水和废水志贺菌检测

㈠ 游泳池水，废水和生活饮用水中大肠菌群检测有何异同

游泳池水中大肠菌群检验方法：
一、大肠菌群多管发酵法测定
1定义
大肠菌群（coliform bacteria）系指一群在36±1℃培养24h能发酵乳糖、产酸产气的需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
2 仪器
见《公共场茶具的大肠菌群测定方法》。
3培养基和试剂
3.1乳糖蛋白胨培养液
3.1.1成分：蛋白胨 10g，牛肉膏 2g，乳糖 5g，氯化钠 5g，1.6%（V/V）溴甲酚紫乙醇溶液 1mL，蒸馏水 1000mL
三.倍浓缩乳糖蛋白胨培养液按上述乳糖蛋白胨培养液浓缩三倍配制。
3.1.2配法：将蛋白胨、牛肉膏、乳糖及氯化钠置于1000ml蒸馏水中加热溶解，调pH到]7.2～7.4。再加入1ml 1.6%溴甲酚指示剂，充分混匀，分装到含有倒管的试管中，115℃高压灭菌15min。
3.2伊红美兰琼脂
见《公共场所茶具的大肠菌群测定方法》。
3.3革兰氏染色液
风《公共场所茶具的大肠菌群测定方法》。
3.4染色法
见《公共场所茶具的大肠菌群测定方法》。
4推测性试验
4.1在2个装有50ml三倍浓缩乳糖胆盐培养液的大试管或烧杯内各加入水样100ml。
4.2在10支装有5ml三倍浓缩乳糖胆盐培养液的试管里各加入水样10ml。
4.3轻摇试管，使液体充分混匀，置36±1℃培养箱中，培养24h。
4.4观察每管是否产气，如不产气则报告为大肠菌群阴性；若有气体产生则为推测性试验阳性，需做进一步的证实试验。
5证实试验
5.1平板分离
自推测性检验阳性管中取一接种环培养液，接种到伊红美蓝琼脂平板上，置36±1℃培养箱培养18～24h，观察菌落形态，典型的大肠菌群菌落为黑紫色或红紫色，具有金属光泽。
5.2复发酵试验
挑取可疑大肠菌群菌落1或2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，于36±1℃培养箱中，培养24h。
5.3凡乳糖发酵管最终产酸产气，革兰氏染色为阴性的最大可能数（MPN）检索表得出1000ml水样中总大肠菌群的MPN值。

㈡ 美国apha《水和废水检验标准方法》2005版怎么引用

APHA, 2005. Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater
(Washington, DC, USA).

㈢ 水和废水监测分析方法

不懂你想问什么，你看的是文献还是标准还是课本什么的，原文是怎样的说的，拍照上来看看

㈣ 如何检验环境水中的微生物

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水质微生物

一、水质微生物及指示菌

在各种水体，特别是污染水体中存在有大量的有机物质，适于各种微生物的生长，因此水体是仅次于土壤的第二种微生物天然培养基。水体中的微生物主要来源于土壤，以及人类的动物的排泄物及污染。水体中微生物的数量和种类受各种环境条件的制约。

一般认为，水中微生物以革兰氏阴性杆菌占有较大优势。与其他水体相比，河水及溪水中革兰氏阳性菌相对较多，这是因为陆地微生物冲洗污染的缘故。

水体中的致病性微生物一般并不是水中原有微生物，大部分是从外界环境污染而来，特别是人和其它温血动物的粪便污染。水中常见的致病性细菌主要包括：志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌、小肠结炎耶尔森氏菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌等。

在实际控制中，对水质卫生质量的评价和控制，是无法对各种可能存在的致病微生物一一进行检测，而一般利用对指示菌的检测和控制，来了解水体是否受到过人畜粪便的污染，是否有肠道病原微生物存在的可能，从而评价水的质量，以保证水质的卫生安全。

目前，世界各国一般认为大肠菌群是指示水质受粪便污染较好的指示菌。

我国水质控制也采用大肠菌群作为指示菌，GB5749-85《中华人民共和国国家标准 生活饮用水卫生标准》规定，生活饮用水中大肠菌群每升不得超过3个。

在某些情况下，水体中的细菌总数也可指示水体受粪便等污染物污染的情况。这里的细菌总数其实是指营养琼脂培养后形成的菌落总数。目前世界各国对于控制饮用水的卫生质量，除采用大肠菌群等指标外，一般还采用细菌总数这个指标。我国GB5749-85《中华人民共和国国家标准 生活饮用水卫生标准》中规定生活饮用水细菌总数每毫升不得超过100个。

二、水质微生物检验方法

GB5750-85《中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验法》提供了水质中细菌总数和总大肠菌群的检测方法。

（一）细菌总数的检测：

国家标准中，细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中，于37℃经24h培养后，所生长的细菌菌落的总数。

对生活饮用水，直接吸取1ml水样于平皿中，加入营养琼脂后混匀，37℃培养24h，进行计数。

对水源水，根据情况对样品进行10倍梯度稀释，选择适宜稀释液1ml，加注平皿，营养琼脂混匀，37℃培养24h，进行计数。

按照规定格式报告每毫升水中细菌总数。

（二）总大肠菌群的检测：

国家标准中，利用总大肠菌群作为粪便污染的指标。总大肠菌群是指一群需氧及兼性厌氧的，37℃生长时能使乳糖发酵，在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。水样中总大肠菌群数的含量，表明水被粪便污染的程度，而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能。

国家标准提供了多管发酵法及滤膜法检测总大肠菌群的方法。

多管发酵法检测总大肠菌群，分为三步：初发酵试验，平板分离，复发酵证实试验。初发酵试验，采用乳糖蛋白胨培养液37℃培养24h，观察产酸产气情况。对阳性管培养物，接种于品红亚硫酸钠培养基或伊红美蓝培养基，观察菌落特征，并进行革兰氏染色和镜检。对典型和可疑菌落，接种于乳糖蛋白胨培养液，进行复发酵证实试验，并根据标准所附检数表报告结果。

其中，对生活饮用水，初发酵试验接种水样总量300ml，即100ml接种2管，10ml接种10管，采用两个稀释度，12支发酵管。对水源水，初发酵试验接种水样总量55.5ml，即10ml接种5管，1ml接种5管，0.1ml接种10管，共采用三个稀释度，15支发酵管。两种接种方法，所用的检数表是不同的。

滤膜法检测总大肠菌群，就是利用微孔滤膜，过滤一定量水样，将水样中含有的细菌截留在滤膜上，然后将滤膜帖放在选择性培养基上（如品红亚硫酸钠培养基），经培养和证实试验后，直接计数滤膜上生长的典型大肠菌群菌落，并计算出每升水样中含有的总大肠菌群数。

三、说明：

1．菌落总数测定中，应选择合适的稀释度进行。生活饮用水，国家标准规定每毫升不得超过100个，因此可以直接吸取1毫升到平板进行培养。

2．培养时间。与食品中菌落计数不同，测定水中细菌总数，培养时间采用24h。

3．总大肠菌群的测定方法，由于饮用水和水源水可能的污染程度不同，因此采用不同的接种量，检数表也不相同。

4．当接种量超过1毫升时，一般采用多倍浓度培养液。如配制3倍浓缩乳糖蛋白胨培养液50mL，加入100mL水样后，总体积为150mL，培养液恢复到正常浓度。

5．滤膜法检测总大肠菌群，一般在检测较大量低浊度水样时采用，大量水样滤过滤膜后，水中所含有的所有细菌均截留在滤膜上。

㈤ 水和废水监测分析方法里面有介绍挥发性脂肪酸的测定吗

水和废水监测分析方法里面有介绍挥发性脂肪酸的测定
①若用洗气装置除杂，专一般除杂在前，干燥在后。属原因：从溶液中出来的气体通常混有水蒸气，干燥在后可将水蒸气完全除去。如除去CO中混有的CO2和水蒸气，应将气体先通过。NaOH溶液，再通过浓H2SO4。
②若用加热装置除杂，一般是干燥在前，除杂在后。如除去CO2中混有的CO和水蒸气，应将气体先通过浓H2SO4，再通过灼热的CuO。
(2)除去多种杂质气体的顺序一般是先除去酸性较强的气体。如N2中混有 HCl、H2O(气)、O2时，应先除去HCl，再除去水，最后除去O2(用灼热的铜网)。
(3)检验多种气体的先后顺序(一般先验水蒸气)：有多种气体需要检验时，应尽量避免前步检验对后步检验的干扰。如被检验的气体中含有CO2和水蒸气时，应先通过无水CuSO4。检验水蒸气，再通过澄清的石灰水检验CO2.

㈥ 志贺氏菌最简单的检验方法和收集方法100分!

4 志贺氏菌属细菌的形态与一般肠道杆菌无明显区别，为革兰氏阴性杆菌，长约2-3μ m ,宽0.5-0.7μ m 。不形成芽胞，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。DNA的G+C为49-53克分子%（Tm法）。
1 增菌培养：

宋内氏志贺氏菌的增菌培养；以无菌的手续称取样品25g放入事先加有0.5μg/mL新生霉素的250mL志贺氏菌肉汤中，将此混悬液于室温中静置10min并时时振摇之。将浸液倾入灭菌的500mL锥形瓶中，调整pH，必要时用1N NaOH或1NHCL调至pH7.2±0.2，再将此锥形瓶置于加有新鲜催化剂的厌氧缸中，放入 GasPak并加水使之活化。因此厌氧罐内部温度较高，每次用后皆应将催化剂加热。将厌氧罐置于44.0℃水浴中培养20h，振摇混悬液后划线接种于麦康凯氏琼脂平板。于35℃培养20h。

对其他志贺氏菌的增菌培养亦按上述方法进行。但加入新生霉素量为3μg/mL，并在厌氧环境下置42.0℃水浴培养。

志贺氏菌的分离

a.常规培养方法

检查麦康凯琼脂平板，志贺氏菌的菌落为浅粉红色，半透明，将此可疑菌落接种于下列培养基中：葡萄糖肉汤，TSI琼脂斜面，赖氨酸脱羧酶肉汤，动力试验琼脂和胰胨。置35℃培养48h，但应在20h进行检查，弃去所有有动力、产H2S、产气、赖氨酸脱羧以及发酵蔗糖与乳糖的培养物。关于产生吲哚者，应弃去其44℃增菌物中的阳性培养物。至于42℃增菌培养中的所有可疑培养物皆有可能是阳性或是阴性，因此皆应予保留。

b.生理学性状

将初筛反应良好的培养物再接种其他生化试验，志贺氏菌的特性概述如下分离：H2S、尿素酶、葡萄糖、（产气）运动、赖氨酸、脱羧酶、蔗糖、侧金盏花醇、乳糖（2日）、KCN、丙二酸盐、柠檬酸盐、与水杨素皆为阴性；甲基红为阳性。用抗血清鉴定其血清型或参照表二所列32个血清型的生物学特性进行试验。其粘液酸盐（mucate）和乙酸盐（acetate）的反应是会有所帮助的。在这些反应中志贺氏菌一般为阴性，而不产气的大肠杆菌一般至少在此反应中的一项为阳性。

c.血清学性状:

将犊牛肉浸汁琼脂斜面的24h培养物混悬于3mL0.85%生理盐水中,使其浓度相当于 标准比浊管第5号,在洁净的玻璃平皿上用蜡笔标记9个3x1cm的方块.按照以下方案滴加混悬液，抗血清与生理盐水。

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