培养基回用
❶ (附加题)利用植物组织培养技术回答以下问题:(1)植物组织培养所用到的培养基为固体,原因是培养基中添加
(1)琼脂(凝固剂) 大量元素 微量元素 (2)异养 (3)生长素和细胞分裂素 用量比例 不必 (4)pH、温度、光照 (5)消毒 (6)酒精灯 |
❷ 我从别的实验室分回一株细胞,别人用的是DEME的培养基,我不知道就换成了1640了,现在细胞贴壁可能有60%
一般情况下,只要细胞无特殊要求,DMEM与1640都可以养的,现在只能等它适应1640了啊 一般更换培养基是应该先对半换的,不能太急。不过不用担心,尽量把不贴的死细胞洗掉,目前只能等它自己长起来。
❸ 下表中甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基的配方,回答下列问题:(1)从作用上看,甲培养基属于_
(1)题干指出甲、乙分别是分离两种土壤中微生物的培养基,其中尿素是作为唯一氮源,能生长的菌落说明能利用尿素中的氮源,所以甲从用途上属于选择培养基.其中含氮物质是尿素.以尿素为唯一氮源且含酚红的培养基可以选择和鉴别尿素分解菌.
(2)牛肉膏蛋白胨培养基属于基础培养基,如果上述培养基上长出的菌落数量明显少于牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落,说明有的微生物适合在牛肉膏蛋白胨培养基上生长,不适合在甲培养基上生长,所以证明该培养基具有筛选作用.
(3)在B配制的固体培养基上生长的菌落不一定都能分解纤维素,有可能利用水解酪素等能提供碳源,也有可能纤维素被分解后产生的糖类等也可为其它微生物生长提供碳源等.纤维素分解菌经过B培养基培养后,可以大量繁殖.
(4)纯化微生物可以用稀释涂布法和平板划线法,其中稀释涂布法能用于微生物的计数.1毫升原土壤样液中上述微生物数量=(180+155+176+129)÷4×106×10=1.6×109个.
故答案为:(1)选择培养基尿素酚红
(2)上述培养基上长出的菌落数量明显少于牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落
(3)否因培养基中水解酪素等能提供碳源,纤维素被分解后产生的糖类等也可为其它微生物生长提供碳源(合理即得分)能增加纤维素分解菌的浓度,确保从样品中分离到所需的微生物(或选择培养等)
(4)稀释涂布平板1.6×109个
❹ 下表是某微生物培养基成分,据表回答下列问题。 (1)上述培养基所培养微生物的同化作用类型
(1)自养;无有机碳源 (2)去除培养基的②成分,加入有机碳源;自生固氮菌能利用空气中的氮气专作为氮源,属但由于自生固氮菌是异养,培养基中还需加入有机碳源。 (3)琼脂 (4)生长因子;AB |
❺ 请问LB固体培养基可以用来培养霉菌吗为什么我做了几回都失败了啊,
LB 一般培养细菌的,霉菌成长不行。
霉菌固体培养基通用的一般是PDA培养基.
① 马铃薯专 300克,葡萄糖 20克,琼脂属 15~20克,自来水定容至1000ml.
② 具体步骤:马铃薯先洗净去皮,再称取300g切成小块,加水煮烂(煮沸20~30分钟,能被玻璃棒戳破即可),用四层纱布过滤,加热,再据实际实验需要加琼脂,继续加热搅拌混匀,待琼脂融完后,加入葡萄糖,搅拌均匀,稍冷却后再补足水分至1000毫升,分装试管或者锥形瓶,加塞、包扎,(121℃)灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面或者倒平板,冷却后贮存备用.
❻ 使用imdm培养基之后细胞死亡是怎么回事
细胞不适合该培养基。
首先IMDM培养基是为培养B淋巴细胞设计的,当然也可以用于其它细胞。
它含有更高浓度的营养成分,适合于高密度细胞培养,如制备抗体时的杂交瘤细胞培养。
此外培养某一类型细胞没有固定的培养条件.以下可以供参考:
细胞系 细胞类型 种 组织 推荐使用的培养基
293 成纤维细胞 人 胚胎肾 MEM,10% 热灭活马血清
3T6 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM,10% 胎牛血清
A549 上皮细胞 人 肺癌 F-12K,10%胎牛血清
A9 成纤维细胞 小鼠 结缔组织 DMEM,10%胎牛血清
AtT-20 上皮细胞 小鼠 垂体肿瘤 F-10,15% 马血清和2.5% 胎牛血清
BALB/3T3 成纤维细胞 小鼠 胚胎 DMEM,10% 胎牛血清
BHK-21 成纤维细胞 仓鼠 肾 GMEM,10% 胎牛血清 或MEM,10% 胎牛血清 和NEAA
BHL-100 上皮细胞 人 乳房 McCoy'5A,10% 胎牛血清
BT 成纤维细胞 牛 鼻甲骨细胞 MEM,10% 胎牛血清 和 NEAA
Caco-2 上皮细胞 人 结肠腺癌 MEM,20% 胎牛血清 和NEAA
Chang 上皮细胞 人 肝脏 BME,10% 小牛血清
CHO-K1 上皮细胞 仓鼠 卵巢 F-12,10% 胎牛血清
Clone 9 上皮细胞 大鼠 肝脏 F-12K,10% 胎牛血清
Clone M-3 上皮细胞 小鼠 黑素瘤 F-10,15% 马血清和 2.5% 胎牛血清
COS-1 成纤维细胞 猴 肾 DMEM,10% 胎牛血清
COS-3 成纤维细胞 猴 肾 DMEM,10% 胎牛血清
COS-7 成纤维细胞 猴 肾 DMEM,10% 胎牛血清
CRFK 上皮细胞 猫 肾 MEM,10% 胎牛血清 和NEAA
CV-1 成纤维细胞 猴 肾 MEM,10% 胎牛血清
D-17 上皮细胞 狗 骨肉瘤 MEM,10% 胎牛血清 和NEAA
Daudi 成淋巴细胞 人 淋巴瘤病人血液 RPMI-1640,10% 胎牛血清
GH1 上皮细胞 大鼠 垂体肿瘤 F-10,15% 马血清和 2.5% 胎牛血清
GH3 上皮细胞 大鼠 垂体肿瘤 F-10,15% 马血清和2.5% 胎牛血清
H9 成淋巴细胞 人 T细胞淋巴瘤 RPMI-1640,20% 胎牛血清
HaK 上皮细胞 仓鼠 肾 BME,10% 小牛血清
HCT-15 上皮细胞 人 结肠直肠腺癌 RPMI-1640,10% 胎牛血清
❼ 回答下列有关微生物的问题.按物理状态,培养基可分为固体培养基和液体培养基.(1)固体培养基中最常用
(1)培养基按物理性抄质分可分固体培养袭基和液体培养基,液体培养基中加入凝固剂可以制成固体培养基,常用的凝固剂是琼脂,琼脂在高温时是液态,温度降低变成固态.
(2)固体培养基一般用于微生物的鉴别、分离和计数,液态培养基常用于扩大化生产,观察细菌运动.
(3)分析表格可知,在A培养液中,可以生长的细菌是甲、乙,其中甲繁殖一代所需时间短,繁殖较快;比较A、B、C、D四种培养基,其中D培养基无有机碳源,在上面能生长繁殖的细菌丁属于自养菌.
(4)分析表格可知,细菌的生长繁殖与氨基酸种类有关的只有细菌丙,所以氨基酸是丙细菌生长繁殖的限制因素.故答案应为;
(1)琼脂 高温时是液态,低温时是固态
(2)B、D
(3)甲、乙 甲 丁
(4)丙
❽ (他g11闸北区一模)回答有关微生物实验的问题.实验一:《用选择培养基分离土壤中的自身固氮菌》.(1
实验一
(1)分离土壤中的自身固氮菌选用选择培养基,该培养基中不应该含有氮源.
(她)为了清除琼脂中含有的含氮物质对实验结果造成影响,在使用琼脂时 应该用自来水冲洗,再用蒸馏水浸泡,反复多次,彻底清除琼脂中可能含有的含氮物质.
(4)由于自身固氮菌的生长时固定的氮素一方面供给自身生长应用,另一方面还会向培养基中分泌含氮物质,引起杂菌生长,因此在平板g接种土壤样品的浸出液稀释液后,平板的培养时间不能过长.
(4)分析题图可知,该图显示的接种方法是平板划线法;目的是把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面,通过培养获得单细胞繁殖而来的菌落.
(他)分析给出的培养基配方可知,能为微生物提供碳源的物质是C9他1她99,提供无机盐的物质是K他她b94、MgS94、NaCl、GaS94.
(9)革兰氏阳性菌对青霉素敏感,革兰氏阴性菌对青霉素不敏感,嗜盐菌和嗜热菌属于革兰氏阴性菌,因此不能被青霉素抑制.
实验二
(1)培养基在100℃下维持40分钟的目的是杀死活的微生物,芽孢可能没有杀灭;
(她)在4他℃~47℃下放置放置她4小时后,芽孢生长形成或的微生物,将培养基在100℃下维持40分钟,将她4小时中由细菌芽孢萌发而生长的微生物杀死;依此类推杀死所有微生物,对培养基彻底灭菌.
(4)检测培养基灭菌是否彻底的方法是将培养基处于47℃下放置4~他天,如仍无微生物生长,证明培养基已达到灭菌效果.
故答案应为:
实验一:(1)无氮
(她)清除琼脂中可能存在的含氮物质
(4)自身固氮菌的生长会向培养基中分泌含氮物质,引起杂菌生长
(4)划线法,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面
(他)C9他1她99 K他她b94、MgS94、NaCl、GaS94
(9)C
实验二:(1)杀死活的微生物
(她)杀死她4小时中由细菌芽孢萌发而生长的微生物
(4)将培养基处于47℃下放置4~他天,如仍无微生物生长,证明培养基已达到灭菌效果.
❾ 根据植物组织培养和生物有效成分的提取的知识回答下列问题:(1)菊花的组织培养常用的培养基是______,
(1)菊花的组织培养常用的培养基是MS固体培养基.因为最后形成了完整的植株,所以菊内花的组织培养容常用的原理是植物细胞的全能性.
(2)植物组织培养的一般顺序为制备培养基→消毒→接种→培养→移栽→栽培.
(3)一般来说,在单核时期细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养成功率最高.一般要通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期.确定花粉发育时期的方法有醋酸洋红法和焙花青-铬矾法.
(4)材料消毒过程中用到的试剂有70%的酒精、0.1%的氯化汞溶液、无菌水.
故答案为:
(1)MS固体培养基 植物细胞的全能性
(2)消毒 培养 移栽
(3)单核 镜检醋酸洋红法 焙花青-铬矾法
(4)70%的酒精
❿ 刚买回来的细胞,用20%的DMEM高糖培养基后多长时间可以更换成10%的培养基
刚买回来的细胞株三天换一次液,但是不能一次性把原来的培养液全部换了,留三分之一。如果想换成10%的话,得看是什么细胞了