蛋白超滤膜浓缩法装置

㈠ 高浓度蛋白过滤用什么材质的滤膜好

超滤膜比较适合分离和浓缩大分子蛋白质

㈡ 常有的蛋白浓缩方法有哪些

蛋白浓缩方法基本有： 丙酮沉淀法；免疫沉淀法；三氯醋酸沉淀法；硫酸铵沉淀法；（低温）有机溶剂沉淀法；聚乙二醇沉淀法；超滤法；透析法；离子交换层析和冷冻干燥法…… 1.丙酮沉淀法；三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单，但是常常导致蛋白质变性。 2.免疫沉淀法：得有特异性抗体！ 3.硫酸铵沉淀法：利用高浓度盐将蛋白质析出（盐析），选择硫酸按是因为：盐析有效性，pH范围广，溶解度高，溶液散热少，经济！ 4.（低温）有机溶剂沉淀法：强调低温（0-4度以下）是因为10度时蛋白会在有机溶剂中变性，可用乙醇，丙酮……注意：Mg2+离子，pH值 5.聚乙二醇沉淀法：使用PEG时旨在个别情况下才会是蛋白质稍有变性！他溶解是散热低，形成沉淀的平衡时间短，通常达到30%时蛋白质就会达到最大量的沉淀！ 6.超滤法：主要针对小体积蛋白质溶液（几ml）此法更不易引起变性！不过得有浓缩器，不是哪个实验室都有的！ 7.透析法：主要用于更换蛋白质的缓冲液！的有透析袋！不需要特殊的仪器！ 8.离子交换层析：可用阴离子交换树脂进行浓缩！ 9.冷冻干燥法：在冷冻状态下让扬品种的液体升华 参考网址on http://www.bio1000.com/experiment/biochemical/351804.html

㈢ 如何用蛋白浓缩管

选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，最常见的是Ultra-15（10kD）。

通常应截留分版子量权不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。

新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。

(3)蛋白超滤膜浓缩法装置扩展阅读：

超滤浓缩离心管，最新推出专利产品Hydrosart膜2K型，具有极低的蛋白吸附特性，高流速、高通量，是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。

备有四种材质的超滤膜：聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart，可根据不同要求灵活选用；两种回收浓缩液的方法：既可用吸管直接吸取并回收，又可将离心管放入离心机反甩，将浓缩液甩入回收帽中，加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收；

㈣ 蛋白用超滤管浓缩容易沉淀怎么办

可能是这个蛋白的水溶性较差，也就是只能保持在一定浓度不能太高
另外就内和这个蛋白容的稳定性有关了，超滤时保持低温，体积缩小一点后就把滤液混匀避免局部浓度过高，选择更合适的缓冲液，添加一点甘油等小分子物质等都可以增加蛋白的稳定性。

㈤ 膜浓缩是什么概念具体怎么操作法

膜浓缩是一种改革传统工艺实现高效纯化浓缩的技术。它利用有效成分与液体的分子量的不同实现定向的分离，达到浓缩的作用。相对于传统的加热浓缩，具有能耗低，常温下进行，对产品影响小等优点，已经在以下进行应用：
1. 蛋白和酶的纯化浓缩
超滤已成为蛋白和酶等纯化和浓缩的高效过程。超滤浓缩的优点是无相变，一般不需加热，工序简化，适用pH范围宽和防止失活等，很适于热敏性物质的分离浓缩。通常是预处理的粗制品经超滤，使一些低分子物和盐透过膜，使酶和蛋白获得浓缩和精制。选用不同截留分子量的膜，不同的膜材质和工艺可实现不同酶和蛋白的纯化浓缩。
2. 染料等的纯化浓缩
纳滤已在分子量200～2000物料的纯化和浓缩方面获得广泛应用，如染料、抗生素、多肽和氨基酸等。一般的工艺是先经渗滤恒容除盐，再脱水浓缩，据产品最终要求的纯度和浓度，确定恒容除盐的程度和脱水浓缩的倍数。实践证明以纳滤，可代替沉淀，pH调节和（部分）蒸发等过程，达到产品纯化和浓缩的目的，这也是一新的高效节能过程。
3. 果汁、茶汁和医药制剂等的澄清和浓缩
果汁浓缩利于运输和存放，低档茶叶加工成速溶茶，既解决了低档茶出路，又提高了效益。在果汁浓缩中，通常先用UF对果汁进行澄清（预处理），之后用反渗透法浓缩，一般可浓缩到20°BX以上。在茶汁浓缩中，经预处理的茶汁，通过反渗透浓缩到含固量15～20%，之后冷冻贮存或喷雾干燥。膜技术在这一领域中的应用正在开拓，特别引人注目的应是医药（中草药）制剂的澄清和浓缩，MF(UF)+NF(RO)是最常用的工艺。

㈥ 常用的浓缩蛋白样品的方法有哪些

1、沉淀法（蛋白质的沉淀性质）
2、吸附法（吸水剂）
3、冻干法（真空低温脱水）
4、超滤法（分子量）

㈦ 蛋白在超滤管浓缩过程中出现沉淀怎么办

1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，最常见的是Ultra-15（10kD）。
通常应截留分子量不应专大于目的蛋属白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同，表格中有。

2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。

3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。

注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开
离心机，否则离心机出问题时，无法第一时间处理，后果不可预测！膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。

㈧ 超滤离心管浓缩蛋白会损失吗

会有少量损失。取决于缓冲液，滤网的网眼大小和蛋白质的分子量

㈨ 选择分离60KDa 的蛋白选择什么种类的超滤膜想让蛋白留在浓缩液里

那就是浓缩，如果要提高回收率用10K的超滤膜

㈩ 同一个超滤浓缩管可以用来纯化不同的蛋白吗

不可以的
不管是哪个公司生产超滤浓缩管使用后都会有蛋白残留在滤膜上，而不管是使用氯版化钠或者氢氧权化钠清洗都不能确保可以完全清理掉残留在膜上的蛋白。
如果不同的蛋白间混合使用，可能前一个蛋白会污染到后一个蛋白，甚至有些某些高活性的酶残留在上面会造成后一个蛋白被酶切降解，造成不必要的损失。