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『壹』 求罗丹明B 测试方法
食品中罗丹明B(玫瑰红)的现场快速检测及实验室检测方法
食品中罗丹明B(玫瑰红)的现场快速检测及实验室检测方法
(大连市产品质量监督检验所)
1.定义
罗丹明B是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料,英文名:Rhodamine B;分子式C28H31ClN2O3;分子量479.0175;结构式为:
罗丹明B在溶液中有强烈的荧光, 用作实验室中细胞荧光染色剂、有色玻璃、特色烟花爆竹等行业。不容许用作食品染色。
2.检测原理
罗丹明B具有脂溶性,被用作调味品(主要是辣椒粉和辣椒油)染色剂。使用了被污染的调味品制作食品时会造成残留。调味品使用罗丹明B染色时含量较高,甚至直接掺入,可进行现场检测。食品中因其含量较低,需送实验室检测。现场检测中使用非极性有机溶剂(例正己烷、正己烷+丙酮等)将其溶解并提取出,提取液流过中性氧化铝固相萃取小柱吸附罗丹明B,用非极性有机溶剂(例正己烷)淋洗小柱,洗脱样品油脂和食品内源性干扰物,用肉眼可观测到在小柱上出现鲜亮的粉红色条带,判定为可疑样品,该样品需送实验室作进一步确证检验。实验室检测法仍然采用非极性有机溶剂(例正己烷、正己烷+丙酮等)将罗丹明B 从食品中溶解并提取出,提取液流过中性氧化铝固相萃取小柱吸附罗丹明B,用非极性有机溶剂(例正己烷)洗脱样品油脂和食品内源性干扰物,再用极性有机溶剂(例甲醇)将罗丹明B从小柱上洗脱并收集,用反相高效液相色谱仪-紫外/可见光检测器进行定性定量检测。
3.试剂和材料
3.1 层析用中性氧化铝(100目),用前于105℃烘2小时,取下置干燥器中冷至室温,装入玻璃瓶中密闭放置。
3.2 正己烷(分析纯);
丙酮(分析纯);
甲醇(色谱纯);
3.3 20%丙酮的正己烷液:取100ml丙酮加400ml正己烷混合,作为罗丹明B的提取液和净化液。
3.4 氧化铝固相萃取小柱:取5 ml塑料注射器管,下端口塞入小块脱脂棉,装入处理好的氧化铝约3cm高,放置备用。
3.5 罗丹明B标准溶液:称取罗丹明B (分析纯试剂 沈阳试剂三厂)5.0mg,用20%丙酮的正己烷液(3.3)溶解并定容至50ml,配成含量为100ug/ml的标准储备液。取此液0、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0ml,用20%丙酮的正己烷液(3.3)稀释并定容至50ml,配成浓度为 0.0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0ug/ml标准系列溶液。
3.6 玻璃器具
4.现场快速检测方法
4.1 辣椒粉 取辣椒粉一小勺(约5g)放入小烧杯中,加入约40ml含20%丙酮的正己烷(3.3),摇动或搅拌2分钟,静置。取5 ml塑料注射器套管,下端口塞入小块脱脂棉,将事先处理好的氧化铝(3.1项)倒入注射器管中约3cm高,做成氧化铝固相萃取小柱,待样品杯上方澄清后,慢慢倒入小柱中,下端接一废液杯,视颜色深浅倒入2-5ml,注意不要倒入太多,保证小柱的中下部仍为白色, 此时,含罗丹明B的样品在柱上部会出现鲜亮的粉红色的荧光条带,条带边缘清晰,粉红色随含量的增加而加深和加宽,不含罗丹明B的样品提取液不会出现粉红色条带,只会出现黄红色的界面不清晰的宽带,然后用含20%丙酮的正己烷(3.3)20ml慢慢倒入小柱,粉红色的条带不下移,但更清晰,其余的黄红色带下移,可大部分被洗脱出,即可判断为含罗丹明B的可疑样品。
4.2 辣椒油 取辣椒油一小勺(约2g)放入小烧杯中,加入约10ml正己烷(3.2),混匀。按4.1项中“取5 ml塑料注射器套管,……即可判断为含罗丹明B的可疑样品。”操作。
4.3 判定 初步判断为含罗丹明B的可疑样品需送实验室中进行液相色谱确证检验。
5.实验室检测方法
5.1.仪器
高效液相色谱仪 (双泵、紫外/可见光检测器)
色谱柱 C18 4.6mm X 15cm(5μm)
5.2.提取和纯化
5.2.1 辣椒粉:取辣椒粉1g,加入20ml含20%丙酮的正己烷(3.3),震摇10分钟,静置或过滤使分离出上层清液,残渣加入10ml含20%丙酮的正己烷(3.3)重复提取一次,合并2次提取液,混匀,用滴管将上清液加入氧化铝小柱(3.4)中[小柱预先用5ml提取液(3.3) 润湿],视颜色深浅决定上柱量,保证上完样的小柱中下部仍为白色,含罗丹明B的样品提取液在柱上部会出现鲜亮的粉红色的荧光条带,且粉红条带随含量的增加而加深和加宽,不含罗丹明B的样品提取液不会出现粉红色条带,只会出现黄红色的不清晰的宽带,用含20%丙酮的正己烷(3.3)洗小柱,粉红色的条带不下移,但更清晰,其余的黄红色带下移可大部分被洗脱出,可判断为含罗丹明B的可疑样品,待洗柱的流出液无色时,滴入5-10ml甲醇,将罗丹明B色带洗下并收集,用甲醇定容后,注入高效液相色谱仪进行确认。
5.2.2.辣椒油:称取辣椒油1g,加入10ml含20%丙酮的正己烷(3.3),混合均匀后滴入氧化铝小柱(3.4)中,按照5.2.1项中“用滴管将上清液加入氧化铝小柱……注入高效液相色谱仪进行确认”进行操作。
5.2.3.其它食品:对于使用了红辣椒油(粉)调味的食品(如红油豆制品、红油鱼干等)称取10-20g,用20%丙酮的正己烷(3.3)洗下红油(粉),或将样品与洗脱液搅成匀浆将罗丹明B溶解提取出,将样品液静置或离心,分出有机相,根据水分的多少加入适量无水硫酸钠脱水,按照5.2.1项中“用滴管将上清液加入氧化铝小柱……注入高效液相色谱仪进行确认”进行操作。含量少的样品因粉红色条带太窄和颜色较淡肉眼看不清楚,仍可采用上述办法,进一步用20%丙酮的正己烷(3.3)洗涤小柱至流出液无色时,滴入5-10ml甲醇,将罗丹明B色带洗下并收集,经浓缩后,注入高效液相色谱仪进行确证检验。
5.3 液相色谱条件
5.3.1 色谱柱:C18 4.6mm X 15cm(5μm) 进样 5ul
5.3.2 流动相:75%甲醇水溶液 1ml/min
5.3.3 检测器: 紫外/可见光(UV/VIS)检测器;波长:550nm
5.3.4 定性定量:罗丹明B标准溶液保留时间定性,外标法定量。
5.4 结果计算
Y = C×V/M
Y——样品中罗丹明B的含量(mg/kg)
C——从标准曲线上查得的罗丹明B的浓度(ug/ml)
V——测试样品总定容体积(ml)
M——样品的称样量(g)
5.5 注意事项:①使用C18柱的性能有差异,流动相浓度应略作调整。②在本法所给分离条件下,样品基质在罗丹明B附近无干扰峰,其他许多红色偶氮染料均可在罗丹明B之后出峰,注意调整这些干扰峰与罗丹明B分离度,干扰的成分为:苏丹橙G、对位红、苏丹红7B、苏丹红Ⅰ、苏丹红Ⅱ、苏丹红Ⅲ、苏丹红Ⅳ。
『贰』 在光催化降解罗丹明b溶液,一般配置多少浓度
文献上一般都是10mg/L,催化时的光源选择30-300W的Xe灯加不同波长的滤波片。
『叁』 罗丹明B 检测限度
国家2010年在中华人民共和国出入境检疫检验行业标准中,给出了罗丹明B 的标准检测方法,分别是液相色谱-荧光法 和 液相色谱-质谱/质谱法,对含量为0.005mg/kg的罗丹明B都做了检测。而且罗丹明B因为其致癌性是禁止在食品中添加的。
『肆』 紫外分光光度计测量罗丹明B浓度
紫外分光光度计全名是叫紫外-可见分光光度计,一般包括紫外和可见两个区域,这时候你可以选用便宜的玻璃吸收池,石英吸收池在紫外,可见两个区域都可用。另外应该不包括红外区域。另外如果不是全波扫描,手动式测量,好像还要注意灯拨的位置,是属于紫外还是可见
『伍』 怎样用荧光法测定罗丹明B的含量
查看SN/T 2430 -2010就知道了
『陆』 罗丹明b溶液的浓度为什么会影响zno的光催化活性
很好理解的,溶液的浓度会影响光催化体系中吸附的概率和速率。罗丹明B浓度越大的话反应初期吸附的越快,催化降解的也就越快。
『柒』 为什么罗丹明B要配成稀溶液
晚上好,罗丹明b俗称碱性玫瑰精是一种阳离子苯胺染料,如果没有特别说明通常只使用2%固含量一下稀释做水溶液,在低浓度时有很好的荧光强度和品红色便于组织观察,浓度太高就会变成深紫色像碘酒一样黑。另外对于一些敏感细胞组织若罗丹明b的浓度太大也会产生毒性损害样本。
