密理博超滤管如何保存

1. 超滤膜的清洗保存

超滤膜清洗的方法主要有两点要注意：一是必须事先弄清楚污染物的组成及污染性质。二是如能用清水冲洗，应尽量用清水冲洗。只有当清水冲洗达不到理想效果时，才考虑用化学清洗方法。为此超滤膜的清洗，又可分为物理清洗法和化学清洗法两种。
1、物理清洗法：在这方面用的最多最普遍的就是水力冲洗法。它又可因水力冲洗方向的不同，分为逆向冲洗、反冲洗和正洗冲洗。
(1)逆向冲洗：用原水冲洗膜内和进水端面的杂质。
(2)反冲洗：用超滤水从膜块表面的污染物冲松散、剥落，分别从进水口和浓缩口排出(可加酸、碱或次氯酸钠等药品加强清洗效果)。
(3)正洗冲洗：用原水冲洗膜内和端面的杂质，按运行状态将超滤膜清洗干净。
2、化学清洗法：
根据膜表面污染物质的种类，选择适当的化学药品与之进行溶解、氧化或其他化学反应达到去除的目的。常用的化学药品的选择必须根据膜材料的性质选择，如酸类、碱类、氧化剂、杀菌剂、表面活性剂以及加酶洗涤剂等。进行方法与正常超滤过程相同，清洗液自原液入口处进入，浓缩液及超滤液全部返回清洗液容器，循环后排放，以净水洗净即可。
超滤膜的保存
1、短期保存：超滤膜如暂停使用时(少于10天时间)应对超滤膜杀菌反冲洗一次，在反冲洗水中加入杀菌剂后再将超滤膜的进水阀、排放阀和调节阀关闭，保持超滤膜的密封和灭菌作用。
2、长期保存：超滤膜如长期停止使用时(超过10天)，先对超滤膜进行杀菌反冲洗一次，然后在超滤膜内注入保护液后密封保存。

2. 超滤离心管怎么使用

蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作，用黄枪头（200ul）取，轻轻顺着边缘插入枪头，轻轻吹打、混匀蛋白液，注意不要碰到超滤膜，然后吸取浓缩液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取，否则难度太大，有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中，没过超滤膜，防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管，重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次，【若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用枪头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液，室温放置20min，期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗，内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯，加至接近满的MilliQ水，50ml管也加满MilliQ水，将管芯慢慢放入50ml
离心管，排出部分水，然后盖上盖子，放4度保存，直到下次使用。一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。

3. 超滤浓缩离心管使用前要怎么处理

可能不同厂家的产品保存运输条件不一样。
如果有甘油等保护剂，那就一定要洗干净内再加样容品。
干的超滤管也要先润湿再用，否则可能不能完全利用膜面积。
最好，用样品buffer润洗下再加样，最大程度保证蛋白活性。尤其是用过后保存在NaOH或乙醇中后。
一般还是离心机甩一下好，使膜充分浸润。

降低吸附的办法有：
1，蛋白浓度不要过低
2，尽量选用纤维素的低吸附超滤管
3，用前可以用Tween 80等去垢剂润洗（不影响蛋白活性的前提下）
4，加入保护蛋白，如BSA(不影响蛋白后续使用的前提下)

用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止长菌，依不同样品可以重复使用不同的次数。

4. 如何正确的选择pall的超滤管

你看你要截留那部分物质，就选择比最小分子量小的，如果你要截留26KD的，你专要的超滤管就属要比26小。但两者也要有一定的差距，比如，选择20-25KD之间的就不合适，因为26的也可能会出去（这是由制造工艺决定的）。所以选择20KD以下的超滤管比较合适。

5. 如何选择超滤管

你看你要截留那部分物质，就选择比最小分子量小的，如果你要截留专26KD的，你要的超滤管就要比属26小。但两者也要有一定的差距，比如，选择20-25KD之间的就不合适，因为26的也可能会出去（这是由制造工艺决定的）。所以选择20KD以下的超滤管比较合适。

6. 有机管式超滤膜如何保养

超滤膜的保养主要是定期用纯净水进行反冲，然后保持阴干就可以了。

7. 求助：第一次使用超滤离心管应该怎么处理

可能不同厂家的产品保存运输条件不一样。
如果有甘油等保护剂，那就一定要洗干净再加版样品。
干的超权滤管也要先润湿再用，否则可能不能完全利用膜面积。
最好，用样品buffer润洗下再加样，最大程度保证蛋白活性。尤其是用过后保存在NaOH或乙醇中后。
一般还是离心机甩一下好，使膜充分浸润。

降低吸附的办法有：
1，蛋白浓度不要过低
2，尽量选用纤维素的低吸附超滤管
3，用前可以用Tween 80等去垢剂润洗（不影响蛋白活性的前提下）
4，加入保护蛋白，如BSA(不影响蛋白后续使用的前提下)

用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止长菌，依不同样品可以重复使用不同的次数。

8. millipore 超滤管区别

1、装量：0.5ML 4ML 15ML
2、截留分子量3K 10K 30K 50K 100K

9. 想问一下超滤离心管怎么使用啊还有它能不能重复使用

可以的,先用超声波洗干净,再用高压灭菌锅灭菌后,备用即可