中性树脂封片
① 中性树胶是固体还是液体,用它作石蜡切片封片剂的配方
中性树胶一般用强化学试剂去除,但这些试剂均有毒怎么能用它来洗手? 过不了多久自会掉的,我上次用中性树胶封片沾在手上,一天过去就没什么了
② 中性树胶封片前二甲苯需要晾干吗
不需要哦,二甲苯干后用树胶封片很容易产生气泡,湿封会好多了
③ 中性树脂封片用什么溶解中性树脂
可以试试飞秒实验室的脱胶剂,或则脱漆剂,都可以,或者你自己用醇试试
④ 怎样用中性树脂封片
晾干后滴在上面两滴中性树脂然后放盖玻片,轻压盖玻片让液滴充满整个玻片,然后晾干,最好晾一个星期再看,不然容易脱落。当然不用油镜的话应该就不用晾那么久了。
⑤ 封片用中性树胶哪里有卖的,如何稀释啊急急急
南京建成就有,他们家还有无毒环保封固剂,不含二甲苯,对身体好,建议可以上网查询一下。
⑥ 中性树胶是固体还是液体,用它作石蜡切片封片剂的配方
想知道配方,提供样品,这边可以通过仪器检测,微观图谱解析,还原其中的配方组成。
⑦ 我想请教一下,我做油红0 ,没封片时候图像清晰,为什么拿中性树脂封片以后再看感觉红色团一块了
中性树胶里面有二甲苯啊,二甲苯溶解脂肪,建议使用甘油明胶等水溶性封固剂封版片,其实你权可以买现成的试剂盒,南京建成就有,他家的油红O试剂盒里有个专门的封固剂,就是要加热才能溶解,麻烦是麻烦,但效果还不错。
⑧ he染色可以不加中性封固树脂观察吗
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一 取材和固定
取材后经固定24小时(4%PA灌注取材的后固定6~8小时)以后,流水冲洗24小时,置于70%~80%乙醇中,可长期保存。
二 脱水和包埋
1、95%ALC(二道) Ⅰ 2~4h
Ⅱ 2h
2、无水ALC(二道) Ⅰ 1.5h
Ⅱ 1h
3、二甲苯+无水乙醇(1:1) 20min
4、二甲苯(二道) Ⅰ 10min
(注:脱水透明esp.透明时间可适当延长) Ⅱ 10min
5、浸软蜡(50~52℃)(二道) Ⅰ 30min
Ⅱ 1h
6、浸硬蜡(58~60℃)(二道) Ⅰ 30min
Ⅱ 30min
7、包埋:注意温度、切面。
三 切片
修、切、展、贴、烤(烤片55~60℃) 3~10h
四 HE染色
1、二甲苯脱蜡 五道,每道5~10分钟
2、无水乙醇 Ⅰ 5min
Ⅱ 5min
3、95%乙醇 Ⅰ 5min
Ⅱ 5mn
4、80%乙醇 5min
5、70%乙醇 5min
6、D.W. 3~5min
7、Harris苏木素液 5min(冬天可适当延长,eg.20min)
8、水洗
9、0.5%盐酸酒精分色 3~10seconds,镜下观察
10、水洗蓝化 15~30min(注意换水)
11、70%乙醇 5min
12、80%乙醇 5min
13、伊红液(95%乙醇溶液) 3~30seconds
14、95%乙醇 Ⅰ 1min
Ⅱ 5min
15、无水乙醇 Ⅰ 5min
Ⅱ 5min
16、二甲苯+乙醇(1:1) 5min
17、二甲苯 Ⅰ 5min
Ⅱ 5min
Ⅲ 5min
18、中性树胶封片。
HE染色注意事项:
染色时调节pH值很重要。如果组织块在福尔马林中固定时间长,组织酸化而影响细胞核着色。因此,要在自来水中冲洗时间长一些或在饱和碳酸锂水溶液中处理10-30min,这样可以使细胞核着色较深。染伊红时胞浆着色不佳,可在伊红溶液中滴加1-2滴冰醋酸。
2. 切片染苏木精后,分色这一步是关键,应在显微镜下控制进行,一般以细胞核染色清楚(晰)而细胞质基本无色为佳。如果过分延长分色时间将导致染色太浅,应重新染色后再行分色。
3. 切片经酒精脱水后,入二甲苯时可出现白色不透明状态,此为脱水不彻底,应将切片退回无水酒精,更换酒精、二甲苯,以求彻底脱水与透明。
4. 在染色过程中不要让切片干燥,以免切片收缩、变形,影响神经元形态。
5. 切片从二甲苯取出或进入二甲苯前,切片周边均应擦干净或吸干多余水分。
6. 最后封固时,要用中性树脂,防止日后褪色,盖片要选大于组织块的面积,如漏出一部分不久将会褪色,所用树脂浓度要适当,树脂封固时不能有气泡。
苏木精—伊红染色法简称HE染色法,它是最常用的普通染色方法。苏木精(hematoxylin)是阳离子染料,将细胞核内的嗜碱性物质染成蓝紫色。伊红(eosin)是阴离子染料,将细胞质和胶原纤维等染成粉红色。
⑨ 中性树胶哪里买比较好
购买中性树胶要去比较大的生化试剂厂家,如:索莱宝等
中性树胶,是版一种粘合剂,用于将载权玻片和盖玻片粘合在一起,把生物组织切片封起来长久保留。
中性树胶的特点编辑
它有几个特点符合物镜粘合剂的需求:
1、透明度高,几乎和光学玻璃一样清晰。
2、不腐蚀玻璃,因为它是中性的,而玻璃最怕碱性,如果不放心可以在粘合以前用盐酸酒精泡泡晾干再粘可能会更好。
3、不容易长霉,可能是因为中性树胶的溶剂二甲苯有杀霉菌作用。
不过中性树胶有些缺点,它是以二甲苯为溶剂的,封合后挥发很慢,制作的玻片起码在通风处晾一两个月才没有二甲苯的味道。可能在烈日下暴晒会快点。
封片方法很简单,在载玻片中央滴2-3滴树胶液(注意要滴在一起否则容易有气泡),然后把盖玻片慢慢放上去,轻轻挤压,树胶液会向外侧扩散至整个镜片,通风晾几个小时后用棉球粘上二甲苯或者松节油把镜片边缘多余的树胶擦洗干净。然后再放在通风处晾2个月。