双氧水处理细胞凋亡需要多久

㈠ 双氧水处理细胞 多久能诱导凋亡

首先检查所用的双氧水是否失效，因为双氧水很容易分解。
如果没有失效，则可以增加双氧水处理浓度或者加一点fe2+（fenton反应）。
要是还没用，换一种氧化试剂。比如abts。

㈡ 细胞凋亡发生的过程

细胞凋亡的过程大致可分为以下几个阶段：
接受凋亡信号→凋亡调控分子间的相互作用→蛋白水解酶的活化（Caspase）→进入连续反应过程
1.凋亡的启动阶段
细胞凋亡的启动是细胞在感受到相应的信号刺激后胞内一系列控制开关的开启或关闭，不同的外界因素启动凋亡的方式不同，所引起的信号转导也不相同，客观上说对细胞凋亡过程中信号传递系统的认识还是不全面的，目前比较清楚的通路主要有：
1）细胞凋亡的膜受体通路：各种外界因素是细胞凋亡的启动剂，它们可以通过不同的信号传递系统传递凋亡信号，引起细胞凋亡，我们以Fas -FasL为例：
Fas是一种跨膜蛋白，属于肿瘤坏死因子受体超家族成员，它与FasL结合可以启动凋亡信号的转导引起细胞凋亡。它的活化包括一系列步骤：首先配体诱导受体三聚体化，然后在细胞膜上形成凋亡诱导复合物，这个复合物中包括带有死亡结构域的Fas相关蛋白FADD。Fas又称CD95，是由325个氨基酸组成的受体分子，Fas一旦和配体FasL结合，可通过Fas分子启动致死性信号转导，最终引起细胞一系列特征性变化，使细胞死亡。Fas作为一种普遍表达的受体分子，可出现于多种细胞表面，但FasL的表达却有其特点，通常只出现于活化的T细胞和NK细胞，因而已被活化的杀伤性免疫细胞，往往能够最有效地以凋亡途径置靶细胞于死地。Fas分子胞内段带有特殊的死亡结构域（DD,death domain）。三聚化的Fas和FasL结合后，使三个Fas分子的死亡结构域相聚成簇，吸引了胞浆中另一种带有相同死亡结构域的蛋白FADD。FADD是死亡信号转录中的一个连接蛋白，它由两部分组成：C端（DD结构域）和N端（DED）部分。DD结构域负责和Fas分子胞内段上的DD结构域结合，该蛋白再以DED连接另一个带有DED的后续成分，由此引起N段DED随即与无活性的半胱氨酸蛋白酶8（caspase8）酶原发生同嗜性交联，聚合多个caspase8的分子，caspase8分子逐由单链酶原转成有活性的双链蛋白，进而引起随后的级联反应，即Caspases，后者作为酶原而被激活，引起下面的级联反应。细胞发生凋亡。因而TNF诱导的细胞凋亡途径与此类似
2）细胞色素C释放和Caspases激活的生物化学途经
细胞核是细胞生命活动控制中心，它不仅是细胞呼吸链和氧化磷酸化的中心，而且是细胞凋亡调控中心。实验表明了细胞色素C从线粒体释放是细胞凋亡的关键步骤。释放到细胞浆的细胞色素C在dATP存在的条件下能与凋亡相关因子1（Apaf-1）结合，使其形成多聚体，并促使caspase-9与其结合形成凋亡小体，caspase-9被激活，被激活的caspase-9能激活其它的caspase如caspase-3等，从而诱导细胞凋亡。此外，线粒体还释放凋亡诱导因子，如AIF，参与激活caspase。可见，细胞凋亡小体的相关组份存在于正常细胞的不同部位。促凋亡因子能诱导细胞色素C释放和凋亡小体的形成。很显然，细胞色素C从线粒体释放的调节是细胞凋亡分子机理研究的关键问题。多数凋亡刺激因子通过线粒体激活细胞凋亡途经。有人认为受体介导的凋亡途经也有细胞色素C从线粒体的释放。如对Fas应答的细胞中，一类细胞（type1）中含有足够的胱解酶8 （caspase8）可被死亡受体活化从而导致细胞凋亡。在这类细胞中高表达Bcl-2并不能抑制Fas诱导的细胞凋亡。在另一类细胞（type2）如肝细胞中，Fas受体介导的胱解酶8活化不能达到很高的水平。因此这类细胞中的凋亡信号需要借助凋亡的线粒体途经来放大，而Bid -- 一种仅含有BH3结构域的Bcl-2家族蛋白是将凋亡信号从胱解酶8向线粒体传递的信使。
2.凋亡的执行
尽管凋亡过程的详细机制尚不完全清楚，但是已经确定Caspase即半胱天冬蛋白酶在凋亡过程中是起着必不可少的作用，细胞凋亡的过程实际上是Caspase不可逆有限水解底物的级联放大反应过程，到目前为止，至少已有14种Caspase被发现，Caspase分子间的同源性很高，结构相似，都是半胱氨酸家族蛋白酶，根据功能可把Caspase基本分为二类：一类参与细胞的加工，如Pro-IL-1β和Pro-IL-1δ，形成有活性的IL-1β和IL-1δ；第二类参与细胞凋亡，包括caspase2,3,6,7,8,9.10。Caspase家族一般具有以下特征：
1)C端同源区存在半胱氨酸激活位点，此激活位点结构域为QACR/QG。
2）通常以酶原的形式存在，相对分子质量29000-49000(29-49KD），在受到激活后其内部保守的天冬氨酸残基经水解形成大（P20）小（P10）两个亚单位，并进而形成两两组成的有活性的四聚体，其中，每个P20/P10异二聚体可来源于同一前体分子也可来源于两个不同的前体分子。
3）末端具有一个小的或大的原结构域。
参与诱导凋亡的Caspase分成两大类：启动酶（inititaor）和效应酶（effector）它们分别在死亡信号转导的上游和下游发挥作用。
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㈢ 细胞凋亡是怎样的过程

细胞凋亡是指细胞在一定的生理或病理条件下，受内在遗传机制的版控制自动结束权生命的过程。而细胞程序性死亡是指生物在发育过程中对一定生理刺激的反应性死亡，它需要一定的基因表达。凋亡是对细胞死亡过程中一系列固定模式的形态变化的描述，而PCD则是侧重功能上的概念。两者有差异，但常混为一谈。

㈣ 细胞凋亡有没有时长从更新到凋亡有没有固定时间

每个物种的细胞存活时间是不同的，而且同一个生命体的不同种细胞的存活时间也内是不同的，容比如人小肠的上皮细胞更新周期约为3－6天；胃内胃底腺的颈粘液细胞寿命约1周，但主细胞和壁细胞的寿命则长达200天。血细胞中，红细胞寿命是120天，但白细胞就只有几天。正常表皮细胞的更新时间平均为28天。

㈤ 活体分离到的细胞做凋亡可以放多久

活体分离到的细胞做凋亡可以放多久
细胞凋亡是生物体调节细胞群体相对恒定的一种重要方式,近年来成为生命科学中的研究热点。目 前认为肿瘤的发生是细胞丧失自发调节凋亡反应能力的最终结果。

㈥ 关于细胞凋亡的问题，请对此有了解的同学，或者老师帮忙一下呵呵

我来尝试回答一下，还望大牛指正
1.如果你说的是凋亡的早期和晚期的话，这个是用来描述细胞程序性凋亡的不同阶段。就好象细胞有丝分裂的不同时期有不同的活动特征一样。具体你可以参考这两个检测方法：
早期 http://biology.dzvv.com/biology/440/2009-02/216587.html
晚期 http://biology.dzvv.com/biology/440/2009-02/216586.html
2.一般病毒大量复制（繁殖）的机制是，将病毒的序列整合到宿主细胞的DNA序列中，然后借用宿主细胞的DNA复制来扩增病毒序列。由此可见，当被感染的细胞启动凋亡程序，其中的病毒就得不到扩增，从而达到牺牲少数被感染细胞而保护大多数未被感染细胞的目的。
3.你所说的通过抗体是体液免疫的过程，同时还存在细胞免疫。实际上，导致被感染细胞的凋亡是细胞免疫的一个重要步骤。具体可以参考以下链接
http://ke..com/view/39005.htm
4.端粒在染色体末端，目前知识来看，端粒本身不携带遗传信息。正如你所说，一般认为，当在细胞分裂过程中，当端粒消耗完，损伤到其内的DNA时细胞会启动凋亡程序（这也是一种防止细胞在分裂中老化和积累有害突变的机制）。但是同时，也存在端粒酶，能够反向扩增，延长端粒。这就是为什么有性生殖的时候，子代不受影响。同时，这也是癌细胞能够不断分裂的基础之一。有关端粒和端粒酶可以参考以下链接
http://www.hudong.com/wiki/%E7%AB%AF%E7%B2%92
http://ke..com/view/213631.htm

㈦ 细胞凋亡一般加入lps多久后测

每种物是不同的，如果你不能确定时间点，需要做一个时间曲线。给一组细胞用后，每隔一段时间取一个样本检测，得到凋亡开始发生的时间点。然后再测不同浓度的物在这个时间点所引起凋亡的程度。

㈧ 细胞凋亡实验中细胞培养多长时间后可以收集细胞

因为是诱导凋抄亡的袭实验，细胞加药处理后，贴壁细胞会因为活力丧失而脱壁漂浮，而这部分细胞正是你需要的，所以加药处理完后要收集全部培养上清，少量PBS洗瓶内剩下的细胞，洗的PBS与之前收集的上清合并。胰酶消化。消化完毕用之前收集的培养基中止消化。离心后PBS再洗一遍。离心，弃上清，细胞沉淀中加入70% 4度预冷的乙醇（PBS配制），4度放置不少于1小时（有的文献说是不少于15分钟）。之后离心去乙醇，PBS洗一遍后加入PI和DNAse，终浓度50 ug/ml，混匀，避光室温放置30 min后即可上流式细胞仪测定。

㈨ 使用双氧水诱导细胞凋亡一般的使用浓度是多少

工业上生产有27.5%,35%,50%等几个规格成品。自己使用可以根据需要加水稀释。

㈩ 为什么我用h2o2处理30分钟细胞就凋亡了

求助细胞凋亡 我们一般是这样建立凋亡模型的: 100 μM H2O2处理1h 10%细胞早期凋亡 100 mM H2O2处理1h 90%细胞晚期凋亡 市售30% H2O2是10 M