽游离蛋白质的目的仍需反复处理。如能加入蛋白质水解酶,使蛋白质大分子进行一定程度的降解,再用Sevage法处理,一般效果更好。
为了避免使用有机溶剂也可采用反复冻融的方法除蛋白,将多糖液浓缩后,一20℃室温反复冻融7~8次,离心除去蛋白质。另外,蛋白质在等电点时溶解度最小,用氢氧化钙饱和液调pH10~pH11可除去偏碱性的蛋白质,然后再用硫酸调pH5~pH6,可除去偏酸性的蛋白质。冻融和等电点沉淀除蛋白质操作简单,但多糖液里往往有低浓度的蛋白质残留,应与其它方法结合使用。
2.2 脱色:植物多糖提取物中含有酚类化合物而使其颜色较深,可用吸附剂(纤维素、硅藻土、活性炭等)、离子交换柱(DEAE一纤维素)、氧化剂(H2O2)等脱除。活性炭比表面积大,吸附能力强,在进行当归多糖的提取时只向多糖液中加入了0.1%左右的活性炭,煮沸后滤过即完成了脱色操作。此法成本低廉,适合工业化生产。
2.3 除小分子杂质
小分子杂质如低聚寡糖的残留往往影响多糖的生物活性,需要进一步脱除,提高纯度。传统的方法是透析法,该法操作简单、技术成熟,但周期长,往往需要2一3天,常温下操作有可能造成多糖的霉变,必要时需加入少量防腐剂或需在低温条件下进行。随着膜分离技术的发展,纤维滤器透析法已经发展起来了,它利用不同孔径的膜使大小不同的分子分级,这种方式可缩短生产周期,而且条件温和,无疑是多糖脱除杂质的一条新途径。
2.4 多糖的分级纯化
采用一般方法提取的多糖通常是多糖的混合物,分级的方法可达到纯化的目的.可按溶解性不同进行分级、按分子大小和形状分级(如分级沉淀、超滤、分子筛、层析等),也可按分子所带基团的性质分级.
2.4.1按溶解性不同分离
2.4.1.1分步沉淀法
分步沉淀法是根据不同多糖在不同浓度低级醇、酮中具有不同溶解度的性质,从小到大按比例加入甲醇或乙醇或丙酮进行分步沉淀.
2.4.1.2 盐析法
盐析法是根据不同多糖在不同盐浓度中溶解度不同而将其分离的一种方法。常用的盐析剂有氯化钠、氯化钾、硫酸铵等,其中以硫酸铵最佳。
2.4.2 按电离性质不同分离
2.4.2.1季胺盐沉淀法
季胺氢氧化物是一类乳化剂,能与酸性多糖形成不溶性化合物季铵络合物,此络合物在低离子强度的水溶液中不溶解而产生沉淀。若提高多糖液pH值或加入硼砂缓冲液,也可使中性多糖沉淀分离。常用季铵盐有十六烷基三甲基季铵盐的溴化物及其氢氧化物和十六烷基吡啶。
2.4.3 柱层析法
2.4.3.1凝胶柱层析法
凝胶柱层析法常用的凝胶有葡聚糖凝胶(Sephadex)和琼脂糖凝胶(Sepharose),以不同浓度的盐溶液和缓冲溶液作为洗脱剂,从而使不同大小的多糖分子得到分离纯化,但不适宜粘多糖的分离。
2.4.3.2纤维素阴离子交换剂柱层析法
纤维素阴离子交换剂柱层析法常用的交换剂为DEAE一纤维素和ECTEOLA一纤维素,分类硼砂型和碱型两种,洗脱剂可用不同浓度碱溶液、硼砂溶液、盐溶液,其优点可吸附杂质、纯化多糖,并适用于分离各种酸性、中性多糖和粘多糖。如百合多糖、北沙参多糖、太子参多糖等。
2.4.3.3 活性炭柱层析法
活性炭吸附量大、效率高,是分离水溶性物质的常用吸附剂。柱层析时活性炭中常拌入等量的硅藻土作稀释剂,以增加溶液的流速。糖溶液上柱后先用水洗脱无机盐、单糖等再依次增加乙醇浓度进行洗脱。
2.4.3.4 离子交换柱层析和普通凝胶柱层析联用法
有些植物的多糖成分复杂, 除中性多糖外,还含有糖醛酸等,因此往往两种不同性质的色谱柱联用才能得到单一多糖组分。
2.4.3.5 三种层析柱联用
采用离子交换葡聚糖凝胶柱、丙烯葡聚糖凝胶柱和葡聚糖凝胶柱三者联用,即先进行DEAE—SephadexA柱层析,用蒸馏水洗脱。水洗组分进一步用SephacrylS柱层析,得到主要组分再用SephadexG一100柱层析,有时会有较高的得率。
三、多糖的纯度鉴定
经过分级纯化的多糖在测定结构前须进行纯度鉴定.而且多糖的纯度不能用通常化合物的纯度标准来衡量,因为即便是多糖纯品,其微观也并不均一,仅代表相似链长的多糖分子的平均分布,通常所谓的多糖纯品也只是一定相对分子质量范围的多糖的均一组分.目前常用于多糖纯度的鉴定方法有:高效液相、 凝胶层析法、电泳法、色谱法、旋光度法等.

多糖的单糖组分的鉴定称取多糖粗品8 mg,用2 mL浓度为1 mol/L硫酸100*C水解6 h。饱和Ba(OH)2中和至中性,抽滤,取滤液,浓缩,毛细管点样,薄层层析法分析。采用硅胶G板105"(2活化2 h后使用。标准糖分别为D一半乳糖,D一葡萄糖,D一甘露糖,L一山梨糖、L一阿拉伯糖。展开剂为正丁醇一冰醋酸一水(4:1:5)(体积比)。用AgNO3一NaOH 溶液显色。

Ⅶ 离子交换提取蛋白质为什么用多糖基离子交换剂

离子交换柱中以多糖链(如葡聚糖)作为载体连接臂,在多糖分子末端通过化专学反应连接具有交换属作用的离子交换剂。这样的做法旨在增大离子交换的柔性以及减小离子交换过程中目的吸附物质相互间的空间位阻;另外多糖的带电性以及解离性比较稳定,产生的非特异吸附较少。

Ⅷ DEAE-52离子交换色谱柱精制多糖 在加洗脱剂前会不会有多糖出来

这个理论上来说是不会有多糖出来的,但是实际上会有很少的部分会流出,这取决于吸附剂的多少,和能力的强弱

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