胎牛血清可以过滤吗
㈠ 胎牛血清(FBS)的主要作用有哪些,生命科学方面的文章哪里有
1、提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以回及主要的低分子答营养物。 2、提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。 3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。 4、是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。 5、起酸碱度缓冲液作用。 6、提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。更多这方面的知识可以登录生物帮了解一下! http://www.bio1000.com/news/1/ 生物帮快讯,生物新闻快讯,生物科技,生命科学,科研进展。
㈡ 碳吸附胎牛血清可以用普通的血清代替吗
活性炭能够结合脂溶性分子,因此能够用来除去激素类物质,例如,胎牛血清中专的雌二醇、孕酮属、皮质醇、睾酮及T3和T4分子。活性炭吸附胎牛血清就是用于培养体外培养验证激素作用。你用普通的血清它们成分不一样了,会对细胞有影响。厚百提供。
㈢ 如何检测培养基里有无胎牛血清
培养基的选择:
细胞培养是实验室里最常见和最基本的实验了,但却不是最简单的。别小看细胞培养,这里可蕴含着大学问。有时候细胞状态不好,转染、药筛这些实验根本就没办法做。影响细胞培养的因素很多,让我们先从培养基和血清说起。
◆ MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度。
◆ 改良的BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。最初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了。
◆ aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞。
◆ Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。
◆ RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
准备几种培养基,然后花大约两周的时间做一个简单的细胞生长实验,来选择其中最适合的。
以前大部分实验室都是用干粉培养基,但配制过程就较为繁琐,要溶解、调pH值,过滤,过程中可能会产生一些浓度误差,而且有些实验室的水质并不理想,所以培养的效果会有差异。
血清的选择:
血清含有生长因子可促进细胞的繁殖,含有附着因子可促进细胞的贴壁,同时还具有抗胰酶活性。血清同时也是矿物质、脂类及激素的来源。最常用的血清有小牛血清、新生牛血清、胎牛血清和马血清等。牛血清是按照采血时间的早晚来分类的。采血时间越早,营养物质越丰富,所含抗体也越少,因而胎牛血清适合要求高的细胞系和克隆化培养。
而血清批次间的差别就是不可避免的,这种差异来源于不同的制备方法和除菌方法、动物的年龄差别及血清的储存条件等,而且与取血动物的来源关系密切。不同的牧场、不同的气候天气及其他环境因素都可能影响血清的质量。因此选好了一种血清就要尽可能长期使用它。在需要更换时,也要尽量保持与原有的一批血清相似。现在很多公司都提供血清预留,你一旦选定了某个批次的血清,最好备足一年的量,这样可以避免很多麻烦。
血清固然是细胞培养中不可或缺的成分,但血清的批间差异大,更换血清时需要做大量的测试以取保替换的血清与原来的相似。而血清的供应也是必须要考虑的因素。
无血清培养基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顾名思义,就是在细胞培养中不需要添加血清,但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等,能减少上述血清带来的不利因素,使细胞培养的条件更稳定。但它也不是完美的,从有血清培养过渡到无血清培养的条件并不像想象中那么直截了当。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方,对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。而且在去除血清的同时,也去除了一些血清蛋白具有的保护、解毒作用,因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。另外,它的价格也比普通的培养基贵很多。
这么多种,要选择起来也是个头疼的事情。除了部分培养基是公开配方的,如用于培养内皮细胞的MCDB 131(Sigma),大部分液体培养基都是专利配方的,也就是说其中的成分是保密的。那么你只能是检索文献、让供应商推荐,然后用自己的细胞做几次传代培养来选出最合适的培养基。毕竟实践出真知嘛。
㈣ 胎牛血清进口怎样操作最安全
、外观 拿到血清,最先接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来版说,外观的判断尤为重要权 1、颜色 根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无...
㈤ 什么行业需要胎牛血清
高校、科研院所、只要是和生物有关系的行业一般都会用到这个的
胎牛血清的主要作用是培养细胞用的。。。
希望可以帮到你下面介绍一下啊血清的成分和功能
一、胎牛血清
各项质量指标符合2005版《中华人民共和国药典》第三部附录的要求。
1、性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。
2、蛋白质含量 3.5%~5.0%( w/v)
3、血红蛋白含量 ≤ 0.02%( w/v)
4、无菌检验阴性
5、支原体检验阴性
6、细菌内毒素 ≤5(EU/ml)
7、牛腹泻病毒 阴性
8、大肠杆菌噬菌体 阴性
9、支持细胞增殖(Sp2/0-Ag14)生长曲线(接种浓度)最大增殖浓度≥2.5×106 个/ml
细胞倍增时间 ≤15h
克隆率 ≥85%
血清的主要成分
血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已知,但还有一部分尚不清楚,且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。
显然,胎牛血清是品质最高的,因为胎牛还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。
功能
牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必须的营养成份,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长的激素,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2. 提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他激素等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到解毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。
主要品牌:hyclone Gibco PAA等....以上品牌北京博艾尔都有销售的...
㈥ 胎牛血清是什么玩意呀有什么用
1、胎牛血清是用健康母牛怀孕的八月龄胎牛血液为原料,经无菌采集、分离、微孔过滤后而成。
2、这个东西主要是实验室里做细胞培养用的。
㈦ 胎牛血清溶解后有沉淀是否影响使用
血清中抄沉淀物的出现有许袭多原因,但普遍的原因是血清中脂蛋白的变性所造成的,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,也是造成沉淀物的原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可加入培养基内一起过滤。最好不使用过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能阻塞过过滤膜。
㈧ 如何区别真假胎牛血清及择取胎牛血清质量
一、外观
拿到血清,最先接触的是血清外观,对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断尤为重要
1、颜色
根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
国产血清的采血点很分散,大多是由屠户采血后马上离心收集,所以很少会有溶血,表现出明亮的蜡黄色,当然,国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清。
进口胎牛血清或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。
总的来说,国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量最好的呈现出谈黄、微红色,差点的呈现出橘红色或鲜红色。当然,热灭活血清或保存不当的血清,由于血红蛋白的破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。
2、沉淀
很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。
血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。
国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融,每次冻融过程,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。
进口的胎牛血清,过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。当然,进口的新生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。
当然,购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程最好在温度较低的状态下慢慢进行,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
3、澄清度
进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡,而国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,这对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,可容易分辨。
二、主要技术指标
目前国内血清的质量标准是2005版的《中华人民共和国药典》,主要指标有以下几点:
1、内毒素
标准为不高于5EU/ml。内毒素是细菌破碎后细胞壁的成分,因此内毒素含量的高低可表现出采血到生产一系列过程中的无菌操作情况。目前,国产血清基本都能达到这一要求,很多进口胎牛血清内毒素含量反而更高,只要求不高于50EU/ml,高出我国标准10倍。可见,内毒素含量偏高不影响质量,除非含量极高,预示着已经污染。
2、总蛋白含量
胎牛血清一般范围是30-40mg/ml,数值偏高,说明采血的牛龄偏大,不是胎牛,数值偏低,表明血清可能掺水了。
3、血红蛋白
标准为不高于20mg/dl,颜色越红,数值越高,反之,数值越低。
4、pH
国产血清,大多高于7.5,进口胎牛血清,大多低于7.5,具体原因未知,可能和牛龄有关,这也能用来初步鉴别血清的来源。
5、微生物
包括细菌、霉菌、支原体、噬菌体、各类病原性病毒等。随着国内血清厂家生产条件的改善提高,细菌、霉菌等“大型”微生物几乎能100%控制,支原体经过0.1um过滤,大多也能清除。大肠杆菌噬菌体的污染还是比较严重的,主要是生产环境过程中带入,又无法过滤,很难彻底清除,但对血清质量影响不大。病原性病毒,特别是BVDV,在国产血清中几乎90%以上都存在,这类微生物是影响国产血清质量的重要因素之一,而进口胎牛血清中基本都控制的很好。
6、免疫球蛋白
国产血清的只是定性检测,结果也很不准确,进口胎牛血清大多定量检测。免疫球蛋白的数值能完全体现出采血的时的牛龄情况,国产血清,基本都是新生牛的,血清中容易产生IgM,IgG的含量也偏高,进口胎牛血清,不含IgM,IgG的含量也较低。
7、其它
不管是国产还是进口血清,都是不测抗生素的(无四环素胎牛血清除外)。国外,抗生素的使用很严格,用量也很少,每头奶牛的产品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含抗生素或含量极低;国内,抗生素的滥用已成了普遍现象,血清中残留很高,对细胞培养极为不利,这是国产血清质量差的根本原因。
㈨ 请问细胞培养中胎牛血清过滤的详细步骤,
胎牛血清买回来先化开,然后56度半小时灭活,在正常过滤就行。如果你用一次性滤器,版那就先准备权20或50ml的注射器,用注射器抽取,拔掉针头,再把一次性滤器插入注射器出口,把滤出的血清放灭过菌的容器就行,我一般放50ml离心管中,用时也方便,否则血清反复冻融不好,也容易染菌。