环氧树脂包埋切片

① 哪些树脂不能用于冷冻超薄切片，哪些树脂适用于冷冻超薄切片，请举例

哪些复树脂不能用于冷冻超薄切制片，哪些树脂适用于冷冻超薄切片，请举例？
A：Epoxi不能用于冷冻超薄切片，Acrylate适用于冷冻超薄切片。
备注说明：Super Glue的成分是Cyan Acrylate，是预配好的，接触空气中的水分子，即可固化聚合；Acrylate树脂需要另配，并在一定条件下才能聚合。

② 怎么制作包埋剂

在制作切片或超薄切片时，由于组织是柔软的，或局部的软硬不均，这样制作厚内薄均匀的切片是困难的。所容以有必要用一定物质浸透组织内部，使整个组织一样硬化，以利于切成薄片，这种物质叫做包埋剂。一般用光学显微镜观察的切片，用石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等作包埋剂；电子显微镜则用环氧树脂、聚苯乙烯树脂、异丁烯树脂及水溶性树脂。

③ 超薄切片技术操作过程是什么

观察病毒在细胞组织内的状态，可采取超薄切片技术，将标本用固定液固定后，经过脱水渗透包埋聚合切片等过程，切成薄片然后染色检镜。

（1）固定。

常用的固定液主要有锇酸固定液、醛固定液、高锰酸盐固定液等。

①锇酸固定液：这是最常用的固定液，作用迅速，新鲜的锇酸呈浅黄色，其蒸气极毒，使用时应在强通风柜中把装有锇酸的安瓿瓶在缓冲液内敲碎。

②醛固定液：植物材料具有厚壁，锇酸固定液不能很好渗透，有时固定得不好。而醛固定液往往可获得较好效果，同时还不会破坏酶的活性，可以在切片上进行组织化学测定。常用的有甲醛固定液和戊二醛固定液。

③高锰酸盐固定液：此种固定液可保持膜的结构，但破坏核糖体并失去酶的活性，对维持TMV粒子在细胞内的排列比戊二醛及锇酸固定液好。

缓冲液可用1%液体锇酸和1%过锰酸钾，也可用磷酸盐巴比妥-醋酸和二甲胂酸盐缓冲液。固定可在0～5℃或室温下进行，供试材料尽可能使用幼嫩的植株，小的根可整个固定，叶片需剪成1～2cm的小块。叶中的空气会阻止固定液与大部分细胞接触，可在真空下把空气除去。

组织固定后必须彻底冲洗，在进行锇酸固定前要把多余的醛用缓冲液冲洗彻底。固定后的组织一定要进行脱水，特别是采取不溶于水的树脂包埋时，在室温低于4℃时，丙酮或乙醇脱水效果都很好。

（2）包埋。

包埋用的树脂可分为四类，即甲基丙烯酸酯、环氧树脂、聚酯树脂和各种水溶性化合物。

甲基丙烯酸酯在聚合过程中可能引起组织损伤，在电子束轰击下，这种介质有升华的趋向，引起细微组织结构的破坏。但甲基丙烯酸酯也有优点，它比环氧树脂能切出较大的切块切面，切片也容易染色。

环氧树脂和聚酯树脂是保存细胞细微结构的最好包埋材料，目前最常用的环氧树脂是Epon和Araldite，用它包埋的标本可避免聚合损伤，树脂切片在电镜下不升华，可使标本连续观察，并保存细微结构。

水溶性树脂剂对一些不希望用有机溶剂脱水，或利用组织切片做酶外处理试验特别有用，其缺点是不能很好地保持细胞的细微结构。

组织需在包埋介质中充分渗透，常用的有两种方法：

①环氧树脂包埋组织的渗透。将丙醇脱水的组织转到装有6ml由等量丙酮和环氧树脂的标本管中，将标本管放在烤箱内由倾斜45°角的马达带动的轮上，使其不断转动，丙酮由开口的管中蒸发，当丙酮味消失后，将组织在擦镜纸上吸干，浸入新鲜的树脂中，再于同一温度下放4h，再一次吸干组织后，移到装有新鲜树脂的胶囊内，将Epon块放在40℃下，直至完全变硬，并继续在60℃下凝固12h。

②水溶性树脂包埋组织的渗透。将组织在戊二醛中固定，在缓冲剂中冲洗1～12h，然后在80%GMA单体和20%的水中脱水20min，再于97%GMA单体和3%的水中继续脱水20min后，在制备的聚合混合物中渗透过夜。将组织放在烘炉内的明胶胶囊中，注满聚合混合物除去所有空气泡，盖好使其不使与空气接触，把胶囊用金属丝垂直吊起，用长波长的紫外光聚合1～3d即可。

（3）切片。

切片前切去埋块四周的树脂，留下高2～3mm的标本正方柱，装入切片机，使埋块面的平行边与刀口平行，把刀慢慢向标本推进，通过切片机上的目镜系统，把刀推到看不到有间隙之处，每次推进0.5～1.0μm，直到切下切片。切片厚度以能达到浮于液面的切片呈灰色为最好。切片可用醋酸双氧铀和柠檬酸铅进行染色。染色后的切片在0.1N氢氧化钠中冲洗，然后用水冲洗。

④ 环氧树脂包埋的样品很软，怎么办

环氧来树脂包埋块硬自度应该如何调节(环氧树脂,包埋,电镜,切片)
摘要: [环氧树脂包埋块硬度应该如何调节(环氧树脂,包埋,电镜,切片)] 只找到关于环氧树脂在电镜切片时的使用配方，但是，我不准备做电镜，只想在一般的推拉式切片机上完成切片，按照电镜的方法配置出来的包埋块太硬了，显然不适用于一般的刀片，现在我有做电镜用的Durcupan ACM，主要成分包括环氧树脂Epoxy resin，固化交联剂（anhydride of a dicarboxylic acid with aliphatic side chain），催化剂(pheno 关键词:[环氧树脂 包埋 电镜 切片 催化剂]……

⑤ 求助！甲基丙烯酸甲酯包埋的具体步骤！

首先复电镜是用高能电子而不是制用光作为媒介因此只有灰，银色和金色适合，其概念就不是染色了！常用超薄切片和冰冻蚀刻术。\r\n超薄切片：锇酸固定 酒精脱水 甲基丙烯酸甲酯或环氧树脂包埋 最后切片\r\n冰冻蚀刻术 利用快速冷冻标本 冰刀切割 再铂炭升华

⑥ 切片后，发现包埋在树脂中的样品颗粒破碎，或整体脱落，怎么办

切片后发现包埋在树脂中的样品颗粒破碎或整体脱落，我们应该配合医生积极的选择手术的治疗。

⑦ 包埋剂有什么作用

在制作切片或超薄来切片时，由于源组织是柔软的，或局部的软硬不均，这样制作厚薄均匀的切片是困难的。所以有必要用一定物质浸透组织内部，使整个组织一样硬化，以利于切成薄片，这种物质叫做包埋剂。一般用光学显微镜观察的切片，用石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等作包埋剂；电子显微镜则用环氧树脂、聚苯乙烯树脂、异丁烯树脂及水溶性树脂。

⑧ 多孔类或内部中空的样品，用什么树脂包埋比较好

用低连稠度的树脂，例如Spurr。并需要辅助抽真空去气步骤，确保树脂充分渗透

⑨ 什么是环氧树脂包埋

第一次听说过！晕

⑩ 有哪些材料可以用作包埋剂

在制作切片或超薄切片时，由于组织是柔软的，或局部的软硬不均，这样制专作厚薄均匀的切片是属困难的。所以有必要用一定物质浸透组织内部，使整个组织一样硬化，以利于切成薄片，这种物质叫做包埋剂。一般用光学显微镜观察的切片，用石蜡、火棉胶、炭蜡、明胶等作包埋剂；电子显微镜则用环氧树脂、聚苯乙烯树脂、异丁烯树脂及水溶性树脂。