大孔树脂多糖纯化
㈠ 植物有效成分的提取用层析硅胶、大孔树脂、活性氧化铝那种最合适
硅胶最适合!因为硅胶的极性最强,孔结构和比表面可以调整,而且没有有机物污染;相对而言,大孔树脂因为有有机物材料,早被国家药监局列为限制使用产品;而活性氧化铝的极性不如硅胶,选择性吸附这一特点上不如硅胶。(1) 硅胶:层析用硅胶为一多孔性物质,分子中具有硅氧烷的交链结构,同时在颗
粒表面又有很多硅醇基。硅胶吸附作用的强弱与硅醇基的含量多少有关。硅醇基能够通过氢键的形成而吸附水分,因此硅胶的吸附力随吸着的水分增加而降低。若吸水量超过17%,吸附力极弱不能用作为吸附剂,但可作为分配层析中的支持剂。对硅胶的活化,当硅胶加热至100~110℃时,硅胶表面因氢键所吸附的水分即能被除去。当温度升高至500℃时,硅胶表面的硅醇基也能脱水缩台转变为硅氧烷键,从而丧失了因氢键吸附水分的活往,就不再有吸附剂的性质,虽用水处理亦不能恢复其吸附活性。所以硅胶的活化不宜在较高温度进行(一般在170cC以上即有少量结合水失去)。
硅胶是一种酸性吸附剂,适用于中性或酸性成分的层析。同时硅胶又是一种弱酸性阳离子交换剂,其表面上的硅醇基能释放弱酸性的氢离子,当遇到较强的碱注化台物,则可因离子交换反应而吸附碱性化合物。
(2)氧化铝:氧化铝可能带有碱性(因其中可混有碳酸钠等成分),对于分离一些碱性中草药成分,如生物碱类的分离颇为理想。但是碱性氧化铝不宜用于醛、酮、醋、内酯等类型的化合物分离。因为有时碱性氧化铝可与上述成分发生次级反应,如异构化、氧化、消除反应等。除去氧化铝中绚碱性杂质可用水洗至中性,称为中性氧化铝。中性氧化铝仍属于碱性吸附剂的范畴,本适用于酸性成分的分离。用稀硝酸或稀盐酸处理氧化铝,不仅可中和氧化铝中含有的碱性杂质,并可使氧化铝颗粒表面带有NO3一或CI一的阴离子,从而具有离于交换剂的性质,适合于酸性成分的层析,这种氧化铝称为酸性氧化铝。供层析用的氧化铝,用于拄层析的,其粒度要求在100~160目之间。粒度大子100目,分离效果差:小于160目,溶浓流速大慢,易使谱带扩散。样品与氧化铝的用量比,一般在1:20~50之间层析柱的内径与柱长比例在1:10-20之向。
在用溶剂冲洗柱时,流速不宜过快,洗脱液的流速一般以每半~1小时内流出液体的毫升数与所用吸附剂的重量(克)相等为合适。
(3)活性炭:是使用较多的一种非极性吸附剂。一般需要先用稀盐酸洗涤,其次用乙醇洗,再以水洗净,于80℃干燥后即可供层析用。层析用的活性炭,最好选用颗粒活注炭,若为活性炭细粉,则需加入适量硅藻土作为助滤剂一并装柱,以免流速太慢。活性炭主要且于分离水溶性成分,如氨基酸、糖类及某些甙。活性炭的有为吸附作用,在水溶液中最强,在有机溶剂中则较低弱。故水的洗脱能力最弱,而有机溶剂则较强。例如以醇-水进行洗脱时,则随乙醇浓度的递增而洗脱力增加。活性炭对芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物,对大分子化合物的吸附力大于小分子化合物。利用这些吸附性的差别,可将水溶性芳香族物质与脂肪族物质分开,单糖与多糖分开,氨基酸与多肽分开。下边我就硅胶作为分离提纯的介质详细做以描述:硅胶表面结构概述在色谱和工业水处理领域中,无定形硅胶已得到了广泛的应用,它具有多孔的无定形结构,不产生任何x 射线衍射[1,4]。硅胶的表面存在着硅醇基团(si-oh)和暴露的硅氧烷键(si-o-si)。硅醇基团是强吸附的极性基团,而硅氧烷键是疏水基团。硅氧烷键上的δ键被dπ-pπ作用而加强,氧原子上的孤对电子参与π作用,不能参与给体与受体间的相互作用,不能形成氢键。scott和kucera证实硅氧烷基团几乎不吸附极性溶剂分子。然而,由于硅氧烷键的疏水作用性,可以吸附某些非极性溶剂分子。对硅胶改性而言,硅醇基比硅氧烷基重要得多。硅醇基团可以孤立、成对(双生)和缔合(连位)等不同的方式存在于硅胶表面。最近研究表明,不仅两个或两个以上的缔合硅醇基团可以形成键合对,甚至成对硅醇基团也可以形成键合对。硅胶表面的结构可以通过许多方法进行测定。一般情况下,随着比表面积的增加,硅胶表面上硅醇基团的浓度略有降低。通常硅醇含量的测定方法有同位素交换法、滴定法、光谱法和烷基铝法等。nawrock[1]报道了用同位素交换法测定硅胶表面的硅醇基浓度是8.0±1.0μmol/m2,而且这个数值常常被视为硅胶的物理化学常数。硅醇基团具有明显的酸性,测定的pka值是7.1。通过对硅胶表面的结构分析,可知硅胶表面硅醇基的类型、浓度和表面分布都会影响所制备键合相的性能,而硅胶的预处理则可以改变表面硅醇类型的分布,提高表面的缔合硅醇的含量,改善硅胶表面键合相的性能。 柱层析硅胶在生物工程技术中应用的突出优势 (1)具有刚性的骨架结构,机械强度高,可以耐受30MPa以内的压力;
(2)优良的吸附性能,对性质、结构相似乃至同分异构体都有理想的分离功能;
(3)有良好的热稳定性和化学稳定性;
(4)与有机柱填料相比,硅胶为固体以SiO2为基质的胶体,结构致密,在应用中不会发生有机质流失而污染目标产物;
(5)能从多组分溶液中有选择地吸附提纯同分异构体组分;
(6)在制备柱层析硅胶过程中,可以通过控制不同工艺条件生产出平均孔径20
㈡ 粗多糖提纯的方法有哪些
西安市天园生物制剂厂
大豆粗多糖:是从大豆籽粒中提取出的可溶性寡糖的回总称,大豆中的寡答糖属于а-半乳糖苷类,包括棉籽糖、水苏糖和Vabascose.
(1)、促进双歧杆菌的增殖:人体虽然不能直接利用粗多糖,但是粗多糖可被肠内细菌利用,并且能促进双歧杆菌的增殖。双歧杆菌是一种厌氧革兰氏阳性细菌,是维护和保持肠道菌群平衡的一个极为重要的因素,也是判断肠内外环境是否正常的一个可靠依据。
(2)、抑制病原菌:大豆粗多糖能促进双歧杆菌的增殖,从而抑制有害细菌如产生梭状芽孢杆菌的生长。双歧杆菌能发酵粗多糖产生短链脂肪酸和一些抗菌素物质,从而可抑制外源致病菌和肠内固有腐败细菌的生长繁殖。
(3)、防止便秘、腹胀,促进消化,调节胃肠功能:肠道内的双歧杆菌发酵粗多糖产生大量的短链脂肪酸(主要是醋酸和乳酸),能刺激肠道蠕动,从而促进消化,防止便秘的产生。
(4)、增强免疫功能:如果人较长期的食用无细菌食物,肠道就会因为缺少刺激而使其产生抗体的能力下降,从而容易诱发疾病。食用粗多糖,促进双歧杆菌的增殖,将对肠道免疫细胞产生刺激,提高其产生抗体的能力从而起到防治疾病的效果。
㈢ 确定ab-8大孔树脂纯化多糖可以直接用20%乙醇洗脱吗
确定
㈣ 多糖上大孔树脂脱色,色素会被洗脱下来吗
大孔吸附树脂都是这样的,你用罗门哈斯比如XAD系列比如XAD1600什么的也会有这个情况我以前摸条件的时候,用5%浓差乙醇溶液梯度洗脱,两三次下来就发现全是气泡~
㈤ 聚酰胺、硅胶、大孔树脂色谱柱适合分离的成分分别是什么
聚酰胺与硅胶对极性大的有机物吸附强 大孔树脂主要用于水溶性成分的分离纯化,尤其是大分子的亲水性成分如多糖、皂苷、黄酮、生物碱、三萜类化合物
㈥ 请问D301型大孔弱碱性苯乙烯系阴离子交换树脂可以用来分离多糖么,吸附硫酸根么不胜感激
D301弱碱苯乙烯阴树脂可以吸附硫酸根
如果用于多糖分离的话,需转型至指定形态,后采用色谱方式分离不同组分糖,粒度越均匀越好
㈦ 多糖脱除色素 用什么大孔树脂效果比较好
这个需要用吸附树脂了,而且要根据你的用途而定。要是实验室做实回验的话从国药中心买点树脂答,工业生产的话很多厂子都卖这种树脂,像什么凯瑞化工、丹东立和什么的。具体用到什么树脂需要问他们那边了。型号很多,具体用途也不一样。如果想了解详细的可以问我。
㈧ 我最近在用大孔树脂进行多糖的脱色,我在选择色素测定波长时遇到问题,求指导帮助!
采用水提、絮凝脱色、树脂吸附、重结晶工艺提取纯化。结果杜仲叶的水浸提液内浓缩后用1%壳聚糖容絮凝去杂、活性碳脱色得到进样液,进样液用NKA-9树脂吸附,50%乙醇解吸,洗脱液浓缩后的粗品经甲醇重结晶得到纯度≥97%的绿原酸,提取率 ≥65%。结论 优化完善了杜仲叶中绿原酸的提取纯化方法,为杜仲资源的充分综合利用和产业化开发提供了参考。
㈨ 大孔吸附树脂用什么洗脱比较好啊
可以走分子筛,用层析法分离,大孔树脂对极性物质的吸附效果很差