克隆粉树脂
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『壹』 可降解塑料是什么意思
可降解塑料是一类其制品的各项性能可满足使用要求,在保存期内性能不变,而使用后在自然环境条件下能降解成对环境无害的物质的塑料。因此,也被称为可环境降解塑料。
可降解塑料又可分为完全生物降解塑料和破坏性生物降解塑料两种。破坏性生物降解塑料主要包括淀粉改性聚乙烯PE、聚丙烯PP、聚苯乙烯PS等。
完全生物降解塑料主要是由天然高分子(如淀粉、纤维素、甲壳质)或农副产品经微生物发酵或合成具有生物降解性的高分子制得,如热塑性淀粉塑料、脂肪族聚酯、聚乳酸、淀粉/聚乙烯醇等均属这类塑料。
以淀粉等天然物质为基础的生物降解塑料主要包括以下几种产品:聚乳酸、聚羟基烷酸酯(PHA)、淀粉塑料、生物工程塑料、生物通用塑料(聚烯烃和聚氯乙烯)。
(1)克隆粉树脂扩展阅读
使用降解塑料可带来方便,如高尔夫球场用球钉,热带雨林造林用苗木固定材料。
具体应用在:
1、农林渔业,地膜,保水材料,育苗钵,苗床,绳网,农药和农肥缓释材料。
2、包装业,购物袋,垃圾袋,一次性餐盒,方便面碗,缓冲包装材料。
3、体育用品,高尔夫球场球钉和球座。
4、卫生用品,妇女卫生用品,医用褥垫,一次性胡刀。
5、医药用材,绷带,夹子,棉签用小棒,手套,药物缓释材料,以及手术缝合线和骨折固定材料。
『贰』 有谁知道鸡蛋提取溶菌酶的合作项目是真是假 多谢
一种用鸡蛋提取溶菌酶的新工艺技术
本发明公开了一种用鸡蛋提取溶菌酶的新工艺。该工艺是在现有工艺中的沉淀步骤中加入氧化锌参与溶菌酶的沉淀,这样就可解决多年来人们单纯使用硫酸铵沉淀溶菌时,沉淀速度慢及沉淀不完全的问题,同时可提高溶菌酶的活性,通过该工艺可使溶菌酶的沉淀速度提高6-12倍。
一种分离溶菌酶的方法
本发明分离溶菌酶的方法,以鸡蛋清为原料,加水适当稀释后,搅拌均匀,加酸调pH值至4.0-5.0,静置、过滤除去沉淀,将滤液升温至75-80℃,冷却至室温,静置不少于10小时,过滤得上清液,加碱调pH值为7.5-8.0,加乙醇至产生白色沉淀,过滤,冲洗,干燥即得产品;本方法工艺步骤简、生产周期短、溶菌酶得率高;所制得的溶菌酶可用作防腐用的食品添加剂。
一种生产基因工程重组人溶菌酶的方法
一种生产基因工程重组人溶菌酶的方法,是运用分子生物学技术和基因工程技术,将人溶菌酶基因克隆入酵母菌体内进行表达,然后通过提取、纯化制出人溶菌酶。本发明由于利用基因工程重组技术,发酵生产人溶菌酶,能够较大批量生产人溶菌酶,又避免了从组织中提取易受病源污染的问题,其产品具有稳定、纯净的特点。
溶菌酶亲和层析凝胶介质的制备方法
溶菌酶亲和层析介质的制备方法。将壳聚糖溶于醋酸或盐酸溶液中,再加入3-6倍体积的甲醇,过滤,于滤液中加入脂肪酸酐让其酰化成凝胶状,捣碎凝胶并用水将其洗至中性,用5-10%的NaOH或KOH溶液处理以脱去非N-位的脂肪酰化,再用水洗至中性,在酸性条件下用亚硝酸盐氧化除去凝胶内未酰化的游离氨基,而后用碱调至中性,用水洗去酸和盐类等残留物抽干即得所需的介质。
萝卜溶菌酶及其制备方法
本发明是以萝卜的根叶为原料,经匀浆浸提过滤,滤液经亲和吸附,装柱洗涤和亲和洗脱、收集酶液、透析、浓缩和冻干成酶制剂。酶活力高达4-7万U/mg。蛋白,酶的活性中心含有Trp、His、Glu和Asp残基,杀菌谱广,不仅对G↑〔+〕菌有杀灭作用,对G↑〔-〕菌同样有杀灭作用。萝卜溶菌酶的成功提取,将为食品业、农作物的病虫害防治上和药医治疗上开拓了新途径。
从咸蛋清中提取溶菌酶方法
咸蛋黄被广泛应用于食品加工中,而咸蛋(鸭蛋或鸡蛋)取黄后留下的咸蛋清因含有极高浓度的食盐和异味限制了应用而常被废弃。本发明经普查表明咸蛋清中尚含有丰富的溶菌酶含量,可以作为生产溶菌酶的原料;进而采用脱氨酰化壳聚糖凝胶亲和吸附法,直接从咸蛋清中仅经一步便纯化得溶菌酶,所得纯化酶的比活力大于70000U/mg蛋白,回收率可达70%。
一种以溶菌酶为主要成分的外用凝胶剂及其制备方法
本发明是一种以溶菌酶为主要成分的外用凝胶剂及制备方法。该凝胶剂可以是水性凝胶,也可以是油性凝胶。根据需要配方中可以加入少量抗菌剂、抗病毒剂、抗滴虫剂、消毒防腐剂、润滑剂、清凉剂和芳香剂等辅助剂。适用于阴部感染的女性,更年期妇女及已婚妇女日常卫生保健,还可用于旅馆、居家的浴缸、浴盆等洁具的消毒,防止性病传播和预防交叉感染。本发明用于消炎杀菌、清洁阴道、消除瘙痒、清除异味,总有效率达81.58%。动物实验结果表明该产品无毒、无刺激性和致敏性,对使用者卫生、安全、无害。具有预防保健效果好、使用方便、作用维持时间长、副作用小,适用范围广等特点,是一种安全、卫生的新型阴部保健品。
溶菌酶在奶制品中的应用
本发明提供了溶菌酶的一种新的应用领域,即溶菌酶在奶制品中的应用技术,其作法是:在溶菌酶中加入保护剂,混合均匀后成溶菌酶集合物,按常规生产工艺制作奶制品,在生产进行到最后一步-分装工序之前,加入溶菌酶集合物,混匀后再分装出厂,成品奶制品中溶菌酶的活性在60℃-80℃时不失活,且含量可达到人乳的水平,采用本发明应用技术生产的奶制品,其营养成份丰富,具有很好的免疫功能,可取代现有的牛乳制品喂养婴幼儿,增强婴幼儿的免疫、抗病能力。
一种溶菌酶蛋白生产工艺及其应用
本发明涉及一种人溶菌酶蛋白生产工艺。目前市场上的溶菌酶蛋白都来源于其他种属动物机体,对人体而言是异种蛋白,有很强的抗原性,副作用大。本发明的生产的溶菌酶蛋白具有人源的天然氨基酸序列,解决了异源性溶菌酶用于人体内的抗原性问题。更重要的是,人体中的溶菌酶活性最高,本发明提供的蛋白生产工艺与传统工艺相比,分离纯化步骤简单易行,能得到较高的蛋白投入产出比,为人溶菌酶蛋白的工业化生产提供了一个高效的生产工艺。本发明还涉及上述方法及其产物的应用。
人核糖核酸酶U和人溶菌酶的两种进化酶
本发明涉及两种人源酶的分子进化酶。本发明的进化酶分别是以人核糖核酸酶U和人溶菌酶为原料,经过基因钓取,定向进化,表达筛选等步骤,最后制得。本品具有制备工艺简单、生产成本低、酶活力较高、稳定性好、应用价值大等优点,可独自或联合广泛地应用于抗菌药物、抗病毒药物、抗炎症药物、治疗龋齿药物、治疗爱滋病药物等医药工业各领域。
高表达、高纯度、高活性基因重组人溶菌酶的生产及用途
本发明涉及一种高表达、高纯度、高活性基因重组人溶菌酶的生产方法及其新用途。提供了利用提取纯化的基因工程技术表达的人溶菌酶的溶菌活性,用于临床上细菌和真菌的感染,特别是耐药性细菌感染的治疗方法,以及革兰阴性菌感染治疗后内毒素引发的后遗症的治疗方法。提供了用于各种治疗用途的抗生素和人溶菌酶的药用组合物。
从鸡蛋及鸟类蛋提取溶菌酶的方法
本发明的名称是:从鸡蛋及鸟类蛋提取溶菌酶的方法。属于提取生物活性物质技术领域。本发明的目的在于:提供一种溶菌酶的提取方法,简单、易操作。本发明采用下述步骤:获取蛋清,加入氯化钠溶液并搅拌;加入盐酸溶液,水域加温至40℃;自然冷却至常温,加入乙酸溶液,水域加温至80℃;离心后过滤,在滤清夜中加入氯化钠搅拌后再次加温至60℃;加入丙酮,滤取白色絮状物,自然干燥后,碾粉并包装。
制备溶菌酶的方法
本发明提供一种制备溶菌酶的有效方法,其特征为使用硅藻土、高岭土、沸石或其混合物选择性地吸附蛋白中的溶菌酶,及随后以离子溶液进行洗提。上述硅藻土、高岭土及沸石对溶菌酶具有优异的选择性吸附能力,可提高溶菌酶的纯化倍数。
一种人溶菌酶系列化妆品及其制备方法
本发明涉及一种化妆品及其制备方法,特别是涉及一种人溶菌酶Humanlysozyme系列化妆品及其制备方法。人溶菌酶系列化妆品的主要成分是人溶菌酶Humanlysozyme(HLZ),其工艺过程如下:首先将人溶菌酶制备后备用,先将原料进行搅拌,均质乳化后冷却到45度,将制备好的人溶菌酶到入,经真空脱气搅拌至一定温度即可。积极效果在于原料易得,工艺简单,效果显著,并且易于推广应用。
家用长效除臭剂
本剂是以沸石、氯化镁、氧化镁和安息香酸配制成的家用长效除臭剂。一、特点:(1)除臭力强是。由于沸石和氯化镁、氧化镁相混合,沸石微孔结构中吸附的大气中的水分,能被氧化镁和氯化镁吸附,因而使沸石微孔结构的孔隙得到再生,使沸石的除臭能力牧师以充分发挥;再加氯化镁和氧化镁也都有除臭功能,故作为整体,除臭力强是。(2)有效除臭期长。沸石与氯化镁、氧化镁相配合,使氧化镁包覆于氯化镁的外部表面,从而使氯化镁的吸湿能力得到适当抑制,使氯化镁不致因为吸湿过多而潮解。因此,三者得以长期发挥作用,使有效除臭期大幅度延长。(3)除臭性能稳定。本剂中加有安息香酸,可以防止除臭剂因吸附臭气和水分而受到损害。可保持性能稳定、长期使用效果好。(4)原料价廉易得。二、用途:可用于厕所、居室、病房、鞋箱等除臭。编号35189
L—抗坏血酸—硫酸亚铁多效除臭剂
除臭剂种类虽多。但各有不足。例如,覆盖型除臭剂,只能将臭覆盖掩蔽,不能除去,因而往往要残留异臭;吸附型除臭剂,因吸附容量所限,届时吸附能力必然降低或丧失;酸碱中和型除臭剂,除臭范围只限于能够同酸碱相结合的物质;含枸橼酸和顺丁烯二酸类的除臭剂,不能除去硫醇类臭气等。本剂是以L-抗坏血酸和硫酸亚铁为有效成分配制而成,不存在上述缺点,是能够除去各种恶臭的多效除臭剂。一、特点:(1)原料易得,价格低廉,制造容易,使用方便。(2)本剂中含有的L-抗坏血酸,可使硫酸亚铁经常维持活性状态,使之与氨、胺臭中的胺形成络合物,与含硫恶臭中的硫生成(铁-硫)键,故对于氨类恶臭和含硫恶臭均能有效除去,除臭范围广的。(3)性能稳定,即使长期暴露于空气中或潮湿条件下,除臭效果也无变化。(4)原料都是公认的可食性物质,即使同食品接触,也可以确保安全。(5)可以制成各种形态。使用于各个领域。二、用途:用于厕所、垃圾箱、冷库、冰箱等的除臭,均有良好效果。特别是用于除去氨类、硫醇类的恶臭,效果尤佳。用本剂的液体除臭剂浸渍纸、布等,制成除臭片或除臭纸,直接包裹鱼、肉等食品,贮放于冰箱、冷库、防止其臭味向其他食品转移和串味,或用于去除冰箱、冷库的异味,也有良好效果。编号35191
人体消臭剂
为消除来自人体的恶臭--腋臭、汗臭、脚臭、头发臭、生理臭等,使用的消臭剂,大多是由作为抑汗剂使用的具有收敛作用的羟基氯化铝、杀菌剂六氯酚,或各种季铵化合物及掩蔽剂丁子香酚等,单独或经任意组配制成。然而,这些消臭剂的使用效果并不能完全令人满意。例如,抑汗剂,从生理学看,并不能完全抑制发汗;杀菌剂,因安全性问题,并不能以有效的足够的浓度添加;掩蔽剂同汗臭掺合在一起,又会产生恶臭等等。因而不能得到满意结果。本剂是以合成树脂和金属氧化物制成的复合粉体为消臭活性物质,再根据需要加入各种添加剂配制而成,用于消除人体恶臭,取得了比较满意的结果。一、特点:(1)消除人体恶臭,效果好。(2)使用安全,对人体无害。(3)可以制成各种剂型,例如气溶胶、粉剂、膏剂、棒状等剂型,使用方便。二、用途:适用于消除来自人体的腋臭、汗臭、脚臭、头发臭、生理臭等各种恶臭。编号35198
『叁』 跪求实验方案急。关于植物小分子多肽的提取分离和分析 最好用到高效液相提取的
多肽类化合物广泛存在于自然界中,其中对具有一定生物活性的多肽的研究,一直是药物开发的一个主要方向。生物体内已知的活性多肽主要是从内分泌腺组织器官、分泌细胞和体液中产生或获得的,生命活动中的细胞分化、神经激素递质调节、肿瘤病变、免疫调节等均与活性多肽密切相关。随着现代科技的飞速发展,从天然产物中获得肽类物质的手段也不断得到提高。一些新方法、新思路的应用。不断有新的肽类物质被发现应用于防病治病之中。本文介绍了近几年肽类物质分离、分析的主要方法研究进展。
1 分离方法
采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物质分析中常用的手段,如层析、叫泳等。
1.1 高效液相色谱(HPLC)
HPLC的出现为肽类物质的分离提供了有利的方法手段,因为蛋白质、多肽的HPLC应用与其它化合物相比,在适宜的色谱条件下不仅可以在短时间内完成分离目的,更重要的是HPLC能在制备规模上生产具有生物活性的多肽。因此在寻找多肽类物质分离制备的最佳条件上,不少学者做了大量的工作。如何保持多肽活性、如何选择固定相材料、洗脱液种类、如何分析测定都是目前研究的内容。
1.1.1 反相高效液相色谱(RP-HPLC)
结果与保留值之间的关系:利用RP-HPLC分离多肽首先得确定不同结构的多肽在柱上的保留情况。为了获得一系列的保留系数,Wilce等利用多线性回归方法对2106种肽的保留性质与结构进行分析,得出了不同氨基酸组成对保留系数影响的关系,其中极性氨基酸残基在2~20氨基酸组成的肽中,可减少在柱上的保留时间;在10~60氨基酸组成的肽中,非极性氨基酸较多也可减少在柱上的保留时间,而含5~25个氨基酸的小肽中,非极性氨基酸增加可延长在柱上的保留时间。同时有不少文献报道了肽链长度、氨基酸组成、温度等条件对保留情况的影响,并利用计算机处理分析得到每种多肽的分离提取的最佳条件。
肽图分析(Peptide Mapping):肽图分析是根据蛋白质、多肽的分子量大小以及氨基酸组成特点,使用专一性较强的蛋白水解酶[一般未肽链内切酶(endopeptidase)]作用于特殊的肽链位点将多肽裂解成小片断,通过一定的分离检测手段形成特征性指纹图谱,肽图分析对多肽结构研究合特性鉴别具有重要意义。利用胰蛋白酶能特意性作用于Arg和Lys羧基端的肽链的性质,通过RP-HPLC法采用C18柱检测了重组人生长激素特征性胰肽图谱。同时胰岛素的肽图经V8酶专一裂解也制得,并可鉴别仅相差一个氨基酸残疾的不同种属来源的胰岛素。人类肿瘤坏死因子的单克隆抗体结构也应用酶解法及在线分析技术确定了肽图,便于鉴定分析。此项技术已经在新药开发中得到广泛应用。
1.1.2 疏水作用色谱(Hydrophobic interaction chromatogrphy,HIC)
HIC是利用多肽中含有疏水基因,可与固定相之间产生疏水作用而达到分离分析的目的,其比RP-GPLC具有较少使多肽变性的特点。利用GIC分离生产激素(GH)产品的结构与活性比EP-GPLC分离的要稳定,活性较稳定。Geng等利用HIC柱的低变性特点,将大肠杆菌表达出的经盐酸胍乙啶变性得到人重组干扰素-γ。通过HIC柱纯化、折叠出高生物活性的产品。不同人尿表皮生长因子(EGF)也利用HIC纯化到了,均具有良好的生物活性。HIC可将未经离子交换柱的样品纯化。而RP-HPLC则不能达到这一要求。
1.1.3 分子排阻色谱(Sizs-Exclusion chromatogrphy,SEC)
SEC是利用多肽分子大小、形状差异来分离纯化多肽物质,特别对一些较大的聚集态的分子更为方便,如人重组生长激素(hgH)的分离,不同结构、构型的GH在SEC柱上分离行为完全不同,从而可分离不同构型或在氨基酸序列上有微小差异的变异体,利用SEC研究修饰化的PEG的分离方法,此PEC具有半衰期长、作用强的特点。一些分子量较大的肽或蛋白均可利用此法分离分析。
1.1.4离子交换色谱(Iron-Exchange chromatography,IEXC)
IEXC可在中性条件下,利用多肽的带电性不同分离纯化具有生物活性的多肽。其可分为阳离子柱与阴离子柱两大类,还有一些新型树脂,如大孔型树脂、均孔型树脂、离子交换纤维素、葡聚糖凝胶、琼脂糖凝胶树脂等。在多肽类物质的分离分析研究中,对多肽的性质、洗脱剂、洗脱条件的研究较多,不同的多肽分离条件有所不同,特别是洗脱剂的离子强度、盐浓度等对纯化影响较大。Wu等报道利用离子交换柱层析法,探讨分离牛碳酸酐异构体和牛血清白蛋白、鸡血清白蛋白酶的提取条件,获得了有价值的数据供今后此类物质分离研究。
1.1.5膜蛋白色谱(Chromatography of Membrane Protein,CMP)
CMP+分离强蔬水性蛋白、多肽混合物的层析系统,一般有去垢剂(如SDS)溶解膜蛋白后形成SDS-融膜蛋白,并由羟基磷灰石为固定相的柱子分离纯化。羟基磷灰石柱具有阴离子磷酸基团(P-端),又具有阳离子钙(C-端),与固定相结合主要决定于膜蛋白的大小、SDS结合量有关。利用原子散射法研究cAMP的分离机制发现,样品与SDS结合后在离子交换柱上存在SDS分子、带电荷氨基酸与固定相中带电离子间的交换,从而达到分级分离的目的。
1.1.6高效置换色谱(High-Performance Displacement Chromatography,HPDC)
HPDC是利用小分子高效置换剂来交换色谱柱上的样品,从而达到分离的目的。它具有分离组分含量较少成分的特性。利用HPDC鉴定分离了低于总量1%组分的活性人重组生长激素(rHG )。在研究非毒性交换剂时Jayarama发现硫酸化葡萄糖(Detran Sulfate,DS)是对β乳球蛋白A和B的良好置换剂,一般DS的相对分子质量为1×104和4×104最宜。研究表明置换剂的相对分子质量越低,越易于与固定相结合,因此在分离相对分子质量小的多肽时,需要更小的置换剂才能将其置换纯化出来。
1.1.7 灌注层析(Perfusion Chromatography,PC)
PC是一种基于分子筛原理与高速流动的流动相的层析分离方法,固定相孔径大小及流动相速度直接影响分离效果。试验证明其在生产、制备过程中具有低投入、高产出的特性。目前市场上可供应的PC固定相种类较多,适合于不同分子量的多肽分离使用。
1.2 亲和层析(Affinity Chromatography,AC)
AC是利用连接在固定相基质上的配基与可以和其特异性产生作用的配体之间的特异亲和性而分离物质的层析方法。自1968年Cuatrecasas提出亲和层析概念以来,在寻找特异亲和作用物质上发现了许多组合,如抗原-抗体、酶-催化底物、凝集素-多糖、寡核苷酸与其互补链等等。对多肽类物质分离目前主要应用其单抗或生物模拟配基与其亲和,这些配基由天然的,也有根据其结构人工合成的。Patel等人利用一系列亲和柱分离纯化到了组织血浆纤维蛋白酶原激活剂蛋白多肽。
固定金属亲和层析(Immobilized Metal Affinity Chromatography.LMAC)是近年来发展起来的一种亲和方法。其固定相基质上鳌合了一些金属离子,如Cu2+、Ni2+、Fe3+等,此柱可通过配为键鳌合侧链含有Lys、Met、Asp、Arg、Tyr、Glu和His的多肽,特别是肽序列中含有His-X-X-X-His的结构最易结合到金属离子亲和柱上,纯化效果较好。其中胰岛素样生长因子(Insylin Like Growth Factor,IGF)、二氢叶还原酶融合蛋白等均用此方法分离到纯度较高的产品。
Chaiken等人报道了另一种亲和层析方法,利用反义DNA表达产生,其与正链DNA表达产生的肽或蛋白具有一定的亲和性,如Arg加压素受体复合物,已用此法分离得到。DNA与蛋白、多肽复合物之间的作用也是生物亲和中常用的方法。将人工合成的寡核苷酸结合在固定相基质上,将样品蛋白或多肽从柱中流过,与之结合可达到分离特定结构多肽的目的。
1.3 毛细管电泳(Capillary electrophoresis,CE)--分离分析方法
CE是在传统的电泳技术基础上于本世纪60年代末由Hjerten发明的,其利用小的毛细管代替传统的大电泳槽,使电泳效率提高了几十倍。此技术从80年代以来发展迅速,是生物化学分析工作者与生化学家分离、定性多肽与蛋白类物质的有利工具。CE根据应用原理不同可分为以下几种;毛细管区带电泳Capillary Zone electrophoresis,CZE)、毛细管等电聚焦电泳(Capillary Isoeletric Focusing,CIEF)毛细管凝胶电泳(CapillaryGelElectrophoresis,CGE)和胶束电动毛细管层析(Micellar Electokinetic Electrophoresis Chromatorgraphy,MECC)等。
1.3.1 毛细管区带电泳(Capillary Zone Electrophoresis,CZE)
CZE分离多肽类物质主要是依据不同组分中的化合物所带电性决定,比传统凝胶电泳更准确。目前存在于CZE分离分析多肽物质的主要问题是天然蛋白或肽易与毛细管硅胶柱上的硅醇发生反应,影响峰形与电泳时间,针对这些问题不少学者做了大量实验进行改进,如调节电池泳液的PH值,使与硅醇反应的极性基团减少;改进毛细管柱材料的组成,针对多肽性质的不同采取不同的CZE方法研究分离5个含9个氨基酸残基的小肽,确定了小肽分析的基本条件,即在低PH条件下,缓冲液中含有一定浓度的金属离子如Zn2+等,此时分离速度快而且准确。
1.3.2细管等电聚电泳(Capillary Isleletric Focusing,CIEF)
由于不同的蛋白、多肽的等电点(PI)不同,因此在具有不同pH梯度的电泳槽中,其可在等电点pH条件下聚集沉淀下来,而与其他肽类分离开来。CIEF在分离、分析混合多肽物质中应用不多,主要应用与不同来源的多肽异构体之间的分离,如对rHG不同异构体分离。由于在CIEF柱表面覆盖物的不稳定性限制了此法的广泛应用。
1.3. 3毛细管凝胶电泳 (Capillary Gel Electrophoresis,CGE)
CGE是基于分子筛原理,经十二烷基磺酸钠(SDS)处理的蛋白或多肽在电泳过程中主要靠分子形状、分子量不同而分离。目前,又有一种非交联欢、线性、疏水多聚凝胶柱被用于多肽物质的分离分析,此电泳法适于含疏水侧链较多的肽分离,这种凝胶易于灌注,使用寿命长,性质较为稳定。
1.3.4胶束电动毛细管层析(Micellar Electrokinetic Electorphoresis Chromatography, MECC)
MECC的原理是在电泳液中加入表面活性剂,如SDS,使一些中性分子带相同电荷分子得以分离。特别对一些小分子肽,阴离子、阳离子表面活性剂的应用都可使之形成带有一定电荷的胶束,从而得到很好的分离效果。有文献报道在电解液中加入环糊精等物质,可使用权含疏水结构组分的多肽选择性与环糊精的环孔作用,从而利用疏水作用使多肽得到分离。
1.4多肽蛋白质分离工程的系统应用
以上提到的分离多肽的技术在实际应用过程中多相互结合,根据分离多肽性质的不同,采用不同的分离手段。特别是后基因组时代,对于蛋白质组深入的研究,人们对于分离多肽及蛋白质的手段不断改进,综合利用了蛋白质和多肽的各种性质,采用包括前面提到的常规蛋白多肽提取方法,同时利用了高效液相色谱,毛细管电泳,2-D电泳等手段分离得到细胞或组织中尽可能多的蛋白多肽。在蛋白质组学研究中系统应用蛋白和多肽分离鉴定的技术在此研究中即是分离手段也是分析方法之一。特别是以下提到的质谱技术的发展,大大的提高了蛋白多肽类物质的分析鉴定的效率。
2 分析方法
2.1 质谱分析(Mass Spectrometry, MS)
MS在蛋白、多肽分析中已经得到了广泛应用,特别是在分离纯化后的在线分析中,MS的高敏性、快速性特别适合多肽物质分析鉴定。其中连续流快原子轰击质谱(Continuous-Flow Fast Atom Bombardment, cf-FAB)和电雾离子化质谱(Electrospray Ionization, EIS)是近几年发展起来的新方法。
2.1.1连续流快原子轰击质谱(Continuous-Flow Fast Atom Bombardment, cf-FAB)
cf-FAB是一种弱离子化技术,可将肽类或小分子量蛋白离子化成MH+或(M-H)形式。主要应用于肽类的分离检测,其具有中等分辨率,精确度大于+0.2amu,流速一般在0.5-1.5μl·Ml-1。在测定使流动相需加0.5%-10%基质如甘油和高有机溶剂成分,使样品在检测探针处达到敏感化。cf-FAB常与HPLC、CEZ等方法结合使用达分离分析的目的,许多多肽的cf-FAB分析方法已经建立,并得到很好的应用。如Hideaki等利用此法研究L-Pro、L-Ala的四肽化合物系列。证明L-Pro在保持小肽构相稳定性。连接分子方面具有重要意义。
2.1.2 电雾离子化质谱(Electrospray Ionozation,EIS)
EIS可产生多价离子化的蛋白或多肽,允许相对分子质量达1×105蛋白进行分析,分辨率在1500-2000amu。精确度在0.01%左右。EIS更适合相对分子质量大的蛋白质的在线分析,且需要气化或有机溶剂使样品敏感化。利用EIS与HPLC联合分离分析GH和血红蛋白均获成功,其也可与CEZ联合应用。
2.1.3 基质辅助激光解析/离子化-飞行时间质谱(Matrix-associated laser disso-ciation/ionization time of flight mass spectrmtry,MALDI-TOF MS)
MALDI-TOF是目前蛋白质鉴定中精确测定测定分子质量的手段,特别适合对混合蛋白多肽类物质的相对分子质量的测定,灵敏度和分辨率均较高。它是目前蛋白质组学研究的必备工具。同时结合液相色谱的联用技术可以高效率的鉴定多肽物质。特别是当各种原理的质谱技术串联应用时,不但可以得到多肽的相对分子质量信息,还可以测定它的序列结构,此项技术将在未来蛋白质组学研究中起到决定性作用。
2.2 核磁共振(Nuclear Magnetic resonance,NMR)
NMR因图谱信号的纯数字化、过度的重叠范围过宽(由于相对分子质量太大)核信号弱等原因,在蛋白、多肽物质的分析中应用一直不多。随着二维、三维以及四维NMR的应用,分子生物学、计算机处理技术的发展,使NMR逐渐成为此类物质分析的主要方法之一。NMR可用于确定氨基酸序列、定量混合物中的各组分组成含量等分析中。但要应用于蛋白质分析中仍有许多问题需要解决,例如,如何使分子量大的蛋白质有特定的形状而便于定量与定性分析,如何减少数据处理的时间问题等。这些问题多有不少学者在进行研究。虽然在蛋白质分析中应用较少,NMR在分析分子中含少于30个氨基酸的小肽时是非常有用的,可以克服上述蛋白质分析中的缺点而达到快速准确分析的目的。
2.3 其他
除上述方法之外,氨基酸组成分析、氨基酸序列分析、场解析质谱、IR、UV光谱、CD、圆而色谱、生物鉴定法、放射性同位素标记法及免疫学方法等都已应用于多肽类物质的结果鉴定、分析检测之中。
以上简要的介绍了近几年多肽物质分离、分析的常用方法及最新研究方向。随着科学技术水平的不断发展,会有许多更新的分离分析手段不断涌现,因此这一领域的研究具有广阔的前景。
应用SDS-PAGE显示小分子多肽
SDS-PAGE在分离、鉴定和纯化蛋白质方面有着广泛应用,其有效分离范围取决于聚丙烯酰胺的浓度和交联度,其孔径随着双丙烯酰胺与丙烯酰胺比率的增加而减小,比率接近于1:20时,孔径达到最小值。分子量低于10kD的小分子肽类,即使用较高浓度的聚丙烯酰胺凝胶的SDS-PAGE也不能完全分离,或是显不出色,或是显带较弱,带型弥散。且分子量越小,效果也越差。
为了能在SDS-PAGE上显示测定小分子量的多肽,通常采取两种方法:一是增加凝胶的浓度和交联度,在制胶时加入一些可以降低聚丙烯酰胺凝胶网限孔径的溶质分子,使用尿素、甘油或蔗糖等物质;二是选择缓冲液中的拖尾离子的种类和浓度以达到改善多肽的分离效果。
操作步骤
1.电泳缓冲液的配制如下表所示
缓冲液Tris
(mol/L)Tricine
(mol/L)pHSDS
(%)
阳极缓冲液
阴极缓冲液
胶缓冲液0.2
0.1
3.0—
0.1
—8.9*
8.25**
8.4*—
0.1
0.3
* 用HCl调pH
** pH约为8.25
2.丙烯酰胺贮存液的配制
单丙-双丙混合物单丙的百分数双丙的百分数
49.5% T, 3%C
49.5% T, 6%C48
46.51.5
3.0
T:丙烯酰胺的总浓度
C:交联度
3.胶的制备,与一般SDS-PAGE相似,按下表配制分离胶和浓缩胶
组 份分离胶
16% T,6%C浓缩胶
6% T,3%C
49.5% T, 3%C丙烯酰胺溶液(ml)
49.5% T, 6%C 丙烯酰胺溶液(ml)
胶缓冲液(ml)
脲(g)[甘油(ml)]
水(ml)
10%过硫酸铵(μl)
TEMED(μl)
总体积(ml)—
3.3
3.3
3.6[2.4]
1
40
4.0
10.040.48
—
1.00
—
1.50
25
2.5
3.03
4.样品缓冲液
4% SDS
12%甘油
50mmol/L Tris
2%巯基乙醇
0.01% Serva blue
多肽样品与样品缓冲液混合沸煮2min(或40℃温浴30min)。
5.将灌胶的玻璃板固定在电泳装置上,用1%琼脂糖封边,倒入阴极缓冲液,依次加样。
6.将电泳装置放入电泳槽内,倒入阳极缓冲液,将正负极与电泳仪相接,恒电压50~60V,待指示剂进入分离胶后,电压可升至70~90V,恒压约3h待指示剂走出凝胶下缘停止电泳。
7.染色、脱色及胶的保存同SDS-PAGE
『肆』 做手模型的克隆粉可以用什么代替 或者说克隆粉别名叫什么
克隆粉就是石膏粉,很多材料树脂,水泥。
『伍』 酚醛塑料加热后有股味道是什么味道有害吗不要复制的!
酚醛塑料加热到一定程度会分解为苯酚和甲醛,苯酚闻起来有樟脑的味道,甲醛严格回来说是答没有味道的,所以你闻到的可能就是苯酚还有其他杂质的混合味道。苯酚和甲醛都是有毒的,甲醛对人体健康的危害 主要有以下几个方面: a. 刺激作用;甲醛的主要危害表现为对皮肤粘膜的刺激作用,甲醛是原浆毒物质,能与蛋白质结合、高浓度吸入时出现呼吸道严重的刺激和水肿、眼刺激、头痛。 b. 致敏作用:皮肤直接接触甲醛可引起过敏性皮炎、色斑、坏死,吸入高浓度甲醛时可诱发支气管哮喘。c. 致突变作用:高浓度甲醛(当然你所在的地方不会是高浓度的)还是一种基因毒性物质。实验动物在实验室高浓度吸入的情况下,可引起鼻咽肿瘤。苯酚对人体健康的危害 :苯酚对皮肤、粘膜有强烈的腐蚀作用,可抑制中枢神经或损害肝、肾功能。高浓度下也会出现急性中毒,当你们那估计不会出现这种情况的(我们做实验曾经把苯酚整到皮肤上,第二天就起了很多水泡类的东西,不过我们是直接接触粉末状的,你们接触的是气体,相对而言浓度会低好多的)。
『陆』 克隆石是什么
白色大理石粉 树脂 可做成多种图案和色彩 是一种建筑材料
此产品适用于各类商业大厦、酒店大堂、高级公用建筑、公寓楼盘、商场、商店、家居别墅等的外墙干挂、内墙、地面及各种工艺装修,涵盖了建材领域的石材、建陶、家俱三大市场,它所具备的大面积色差小、无辐射、防污、防酸碱性,高硬度、高光洁度及丰富的色彩变化等多项理化性能均远胜于天然石材,是世界顶尖石材之最佳替代品。
『柒』 环氧树脂复制石膏模具,石膏表面刷凡士林做脱模剂行吗
凡士林不是专用脱模剂 只是替代品
玻璃纤维是玻璃钢树脂专用增强材料
往树脂里添沙子不可以 可以填一些碳酸钙 滑石粉等
『捌』 石灰粉与石膏粉什么区别
主要区别有,生产原料不同、生产工艺不同、应用不同,具体如下。
一、生专产原料属不同
1、石灰粉
是以碳酸钙为主要成分的白色粉末状物质。
2、石膏粉
是以天然石膏矿石、脱硫石膏、磷石膏等为原料。
二、生产工艺不同
1、石灰粉
原始的石灰生产工艺是将石灰石与燃料(木材)分层铺放,引火煅烧一周即得。现代则采用机械化、半机械化立窑以及回转窑、沸腾炉等设备进行生产。
三、应用不同
1、石灰粉
广泛用作建筑物的基础、地面的垫层及道路的路面基层。(用石灰膏或消石灰粉可配制石灰砂浆或水泥石灰混合砂浆,用于砌筑或抹灰工程)。2、石膏粉
广泛应用于建材、建筑、化工,农业,作为凝结材料,添加剂等。在食品工业中,它的正式名称被称为“食品添加剂硫酸钙”,俗称“食用石膏”。
『玖』 请问多晶硅行业的专家,你们用的导热油是哪种效果怎样谢谢!
首诺T66导热油 主要成分其实就是氢化三联苯,与我司的德国朗盛Diphyl THT是一样的东西,但T66的价格比我们贵好多!
『拾』 什么叫清水板
清水板,又称装饰混凝土,是清水混凝土板。不同于普通混凝土,它表面平整光滑,色泽均匀,棱角分明,无碰损和污染,只是在表面涂一层或两层透明的保护剂,显得十分天然、庄重。 清水板具有抗紫外线辐照、耐酸碱盐的腐蚀及温和特性,质地柔、轻、耐久,可以弯曲,颜色丰富等诸多特点,经常用于建筑装饰领域。
原生态土具有极好的抗紫外线辐照、耐酸碱盐的腐蚀及温和特性。改性土合成的MCM清水板装饰面材,每平米只有三至八公斤承重,轻、薄且具有柔性,利于与各种保温材料,珠联璧合,抗震、抗裂、耐冻融、抗污自洁等性能都非常优秀。施工方便,不仅让设计师能够放心设计,而且大大降低了施工成本。质地柔、轻、耐久,可以弯曲,特别适合高层建筑和旧工程改造。
(10)克隆粉树脂扩展阅读:
超薄清水板
超薄清水板厚度仅为传统清水的几十分之一,大大减轻建筑承重,显示的是一种最本质的美感,体现的是“素面朝天”的品位。具有朴实无华、自然沉稳的外观韵味,与生俱来的厚重与清雅是普通建筑材料无法效仿和媲美的。
自重轻,智能透气,非常安全;与柔性的保温材料相容性极好;能显著降低耗材、耗能及库存、运输、垃圾排放等成本高达80%;减轻工人搬运劳动强度达60%以上。